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实验问答

25,236,612 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问CRISPR/Cas9 基因敲除

loveliufudan

当设计CRISPR/Cas9基因敲除时，选择转录本是非常重要的。首先，需要考虑目标基因的功能，以确定要敲除哪个转录本。其次，需要考虑转录本的表达水平和分布，以确定是否能够有效地抑制目标基因的表达。NCBI和Ensemble是两个不同的数据库，可能存在数据不同的情况。在选择转录本时，应该查询多个数据库以确定转录本的准确性，并对所有结果进行评估。如果发现在NCBI上找到的最长转录本在Ensemble上

1 回答1716 围观

问细胞共同培养，竞争

loveliufudan

如果想将MC3T3和L929共同培养，可以采用黏附板或分层技术，在同一孔板内分别培养两种细胞。可以选择不同的培养基，以适应两种细胞的生长需求。在培养过程中，应定期检查细胞生长情况，调整培养条件，以维护良好的细胞增殖和存活率。

1 回答411 围观

问样本量计算

loveliufudan

可以使用以下公式计算所需样本量：样本量 = (Z^2 * p * (1-p)) / E^2其中：Z是置信度水平（通常取1.96，对应95%的置信水平）p是发病率（在这里为5%）E是所允许的误差（通常取0.05）所以：样本量 = (1.96^2 * 0.05 * 0.95) / 0.05^2 = 384.16因此，需要至少385个样本才能有95%的置信水平，误差不超过5%。注意：这是理论计算值，实际

2 回答8106 围观

问网状meta新手求大佬们回复

loveliufudan

如果只有A、B、C、D药物和安慰剂对比的随机对照试验，是可以进行网状Meta分析的。网状Meta分析是一种用于评估多项干预效果的分析方法，它将每项干预与其他干预进行比较，并用图形表示结果。对于一致性检验，可以使用I平方（I^2）统计指标来评估Meta分析中存在的差异。I平方可以评估试验间的差异是否可能是随机的，从而评估网状图的一致性。如果I平方值较高，则说明试验间的差异不是随机的，并可能需要进一步

2 回答404 围观

问急急急，求助！endnote打开后原来的文献全都不见了，怎么回事？

loveliufudan

可以试试用recovery my files软件（或者类似的恢复软件）查找一下，看看有没有恢复的可能。

2 回答7499 围观

问meta分析求教学

loveliufudan

关于Meta分析中森林图中对照组的位置是否有要求，并没有明确的规定。然而，一般情况下，Meta分析中使用的森林图通常是将正向结果（即更大的效益或更小的风险）显示在图的左边，反向结果（即更小的效益或更大的风险）显示在图的右边。但是，最重要的是，森林图的图形应该清晰，易于理解，并且符合其他图形的通用惯例。

2 回答440 围观

问Meta分析有可能具有同质性么？

loveliufudan

Meta分析有可能是同质的，但I平方值为0%并不一定表明其具有同质性。I平方是一种度量研究间差异的统计指标，但它只能告诉我们研究间差异的大小，而不能说明其是否是同质的。因此，即使I平方为0，仍需进行异质性分析，以确保结果的可靠性和准确性。

2 回答377 围观

问中国医药投稿

loveliufudan

审稿时间是可以有变化的，因为有很多的因素影响着审稿的速度，例如审稿人的工作量、审稿的难度以及编辑的工作计划等等。如果一个月已经过去了，那么您可以联系该杂志的编辑，询问审稿的进展。如果编辑告诉您审稿进展缓慢，您可以考虑投递到其他杂志。但是，在决定换杂志之前，请认真考虑其他因素，例如该杂志的影响力、发表论文的时间、审稿难度等，以决定是否真的需要换杂志。

2 回答200 围观

问求助 | 文章投稿页边距问题

loveliufudan

“本刊接受文本和表格的首选格式为Word DOC、RTF、XLS。也接受LaTeX文件。文本应在整个文件中双倍行距，左右边距最小为3厘米，顶部和底部边距最小为5厘米。文本应使用标准10或12磅字体。Word和（La）Tex模板可在我们的作者入口网站的稿件投稿指南页面上找到。”“最小为3厘米”意思是可以≥3厘米，你可以试着调整一下。

2 回答721 围观

问meta分析数据提取

loveliufudan

在进行 meta 分析时，如果只需要一部分数据，你可以直接对这部分数据进行计算平均年龄。不需要全部数据。你可以使用简单的统计学方法，如求和除以数量，计算出该数据集的平均年龄。然而，最终的结果可能会受到数据集的质量和大小的影响，所以结果的可靠性需要根据数据的情况进行评估。

2 回答256 围观

问请问有人在science alert上注册过LiveDNA吗？

loveliufudan

Science Alert 上的 LiveDNA 和 LiveDNA 的 ID 是用来识别作者身份的一种方式。如果你已经在 Science Alert 上注册了 LiveDNA，你可以登录到你的账户并查看你的个人资料页面，在那里你可以找到你的 LiveDNA ID。如果你还没有注册，你可以访问 Science Alert 网站并在那里注册一个 LiveDNA 账户

2 回答410 围观

问泛素化实验

loveliufudan

可以考虑以下几种方法来寻找E3下游蛋白：1.利用二抗及免疫沉淀技术：在E3泛素化试前后进行免疫沉淀，比对两次免疫沉淀结果以寻找E3泛素化的下游蛋白。2.利用蛋白质组学方法：通过高通量蛋白鉴定技术，例如质谱或者二维凝胶电泳，以寻找E3下游的蛋白。3.利用免疫印迹：在E3泛素化前后进行免疫印迹，比对两次免疫印迹结果以寻找E3泛素化的下游蛋白。请注意，以上方法的精确性可能会受到多种因素的影响，并且需要多

2 回答979 围观

问GPC测分子量只有一个峰说明什么

loveliufudan

分子量在600到2800之间的结果表明，可能是因为标准品选定有问题或者仅用活性炭去除芳香族氨基酸的方法不够有效，导致纯度较低。也可能是GPC仪器的误差造成的。如果结果有问题，建议进一步证实该结果的准确性。

2 回答871 围观

问qpcr的3个复孔，其中一个cq值>0.5但是<1的孔可以纳入计算吗？

loveliufudan

Cq值的差距决定了是否可以纳入计算的标准。通常，差距小于0.5表示检测效率较高，可以纳入计算；差距大于0.5则说明检测效率较低，不可以纳入计算。对于Cq值差距为＞0.5但是<1的孔，具体是否可以纳入计算需要根据实验具体情况判断。如果不确定是否纳入计算，可以考虑重新检测或使用其他方法来确定Cq值的正确性。

2 回答896 围观

问求助，选何种类型D-glucose

loveliufudan

在高糖诱导细胞损害模型中，所使用的葡萄糖应为D-葡萄糖，来源不限，Sigma公司的D-葡萄糖是一种可选的来源。有些研究者喜欢使用该公司的D-葡萄糖作为研究材料，这并不代表它是最好的选择，仍需要通过实验来验证其适用性。

2 回答595 围观

问TUNEl法检测某种细胞凋亡，每个药物干预组和模型组DAPI数量有差别吗？是和这种细胞

loveliufudan

TUNEL法是一种检测细胞凋亡的方法，不同药物的预处理可能会影响细胞的凋亡情况，从而影响TUNEL法检测出的DAPI数量。因此，预处理药物对检测结果是有影响的。但是具体差别需要根据实验来决定，不能简单确定。

2 回答470 围观

问流式测血小板PAC-1表达

loveliufudan

建议进行以下几点实验优化：1.重新检查抗体使用是否正确，确保cd61抗体能够清晰地标记血小板。2.检查抗体浓度和标记时间是否适当。3.确认抗体与细胞间的亲和力。4.检查仪器的正确性和仪器的配置是否合适。5.重新制备细胞样品，确保细胞质量。6.使用其他抗体试试，试图在其他细胞上重新获得高表达。

2 回答1786 围观

问异嗜性抗原和交叉抗原的区别？

sswei

异嗜性抗原指的是不同种属之间有共同抗原而发生交叉反应，交叉抗原只要求含共同抗原表位。异嗜性抗原不一定是交叉性抗原，异嗜性抗原是异种生物之间，交叉性抗原是指两个抗原有相同的表位。

1 回答2446 围观

问细胞周期、细胞凋亡

loveliufudan

TP53 (tumor protein p53)是一个重要的肿瘤抑制基因，它可以调节细胞周期和凋亡。如果细胞中蛋白质p53水平增加，它可以阻止细胞分裂并诱导凋亡。在您的实验中，细胞转染TP53质粒导致蛋白质p53水平增加，进而阻止细胞分裂并诱导细胞凋亡，因此显示细胞活力下降，细胞周期阻滞在S期，细胞凋亡减少。因此，可以说TP53是一个凋亡基因。

2 回答850 围观

问戊二醛固定多肽后可以用水漂洗吗

诸葛靓LR1

不建议用水，可能会与水发生化学反应，破坏连接

4 回答829 围观

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