实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问大鼠是否需要禁食取粪便，代谢组学

loveliufudan

饮食干预对动物代谢组学研究的影响是显著的。禁食12小时能够获得更多的应激性粪便样本是理想的，但如果你的实验设计不允许禁食，那么不禁食取粪便可能对代谢组学结果产生影响。不禁食取粪便可能导致动物消化道内的环境和微生物群落状态发生变化，进而影响粪便样本的代谢组学数据。此外，动物的饮食状况也可能影响代谢组学数据的准确性。因此，如果你不能禁食取粪便，我建议考虑以下几点：控制实验变量：尽量保持动物的饮食环境稳

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问小鼠如何经皮颈动脉取动脉血

sswei

先将小鼠仰位固定，切开颈部皮肤，在气管两侧分离出颈动脉，远心端结扎，将针头朝近心端刺入，动脉血压力大，只需轻轻抽吸。

3 回答2814 围观

问引物探针检测低浓度样本不稳定，并且检测浓度与真实浓度相比忽高忽低，这种情况下该如何优化？使反应体系更稳定。

土井挞克树

增加稳定剂，选用成熟的试剂会稳定体系。

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问WB曝光的条带整体模糊，条带边界发毛，这是为什么？

申东熙老伯

可能是转膜的时候，三明治结构之间滑动了。

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问实验操作求助

土井挞克树

是的，配方中的甲醇是指无水甲醇。

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问sci查重需要将参考文献作为文本放入文章结尾吗？以及表格中的备注需要一并查重吗，谢

土井挞克树

需要的，参考文献不纳入查重范围

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问保护性因素和危险因素联合做二元logistic回归和roc曲线该怎么做？

土井挞克树

不建议直接做roc曲线，roc在截止值的特异度预测还不错，但是之外的预测率可仅供参考

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问期刊推荐求助

土井挞克树

Journal of Cystic Fibrosis这个不错

3 回答244 围观

问请问qpcr的目的基因cq值在多少范围合适呀？

申东熙老伯

cq值范围跟浓度相关，一般18－35个循环都可以。

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问【SOS】转染实验实在是搞不出来😭

土井挞克树

你的试剂没有问题，考虑还是时间不合适，可以验证一下时间的适应性。

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问提问：OT-1和Rag2-/-OT-1小鼠具体区别是什么？

土井挞克树

OT-1小鼠cd8 T细胞既表达内源性TCR又表达转基因TCR，但是不好检测

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问求助各位大神过氧化氢诱导细胞衰老模型怎么构建？用200uM刺激4h培养24h，b-半乳糖苷酶未染上色

龙大人驾到

构建过氧化氢诱导细胞衰老模型的方法如下：1.细胞培养：选择需要研究的细胞株，并在培养皿中进行细胞培养。2.添加过氧化氢：在培养液中添加适量的过氧化氢（通常为200 μM），然后用于刺激细胞4小时。3.细胞观察：在刺激后1天，观察细胞的生长情况，并进行相关的实验操作。对于b-半乳糖苷酶未染上色的情况，可能是由于染色方法不正确或染色时间过短造成的。也有可能是由于细胞衰老的过程影响了b-半乳糖苷酶的表达

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问想请教下各位，有人做过小鼠股骨冰冻切片吗？保存在-80的股骨标本后续需要怎么做？

huarenqiang5

后续是否脱钙可以根据你实验的需求来决定，可以脱钙也可以不脱钙。但是脱水是必须的。

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问动脉内膜

huarenqiang5

有单层扁平上皮细胞、胆囊状细胞、间充质等

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问想要研究不同比例的DNA和蛋白质分别包裹在纳米颗粒上同时处理DC引起的免疫反应差异该如何设计实验？

龙大人驾到

如果想研究不同比例的DNA和蛋白质分别包裹在纳米颗粒上同时处理DC引起的免疫反应差异，可考虑以下实验设计：1.生产纳米颗粒：按照比例合成不同比例的DNA和蛋白质纳米颗粒。2.动物模型：使用动物模型（例如小鼠），比较不同比例的DNA和蛋白质纳米颗粒对DC引起的免疫反应的影响。3.免疫反应评估：评估不同比例的DNA和蛋白质纳米颗粒对动物免疫系统产生的影响，包括测量细胞因子和抗原呈递分子的表达。4.数据

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问各位大神，请问合成的30多bp带有fam的双链DNA，进行核酸变性电泳时跑出来条带不单一，形状像吐司是什么原因呢？如下图

土井挞克树

dna纯度不够，先纯化dna再跑

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问请问哪里能买到牛病毒性腹泻病毒和阿卡斑病毒的标准毒株？

土井挞克树

可以问一下兽医相关实验室，牛病毒性腹泻病毒一般都有。

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问请问洁净室沉降菌监测，国标上万级的结果是≤3/cfu，采用静态监测和动态监测结果会不同吗？

龙大人驾到

洁净室的沉降菌检测主要目的是评估洁净室内的细菌数量。根据国标，万级洁净室的结果应不大于3个CFU/m3。静态检测和动态监测结果可能会有所不同，因为它们使用的方法不同。静态检测通常是在洁净室内放置一些培养基，然后在特定时间后收集样本，以检测细菌数量。动态监测则是不断监测洁净室内的空气，以评估细菌数量。由于静态检测和动态监测使用的方法不同，因此结果可能会有所不同。静态检测可能更容易受到环境因素的影响，

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问细胞单克隆对培养基有什么要求吗，日常培养用的化学合成无血清培养基可以用来做单克隆吗

龙大人驾到

单克隆细胞对培养基的要求一般比较严格，因为它们需要适宜的生长条件来保持稳定的生长和分裂。化学合成无血清培养基，是一种常用的培养基，它们通常可以用于细胞的日常培养。但是，如果你想要进行单克隆细胞培养，则可能需要使用含有血清的培养基，例如有血清培养基（FBS）或牛血清。这是因为血清可以提供必需的生长因子和营养，以维持细胞的生长和分裂。

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问引物设计求助！！！

xijun_song

什么基因？可以帮设计引物，欢迎交流。

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