实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问求离子凝胶法制备壳聚糖纳米颗粒的配方!(浓度，比例，PH之类的细节)

土井挞克树

配方: 0.9g壳聚糖溶解在1%v/v的乙酸溶液里，制备壳聚糖溶液，PH为4。将1.2g三聚磷酸钠溶解在100ml去离子水中制备TPP溶液。取20ml壳聚糖溶液放到烧杯中，500转速磁力搅拌，往壳聚糖溶液里逐滴加入TPP溶液共20ml，即壳聚糖溶液和TPP溶液体积比为1:1。发现在滴入TPP溶液时出现乳白色的小球，滴完之后继续磁力搅拌30min，得到很多乳白色或者透明的小球，以及一些絮状的乳白色沉

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问论文三线表？

huarenqiang5

可以把分组竖着放，项目横着放，然后再接上表做续表。

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问投稿ECAM

dxyc42u

发邮件或者打电话问下编辑好一些

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问《医学综述》投稿处于通过万方查重，下一步是什么？求解答

loveliufudan

如果文章通过了万方查重，接下来可能会进入同行评审阶段。在此阶段，编辑会邀请专业领域的审稿人对文章进行评审，根据审稿人的意见和建议，编辑将最终决定是否接受文章发表，并通知作者。如果您的文章没有通过万方查重，编辑可能会要求您修改文章以符合出版要求，然后再次进行查重和评审。一般来说，整个审稿流程需要时间，通常需要几个月的时间。如果您有任何疑问，建议您直接联系《医学综述》的编辑部，向他们询问您文章的状态以

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问IP 磁珠和琼脂糖

loveliufudan

一般来说，抗体可以偶联在磁珠表面进行免疫磁珠层析等实验。但是，不同类型的抗体偶联到磁珠上的适用性可能会有所不同，因此最好在实验前进行一定的验证。建议可以先购买一些小规模的磁珠进行实验验证，或者咨询厂家或其他有经验的专业人士的建议。同时，需要注意抗体的偶联条件，如pH值、交联剂、偶联时间等，这些条件对于不同类型的抗体可能会有差异，需要进行优化和确定。

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问qpcr内参一定要选择GAPDH嘛

dxyc42u

不一定非要选择GAPDH啊，βactin也是可以的

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问求，新西兰兔麻醉药物及用量

loveliufudan

兔子常用的麻醉药物包括异氟醚、七氟醚、地西泮和氯胺酮等。使用哪种麻醉药物取决于实验的具体需求和兔子的体重、年龄等因素。常用的剂量范围如下：异氟醚：2-5%浓度，每分钟流量1-2L/min；七氟醚：1-3%浓度，每分钟流量1-2L/min；地西泮：2-5 mg/kg，可以与其他药物联合使用；氯胺酮：20-40 mg/kg。

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问小鼠胃癌模型求助

loveliufudan

胃癌小鼠移植瘤和转移瘤模型是研究胃癌生物学和治疗的重要模型之一。一般可以使用人类胃癌细胞系在小鼠体内移植建立胃癌模型。以下是一些常用的胃癌细胞系和小鼠模型：胃癌细胞系：MKN-45：来自人类胃腺癌的细胞系，常用于建立胃癌移植瘤和转移瘤模型。AGS：来自人类胃腺癌的细胞系，常用于胃癌生物学和治疗的研究。NUGC-3：来自人类胃腺癌的细胞系，常用于胃癌转移瘤的研究。小鼠模型：裸鼠模型：将胃癌细胞注射到

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问拟南芥遗传转化对质粒大小的要求

loveliufudan

对于拟南芥的遗传转化，质粒大小是一个重要的因素。一般来说，质粒大小在10-15 kb以内的质粒比较容易转化到拟南芥中，而大于15 kb的质粒则可能会降低转化效率。因此，你的质粒大小14.5 kb左右，理论上来说是可以转化到拟南芥中的。当然，除了质粒大小外，还有其他因素也会影响拟南芥的遗传转化效率，例如使用的转化方法、所选用的细胞株、质粒构建的复杂度等等。因此，如果你想要高效地转化你的质粒到拟南芥中

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问带病毒的粪便悬液接毒细胞，细胞1.5小时出现CPE并大量死亡（有图）。

loveliufudan

从您提供的信息来看，可能有多种原因导致细胞的死亡，需要进一步的实验和检测来确认。以下是一些可能的原因：病毒负荷过高或细胞对病毒过于敏感，导致细胞直接死亡。病毒感染后产生的细胞毒素或炎症因子导致细胞死亡。您使用的粪便悬液中可能含有其他致病微生物或毒素，这些物质也可能导致细胞死亡。您使用的细胞可能存在问题，例如感染了其他微生物或受到了细胞培养不当等因素的影响。针对这些问题，您可以考虑进行以下实验或检测

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问不加反转录酶，其他成分相同的负对照作为NRT，结果应该是怎么样的？出现峰值正常吗？

土井挞克树

不正常，因为不加反转录酶是不会有产物的，也就不会有峰值

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问请问大家这个图怎么讲解?

土井挞克树

两种物质的发展趋势是相似的，但是峰值前后不同。

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问大鼠脑组织包埋后放到了-80冰箱，做冰冻切片时要提前多久取出呢

loveliufudan

在进行冰冻切片前，需要将大鼠脑组织包埋后的样本从-80℃冰箱中取出并进行适当的处理。一般来说，取出的时间会根据不同实验要求和不同样本的特性而有所不同，但可以参考以下几点建议：1.取出的时间应尽量缩短，以避免组织在室温下解冻导致切片质量下降。2.根据所使用的切片机器和刀片的不同，取出时间也会有所不同。一般来说，如果使用的是手动切片机，可以在取出后稍微放置一段时间以让组织适应室温，而如果使用的是自动切

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问如何定量检测细胞膜上脂质含量？

loveliufudan

定量检测细胞膜上脂质含量可以使用荧光染料，如荧光磷脂。下面是一种可能的实验步骤：处理细胞：将需要检测脂质含量的细胞培养至对数生长期，并用PBS洗涤一次。可以选择用一些药物（如脂肪酸、LDL、TNF-α等）来影响细胞膜上脂质含量，比较不同处理组间的差异。荧光染色：将细胞用含有荧光磷脂的染色液体进行荧光染色。可以选择不同的染色剂和浓度来优化染色效果。将细胞染色后，用PBS洗涤掉未结合的染料。荧光分析：

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问M0巨噬细胞诱导成M1型LPS要加多少呢？

土井挞克树

看你的lps浓度，如果是1mg/ml的话就需要稀释到10ug左右

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问流式fc block可以用小鼠血清吗？

sswei

DC染色前可以用小鼠血液离心后的血清过滤作为封闭液，但是准确性和稳定性较流式fc block差些。

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问求助2937细胞转染的相关问题？

loveliufudan

这种情况可能是由于以下一些原因导致的：过度传代：HEK293细胞虽然可以进行长期传代，但过度传代会导致细胞生长减缓，形态变差。建议每次传代不要超过10倍左右。染色体不稳定：HEK293细胞是一种染色体不稳定的细胞系，经常出现染色体异常和突变。如果细胞已经连续传代多次，可能会导致染色体的不稳定性增加，从而影响细胞的生长和形态。感染：HEK293细胞有可能被细菌、真菌或者病毒感染。如果在细胞培养过程中

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问review投稿肝癌分子

dxyc42u

Frontiers of Materials Science

4 回答201 围观

问chip-seq发文章可以不做重复吗？

dxyc42u

看杂志的，有的可能不需要的，有的就会要

4 回答382 围观

问pcr的时候目的基因比内参表达还高的原因是什么

小葡萄1

1.如果同管扩增，引物之间是否有竞争存在2.操作加样时是否有失误3.还有循环次数因素4.一次的现象不能下这样的结论，建议再重复几次。

4 回答1211 围观

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