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【救助】请问96孔板铺的细胞少了还能拯救吗?
juyue2010
如果刚铺不久,可以的,否则就重新铺一块板,补救更合适一些。
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问
噬菌体展示技术建库
huarenqiang5
自己建库的话比较难,要的时间也比较多,还是建议先生物公司合作比较省事。
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问
外周血提RNA降解
huarenqiang5
可以按以下实验步骤进行:1.收集新鲜人血液并立即用Ficoll分离白细胞。2.用冰冷PBS洗涤外周血淋巴细胞3次。3.在50ml塑料离心管中收集外周血淋巴细胞,并加入7ml裂解缓冲液(可溶解达到5×108个外周血淋巴细胞),然后剧烈涡旋振荡以溶解细胞。4.加入7体积(49m1)4molL氯化锂,4°℃孵育15~20小时(过夜)。5.将悬液转移到30mlCorex管内,在吊桶式转头内4°℃离心2小时
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问
小鼠粪便菌群移植
huarenqiang5
对于小鼠粪便样本的采集,建议采用拎尾法进行采集。小鼠排便后用灭菌的镊子夹取小鼠粪便,样本通常需 1g 左右,最少不低于 0.2g。样本采集后立刻放入-80℃冰箱进行低温保存,建议进行备份。若条件不允许,可短期(1 个月内)在-20℃冰箱中冷冻保存。注意在样本冻存期间,请勿反复冻融。 送样时请尽量使用冰盒(泡沫盒+干冰+冰袋),以保证运输过程中的低温条件(干冰的挥发消耗量约为 3 公斤/天)。在打包
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酶标仪黑色96孔板
huarenqiang5
黑色的酶标板一般用于荧光检测。而不能同时测OD。
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【求助】小鼠血清的解冻
huarenqiang5
血清解冻需采用逐步解冻法:-20°C或 -80 C低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20 ℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。影响使用效果。
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问
博来霉素法构建肺纤维化动物模型?
huarenqiang5
【造模方法】小鼠:选用体重18~20g的雄性昆明小鼠。氯胺酮(100mg/2ml)腹腔注射(10mg/100g),将实验动物麻醉后仰卧,纵行切开皮肤,钝性分离暴露气管,用4号针头刺入气管,尽量接近气管分叉处,将0.05ml博来霉素缓慢滴入(博来霉素每支8mg,用前以生理盐水配制成0.2%药液),立即将动物直立旋转,使药液在肺内均匀分布,然后缝合皮肤,局部乙醇消毒防止感染。同样,也可选用雌性BLAB
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问
western blot 相关实验
huarenqiang5
考虑以下几点原因:①. 因为蛋白上样量低或目的蛋白在来源组织或细胞中的表达量并不丰富造成。可适当加大蛋白上样量,也可通过提高抗体稀释度或采用灵敏度更高的发光底物来调整,如Enlight-plus。②. 蛋白没有充分转移到膜上。转膜后可通过预染Marker判断转膜效率,也可用丽春红染膜、用考马斯亮蓝染胶,判断转膜效率。③. 抗体效价不高,用量不足,孵育时间太短,或抗体反复使用保存不当而失活。可考虑更
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问
细胞支原体检测可以不在生物安全柜进行吗
huarenqiang5
细胞支原体检测需要在生物安全柜进行,并且需要对生物安全柜进行消毒处理。
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问
meta分析直接把 发病率IRR 直接当成OR值进行比较
huarenqiang5
把发病率直接当成OR值进行比较肯定不合适。
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学位论文
sswei
要根据该论文是否有创新性,是否符合杂志的要求等情况才能决定可否发表。
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问
求助:骨科杂志分区
土井挞克树
类似OSTEOARTHRITIS AND CARTILAGE的是一区杂志
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世界中医药杂志 介绍信和授权书
土井挞克树
如果超过了时间就找编辑好好说一下吧,不过希望不大
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frontiers in physiology投稿相关问题
土井挞克树
等待,既然已经说明那么编辑看到了就会处理
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求问关于质粒转酵母的问题
huarenqiang5
考虑问题出在质粒上,首先需要对质粒进行电泳检测,电泳结果需为大小正确且明亮的条带;其次核对筛选培养基的选用和配制是否正确;排除上述因素,就需要复查酵母菌的外观气味是否正常,或者进行镜检。
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单纯的神经元细胞会分泌炎症因子吗?
sswei
单纯的神经元细胞不能分泌炎症因子。
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流式细胞仪检测问题求助?
huarenqiang5
1、首先确认你的细胞已经从G0/G1期出来了,其次G2 S期的细胞本来就比G1的要少,你可以加个G2期阻滞的化合物做个对照。2、其次单染需要乙醇固定的时间长些,起码2小时以上,过夜也没问题。3、乙醇不能用纯乙醇,需要70%的乙醇。
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脑组织病理
huarenqiang5
图一考虑是神经元细胞,图二考虑是胶质细胞。
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问
请教各位转染CRISPR文库慢病毒的问题
juyue2010
对于每一种细胞,都有自己合适的MOI,这里说的0.3MOI是指病毒感染后30%细胞阳性。
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问
冻存细胞复苏后,一直有黑点漂浮,是支原体污染吗
默然前进前行
首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:(1)细胞生长过老,破碎的细胞残骸;(2)血清质量不好,反复冻融的结果;(3)配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;
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