冻存细胞复苏后，一直有黑点漂浮，是支原体污染吗

首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。

如果在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点出现前相比，没有任何变化，那么，黑点的出现可能与以下几种情况有关：

(1)细胞生长过老，破碎的细胞残骸;

(2)血清质量不好，反复冻融的结果;

(3)配制培养基的pH值偏高，不宜细胞生长;

(4)配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;

(5)培养原代细胞中出现小黑点，可能是原代组织中的杂质，多次传代可以消除。

不是，光学显微镜看不到支原体。

可能是黑胶虫污染，少量的时候赶紧处理。

可能是支原体感染。问题可能出在冻存前，也可能在冻存后，你再复苏一批看看吧。

黑点漂浮可能是支原体污染的迹象之一，但也有其他可能性。支原体是一种细菌，可以通过空气、水和接触等方式传播。它们通常会感染动物细胞，并在培养皿中形成类似于细菌或真菌的结构。

如果您的细胞已经冻存并在复苏后发现黑点漂浮，您可以进行支原体检测以确认是否存在支原体污染。支原体检测方法包括PCR检测、细胞培养检测和荧光染色等。

除了支原体污染外，黑点漂浮还可能是其他类型的污染，如细胞碎片、沉淀物、空气微粒、细胞凝聚体等。因此，建议您进行细菌和真菌检测以确认是否存在其他类型的污染。如果检测结果呈阳性，则需要立即采取措施消除污染并防止再次发生。

主要考虑是支原体或黑胶虫污染，及时处理。

黑点漂浮不一定是污染，你可以观察一下你的培养基，培养基浑浊才是污染。

可能就是刚复苏细胞状态不好。支原体污染细胞生长会变慢。