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实验问答

27,904,697 科研人在看

问污泥中的酶可以提纯吗？

土井挞克树

可以，但是要先确认酶含量，然后进行提纯

3 回答1178 围观

问配体外转录体系时模板加入的时机

土井挞克树

在buffer之前加，不然转录容易失败

3 回答399 围观

问粪便非靶向代谢组前处理

土井挞克树

去离子水洗超声，再用甲醇润洗。

3 回答400 围观

问质粒提取浓度65—99 ng/ul，浓度低吗

申东熙老伯

质粒浓度不高，但是上样量够了，如果正确的话肯定是很亮的条带，你这个质粒不太正常...

5 回答14405 围观

问3T3脂肪细胞诱导：每次加诱导剂确实很小心沿着边儿加的，加完了有不少絮状卷边，怎么办

土井挞克树

可以适当把诱导剂稀释一下再加。

4 回答789 围观

问3T3脂肪细胞诱导：脂肪细胞诱导成功有什么很明显的现象吗？显微镜下能明显看到脂滴吗？培养基颜色会变化明显吗？

loveliufudan

在成功诱导3T3成为脂肪细胞后，通常会出现以下明显的现象：显微镜下能看到脂滴：成熟的脂肪细胞通常含有丰富的脂滴，这些脂滴在显微镜下可见，且大小和数量与细胞成熟度相关。当细胞诱导为脂肪细胞后，显微镜下能够观察到明显的脂滴形成。细胞形态变化：3T3细胞在诱导成脂肪细胞后，形态通常会发生明显的变化，细胞变得更大、更圆，呈现出脂肪细胞的典型形态特征。培养基颜色变化：在脂肪细胞诱导过程中，由于诱导剂中含有不

4 回答861 围观

问肺纤维化小鼠造模方法？

土井挞克树

目前用于模型制作的诱导剂很多，如博来霉素、百草枯、高浓度氧、石棉以及放射线等均可以引起肺部损伤，最终导致肺纤维化，其中以博来霉素最为常用。

3 回答1684 围观

问PCR 目的基因扩增

huarenqiang5

考虑以下几点原因：引物没有设计好、模板浓度过低、温度过高等。

3 回答1537 围观

问聚类分析和多重对应分析（MCA）

huarenqiang5

1.聚类通过把目标数据放入少数相对同源的组或“类”(cluster)里。分析表达数据。 (1)通过一系列的检测将待测的一组基因的变异标准化，然后成对比较线性协方差。 (2)通过把用最紧密关联的谱来放基因进行样本聚类，例如用简单的层级聚类(hierarchical clustering)方法。这种聚类亦可扩展到每个实验样本，利用一组基因总的线性相关进行聚类。 (3)多维

3 回答2959 围观

问求助投过“中药药理与临床”的大神

sswei

样本数太少，对实验结果的可信度低，建设加大样本量，来提高实验的可靠性。

4 回答393 围观

问世界中医药投稿

sswei

该刊的审稿周期有些长，需耐心等待。

4 回答808 围观

问流式细胞仪

sswei

流式细胞仪操作注意点:1. 因实验需保证待检测样品细胞为单细胞悬液，因此在细胞培养、制备阶段，贴壁细胞需用先用胰酶消化成单个细胞，而后再后收集待测样品细胞；胸腺、脾脏和淋巴结等外周免疫器官，主要由免疫细胞组成，只需直接将脏器经钢网研磨即可制成单细胞悬液；实体脏器肺脏、肝脏和肿瘤组织内含有较多的结缔组织，而实体脏器细胞之间一般结合紧密，所以直接简单的将脏器进行研磨是无法得到理想的单细胞悬液的，因此，

4 回答697 围观

问包埋切片

huarenqiang5

切片一般是横着切，切片及染色肾组织要求为未经任何处理的新鲜组织，应立即送入恒温冷冻切片机（cryostat）内，将肾组织放置于金属托上，周围添加OCt 　compound 包埋剂（如无包埋剂，滴加数滴生理盐水亦可），迅速冷冻至-20℃，切出3~5μm厚的冰冻切片附贴于载玻片上，至少需切10张以上备用。

3 回答996 围观

问如图，pcr结果曲线一直不超过0，且呈现负值的原因？

huarenqiang5

你的这个情况主要考虑是设置的问题导致，建议重新设置一下。

3 回答285 围观

问同源重组连接问题

loveliufudan

从你提供的信息来看，可能有以下几个原因导致你的载体体和目标片段同源重组连接不成功：同源重组效率低。同源重组是一种复杂的过程，很容易受到多种因素的影响，如DNA序列相似性、长度、GC含量、连接比例、转化复苏等。如果同源重组效率很低，那么单菌落的数量就会很少，甚至没有。建议检查DNA序列和GC含量，同时考虑优化连接比例、增加转化量等措施来提高同源重组效率。质粒不稳定。质粒构建成功后，可能存在不同程度的

3 回答1806 围观

问电镜分析

huarenqiang5

绿色和红色分别是溶酶体和蛋白颗粒。

2 回答520 围观

问cytoscape可以实现两组基因的KEGG/GO分析的对比吗，如果可以是怎么操作呢

loveliufudan

对于两组基因的KEGG/GO分析的对比，Cytoscape可以使用插件EnrichmentMap来实现。下面是大致的操作步骤：安装EnrichmentMap插件：在Cytoscape菜单栏中选择“Plugins”->“Manage Plugins”，在搜索框中输入“EnrichmentMap”，找到该插件并点击“Install”。导入基因集数据：将两组基因的KEGG/GO分析结果导出为两个独

3 回答1065 围观

问求助：多水平重复测量数据分析

huarenqiang5

这种情况可以使用非参数统计法进行分析。

3 回答450 围观

问求助：使用lipo3000向hepg2细胞内转染siRNA失败

loveliufudan

根据你提供的实验步骤和结果，我可以提出一些可能需要改进的方面：细胞密度：你使用的细胞密度可能需要调整。对于HepG2细胞，推荐的密度是每孔5-8万个细胞。如果使用的细胞太多，可能会影响转染效率。转染试剂：你使用的是Lipo3000试剂，可能需要考虑更换其他转染试剂进行比较。例如，使用RNAiMAX试剂或者JetPRIME试剂等。需要注意的是，不同的试剂可能适用于不同的细胞类型，需要根据自己的实验条

4 回答3554 围观

问HE染色结果

土井挞克树

脱水有些过度了，已经丧失了正常的状态。

5 回答1089 围观

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