实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问污泥中的酶可以提纯吗？

土井挞克树

可以，但是要先确认酶含量，然后进行提纯

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问配体外转录体系时模板加入的时机

土井挞克树

在buffer之前加，不然转录容易失败

3 回答276 围观

问粪便非靶向代谢组前处理

土井挞克树

去离子水洗超声，再用甲醇润洗。

3 回答236 围观

问质粒提取浓度65—99 ng/ul，浓度低吗

申东熙老伯

质粒浓度不高，但是上样量够了，如果正确的话肯定是很亮的条带，你这个质粒不太正常...

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问3T3脂肪细胞诱导：每次加诱导剂确实很小心沿着边儿加的，加完了有不少絮状卷边，怎么办

土井挞克树

可以适当把诱导剂稀释一下再加。

4 回答527 围观

问3T3脂肪细胞诱导：脂肪细胞诱导成功有什么很明显的现象吗？显微镜下能明显看到脂滴吗？培养基颜色会变化明显吗？

loveliufudan

在成功诱导3T3成为脂肪细胞后，通常会出现以下明显的现象：显微镜下能看到脂滴：成熟的脂肪细胞通常含有丰富的脂滴，这些脂滴在显微镜下可见，且大小和数量与细胞成熟度相关。当细胞诱导为脂肪细胞后，显微镜下能够观察到明显的脂滴形成。细胞形态变化：3T3细胞在诱导成脂肪细胞后，形态通常会发生明显的变化，细胞变得更大、更圆，呈现出脂肪细胞的典型形态特征。培养基颜色变化：在脂肪细胞诱导过程中，由于诱导剂中含有不

4 回答633 围观

问肺纤维化小鼠造模方法？

土井挞克树

目前用于模型制作的诱导剂很多，如博来霉素、百草枯、高浓度氧、石棉以及放射线等均可以引起肺部损伤，最终导致肺纤维化，其中以博来霉素最为常用。

3 回答680 围观

问骨髓细胞做凋亡的qp一般需要做哪几个基因？

天一湖医者

主要包括Bcl-2、Bcl-xL、Bcl-w、Mcl-1等

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问聚类分析和多重对应分析（MCA）

huarenqiang5

1.聚类通过把目标数据放入少数相对同源的组或“类”(cluster)里。分析表达数据。 (1)通过一系列的检测将待测的一组基因的变异标准化，然后成对比较线性协方差。 (2)通过把用最紧密关联的谱来放基因进行样本聚类，例如用简单的层级聚类(hierarchical clustering)方法。这种聚类亦可扩展到每个实验样本，利用一组基因总的线性相关进行聚类。 (3)多维

3 回答2462 围观

问求助投过“中药药理与临床”的大神

sswei

样本数太少，对实验结果的可信度低，建设加大样本量，来提高实验的可靠性。

4 回答293 围观

问世界中医药投稿

sswei

该刊的审稿周期有些长，需耐心等待。

4 回答506 围观

问PC12细胞莫名死亡

天一湖医者

培养基污染，耗材污染，环境污染，培养箱污染，细胞冻存时污染，人为操作污染，一切都有可能

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问流式细胞仪

sswei

流式细胞仪操作注意点:1. 因实验需保证待检测样品细胞为单细胞悬液，因此在细胞培养、制备阶段，贴壁细胞需用先用胰酶消化成单个细胞，而后再后收集待测样品细胞；胸腺、脾脏和淋巴结等外周免疫器官，主要由免疫细胞组成，只需直接将脏器经钢网研磨即可制成单细胞悬液；实体脏器肺脏、肝脏和肿瘤组织内含有较多的结缔组织，而实体脏器细胞之间一般结合紧密，所以直接简单的将脏器进行研磨是无法得到理想的单细胞悬液的，因此，

4 回答459 围观

问包埋切片

huarenqiang5

切片一般是横着切，切片及染色肾组织要求为未经任何处理的新鲜组织，应立即送入恒温冷冻切片机（cryostat）内，将肾组织放置于金属托上，周围添加OCt 　compound 包埋剂（如无包埋剂，滴加数滴生理盐水亦可），迅速冷冻至-20℃，切出3~5μm厚的冰冻切片附贴于载玻片上，至少需切10张以上备用。

3 回答691 围观

问为什么细胞使用不同浓度的药物处理后，cck-8结果不理想？

不做科研趴菜

药物处理前关注细胞状态，分细胞时尽量密度均一

4 回答1210 围观

问论文写作范围请教

羽2BRD

可以写啊，相关的心理研究都行的。比如青少年犯罪与心理健康的相关性分析。

5 回答212 围观

问电镜分析

huarenqiang5

绿色和红色分别是溶酶体和蛋白颗粒。

2 回答396 围观

问cytoscape可以实现两组基因的KEGG/GO分析的对比吗，如果可以是怎么操作呢

loveliufudan

对于两组基因的KEGG/GO分析的对比，Cytoscape可以使用插件EnrichmentMap来实现。下面是大致的操作步骤：安装EnrichmentMap插件：在Cytoscape菜单栏中选择“Plugins”->“Manage Plugins”，在搜索框中输入“EnrichmentMap”，找到该插件并点击“Install”。导入基因集数据：将两组基因的KEGG/GO分析结果导出为两个独

3 回答426 围观

问求助：使用lipo3000向hepg2细胞内转染siRNA失败

loveliufudan

根据你提供的实验步骤和结果，我可以提出一些可能需要改进的方面：细胞密度：你使用的细胞密度可能需要调整。对于HepG2细胞，推荐的密度是每孔5-8万个细胞。如果使用的细胞太多，可能会影响转染效率。转染试剂：你使用的是Lipo3000试剂，可能需要考虑更换其他转染试剂进行比较。例如，使用RNAiMAX试剂或者JetPRIME试剂等。需要注意的是，不同的试剂可能适用于不同的细胞类型，需要根据自己的实验条

4 回答3092 围观

问HE染色结果

土井挞克树

脱水有些过度了，已经丧失了正常的状态。

5 回答919 围观

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