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        Qpcr求助,求问老师,有遇到过这种大部分ct值 undete的情况吗?

        相关实验:反向 PCR (inverse-PCR)

        user-title

        wsndy111

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        3 个回答

        user-title

        dxyc42u

        有帮助

        你这溶解曲线有非特异性扩增,好好排查下

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        是的,有遇到过大部分CT值为undetermined的情况。这种情况可能是由以下因素引起的:

        样本的DNA含量太低或者质量不好,无法扩增出足够的信号。您可以重新提取或纯化DNA,或者使用更加敏感的PCR反应体系来扩增目标序列。

        反应体系中的某些成分存在问题。例如,如果反应缓冲液的pH值不正确、酶的活性受到损害或者掺杂了抑制物质等,都可能导致扩增效率低下。您可以尝试优化PCR反应体系,例如更换反应缓冲液、优化酶的浓度等。

        引物的设计不合理。如果引物的设计不合理,可能导致PCR扩增效率低下。您可以尝试更换引物,或者重新设计引物。

        PCR反应的温度和时间参数不合适。如果反应温度和时间参数不正确,可能会导致扩增效率低下。您可以尝试优化PCR反应温度和时间参数。

        检测方法的灵敏度不足。如果检测方法的灵敏度不足,可能会导致大部分的CT值为undetermined。您可以尝试使用更加灵敏的检测方法。

        综上所述,大部分CT值为undetermined可能是由多种因素共同引起的。建议您根据具体情况逐一排查,以确定问题所在,并进行相应的优化。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可以进行一下数据处理,比如把基线和宽度调整一下

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