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        coIP/抗原抗体过夜有沉淀/非特异

        相关实验:外源性抗原向 T 细胞的呈递

        user-title

        草丛有只大橘

        为什么我做coIP时,抗原抗体过夜孵育,第二天后会有絮状的,想问能不能离心取上清后再加磁珠,这样会不会损失一部分结合物。

        我担心如果直接加磁珠,会使磁珠聚团,IgG组也会非特异。

        (PS:抗原是经过pre-clear后加的抗体,磁珠也是封闭过的,就是很怕非特异!!!)

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        3 个回答

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        您可以尝试以下几个方法:

        优化裂解液成分和pH值

        减少孵育时间和温度

        在加入磁珠前离心取上清,并且在加入磁珠后再次离心去除残留絮状物

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        离心取上清,不可以絮状直接做。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        你这考虑是不是存在有纤维类的污染物?建议处理一下。

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