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问
基因在细胞表达的位置如何确定?
huarenqiang5
如果你有这个基因序列,就可以直接ncbi里面blast比对,有匹配的基因。如果只有基因名称,那么基因出处应该有。基因在哪个部位表达,如果是亚细胞定位,可以使用预测软件,输入蛋白序列就可以进行预测,一般用的wolf-sport。其他的在线预测软件网上搜一下也可以找到。
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问
热蛋白组学TPP/CETSA方法,在提取细胞裂解物的时候,为什么用的是冻融法,而不是用表面活性剂
loveliufudan
这是因为在热蛋白组学实验中,使用表面活性剂(如Triton X-100)会破坏细胞膜,导致蛋白质的热稳定性发生改变,进而影响实验结果的准确性。此外,表面活性剂还可能影响到蛋白质与小分子药物的相互作用。相比之下,冻融法可以在不破坏细胞膜的情况下释放细胞内的蛋白质,并且有助于保持蛋白质的天然构象。因此,冻融法在热蛋白组学TPP/CETSA方法中被广泛采用。
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问
油红O染色的阳标怎么加到培养基里
sswei
油酸不溶于水,要先跟NaOH反应生成油酸钠,然后加入到培养基中。也可以用乙醇之类的有机溶剂溶解油酸,然后加入到培养基中,但是一般乙醇等有机溶剂的终浓度要小于1%,甚至0.1%,所以要配置成高浓度的有机溶液。
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问
PCR产物双酶切构建载体,为啥很多假阳性???
huarenqiang5
主要考虑以下几点原因:1、模板:①模板中含有杂蛋白质; ②模板中含有Taq酶抑制剂; ③模板中蛋白质没有消 化除净,特别是染色体中的组蛋白; ④在提取制备模板时丢失过多,或吸入酚; ⑤模 板核酸变性不彻底。2、酶失活:需更换新酶,或新旧两种酶同时使
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问
硫酸铵沉淀蛋白是加配制好相应饱和度的溶液还是直接直接加固体
loveliufudan
如果你想沉淀蛋白质,你需要先配制好相应饱和度的硫酸铵溶液,然后慢慢加入到蛋白质溶液中,并不断搅拌均匀。直接加固体硫酸铵可能会导致局部过饱和或者不均匀,影响沉淀效果。
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问
农杆菌摇菌需要多久,谢谢
huarenqiang5
150-200都可以 时间大概是12-18小时就可以达到OD600=1.0,如果用于转化 建议OD在0.8以下。
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问
质粒双酶切后无条带,目的基因有条带
loveliufudan
过夜12小时后双酶切后质粒DNA没有条带,但是目的基因有条带,这说明质粒DNA在双酶切过程中被消化掉了,而目的基因片段受到保护没有被消化掉。这可能是因为双酶切的条件不适宜导致的,比如酶切反应的时间太长、酶切缓冲液配制不正确、酶的浓度过高或过低等因素都可能影响酶切效率。建议重新评估酶切条件,例如缩短酶切反应时间、尝试调整酶切缓冲液浓度或酶的浓度等,以提高酶切效率。
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问
磁珠分选可以分选死活的红细胞吗?
dxyc42u
磁珠分选不可以分选死活的红细胞
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问
springer nature投稿求助,急求帮助
dxyc42u
不会的,之前投稿也遇到过这种情况
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问
投稿求助 急!
dxyc42u
这种情况的话不需要重新提交的。
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问
请问投过Experimental Biology and Medicine 的前辈!
dxyc42u
分时间,你这才一个月不算长,继续等待
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问
求推荐sci
dxyc42u
frontiers系列期刊可以
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问
coIP/抗原抗体过夜有沉淀/非特异
loveliufudan
您可以尝试以下几个方法:优化裂解液成分和pH值减少孵育时间和温度在加入磁珠前离心取上清,并且在加入磁珠后再次离心去除残留絮状物
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问
DRG细胞,请教一下这一坨是啥啊,是污染了吗
dxyc42u
像是污染了,先加点药试试看效果咋样
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问
【求助】液氮速冻后的组织可以直接脱水制片吗!!!
huarenqiang5
需要在冰冻切片机中平衡温度大概20-30分钟,再在-20摄氏度下进行冰冻切片。对于脂肪组织需要更低一些的温度,一般在-25摄氏度左右切片。
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问
中位随访时间和中位生存时间问题
huarenqiang5
这个肯定不正常了,是因为你的随访时间过短的原因。
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问
研究是病例对照,还是横断面分析性研究呢
huarenqiang5
你的这个研究是病例对照研究,写文章也得按病例对照研究来写。
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问
单基因综述,相关文献太少该怎么写啊
土井挞克树
可以添加一些相关基因的文章,对于综述来说15篇还是太少了
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问
紧急求助 四环素诱导系统
loveliufudan
四环素诱导系统一般使用四环素或其衍生物,如强力霉素(Dox)作为诱导剂。脱水四环素盐酸盐也是一种四环素类似物,可以用于诱导基因表达。但是,不同的四环素类似物对tTA或rtTA的亲和力不同,可能影响诱导效果。此外,还要注意细胞培养血清中是否含有四环素或其衍生物,以免干扰系统的调控。
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问
Qpcr求助,求问老师,有遇到过这种大部分ct值 undete的情况吗?
dxyc42u
你这溶解曲线有非特异性扩增,好好排查下
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