实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问大鼠胶原诱导类风湿关节炎模型如何造？

loveliufudan

首先，胶原诱导失败可能是由于多种因素导致的，如动物模型的品系和性别，胶原的制备和质量，注射的剂量和方法等。因此，您需要仔细检查实验过程中的每一个步骤，尤其是制备和注射胶原的步骤，确保每一步都符合标准操作规程。其次，您可以尝试使用其他类型的抗原来诱导关节炎，如蛋白质或细胞提取物，或者使用其他的动物模型或品系。此外，您还可以尝试改变注射的剂量和方法，或者采用其他的实验操作，如局部创伤或骨髓刺激等。

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问想问一下为什么提的rna跑出来的条带都是这样的。理论值应该是28s:18s为2:1，但是胶图上却不是这样子的。

loveliufudan

可能有以下几个原因：样本不纯：如果你的RNA样本中存在DNA、蛋白质、盐类、酶或其他杂质，可能会影响RNA的电泳结果，导致28S和18S RNA带比例不正确。你可以通过琼脂糖凝胶电泳前对RNA样本进行纯化来解决这个问题。样本降解：如果RNA样本不完整或已经降解，可能会影响28S和18S RNA带的比例。这种情况下，你可能会看到28S RNA带出现双峰，18S RNA带的强度减弱。你可以通过在RNA

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问运用Ti离子比色法测定水稻根系泌氧能力时，能否直接大田试验，不用水培法培养水稻？

loveliufudan

Ti离子比色法是一种常用的测定植物根系泌氧能力的方法，通常需要使用水培法培养水稻根系，以获得相对稳定的实验结果。在大田试验中直接进行Ti离子比色法测定水稻根系泌氧能力可能会受到多种因素的干扰，如土壤物理化学性质、微生物群落、根系发育情况等，导致实验结果的可靠性不高。因此，建议您在进行Ti离子比色法测定水稻根系泌氧能力之前，先在室内使用水培法培养水稻，使其形成相对稳定的根系，然后再进行实验。如果您想

3 回答427 围观

问朋友们！我的内参为啥跑成这个鬼样子啊，上样前看见样品孔里有一点凝胶碎屑，跟这个有关系嘛？

土井挞克树

有一定关系，凝胶孔压的杂质会污染内参，影响内参的成像

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问体外培养间充质细胞这是什么细胞污染?

loveliufudan

可以考虑这是细菌污染。具体来说，可能是一些革兰氏阴性菌，如肠杆菌等。建议进行以下措施：进行培养液的无菌筛查：可以将培养液分别接种到无菌的富集培养基上（如LB富集培养基），并在适当的温度和时间下培养，观察是否有细菌生长。观察细胞形态：可以进行显微镜观察，观察细胞的形态是否发生了变化。细菌污染会导致细胞形态的改变，如细胞缩小、细胞形态不规则等。采取消除污染的措施：如果确认存在细菌污染，可以尝试使用消毒

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问免疫沉淀实验干扰的排除方法？

loveliufudan

在免疫沉淀实验中，有时候靶蛋白的大小与重链或轻链相近，会影响靶蛋白的检测。针对这种情况，有一些方法可以尝试：使用预先交叉吸附（Pre-Clearing）：在进行免疫沉淀之前，先用抗体（不是用于靶蛋白的抗体）与细胞裂解物进行结合，通过离心将这些抗体结合的蛋白质沉淀掉。这样可以减少重链和轻链的干扰，提高靶蛋白的检测灵敏度。选择性减少重链或轻链的信号：使用特异性抗体或是特异性减少重链或轻链信号的方法。例

4 回答488 围观

问免疫荧光图片拍摄好之后，一般可以保存多长时间呢

sswei

免疫荧光图片拍摄好之后如必须保存时，则应保持干燥，置4℃以下保存。一般细菌涂片或器官组织切片经固定后可保存一个月以上。但病毒和某些组织抗原标本抗原性丧失很快，数天后就失去其抗原性，需在-20℃以下保存。

4 回答7337 围观

问用基因组DNA作为模板，对目的片段进行PCr扩增，pcr结果跑胶图如图。这是什么原因呢？要怎么解决

土井挞克树

引物设计有问题，而且pcr过程中存在降解

3 回答508 围观

问请教一下qPCR报错的问题

loveliufudan

该PCR结果中包含了多种错误提示，每个提示都可能有不同的原因和解决方法。以下是一些常见的问题及其解决方法：PRFDROP - Passive reference signal changes near CT：被标记为PRFDROP的孔的被动参考信号在CT附近发生了显著的变化，可能是由于样品或仪器问题导致的。解决方法是检查仪器和实验操作是否正确，并确保样品中的RNA/DNA质量和浓度正常。NOAMP

2 回答3972 围观

问mtor2信号通路要怎么研究？具体研究哪几个关键蛋白比较好呢？

huarenqiang5

研究DEPTOR，mSLT8（GβL）蛋白比较好。

4 回答346 围观

问求问从成年老鼠提取星形胶质细胞，时候，怎么去除神经元的。有没有不传代，直接分离纯化星形胶质细胞的方法，然后进行WB等测试的。万分

sswei

在没有酶促孵育的情况下，使用机械解离可以更好地得到星形胶质细胞。

3 回答306 围观

问ELISA实验中二抗用Fab还是Fc片段，如何选择？

huarenqiang5

Fab段包含完整的可变区，以及恒定区的CH1区域。 Fc段仅指Ig恒定区CH2和CH3的区域，相当于Y字结构下面那一部分。建议二抗用Fc片段，减少降解片段的干扰。

4 回答1338 围观

问流式分选抗体IgG和IgM，用来结合人PBMC中的B细胞，一般用鼠抗人抗体吗？

huarenqiang5

是的，流式分选抗体IgG和IgM，结合人PBMC中的B细胞一般用鼠抗人抗体。

4 回答556 围观

问TUNEL 法检测细胞凋亡需要做技术重复或是生物重复吗？

loveliufudan

TUNEL法检测细胞凋亡通常需要进行技术重复和生物重复来确保实验结果的可靠性。在进行重复时，建议同时进行技术重复和生物重复。技术重复意味着对同一样品进行多次实验，以评估实验方法和技术的可重复性。一般来说，至少应该进行三次技术重复来减小随机误差的影响。对于TUNEL法检测细胞凋亡，可以在同一样品的多个位置上进行技术重复，以确保结果的可靠性。生物重复意味着对不同样品进行实验，以评估实验结果的稳定性和可

3 回答830 围观

问请问我的hepg2怎么和ATCC的不一样？

Luckybabygirl

其实如果都是梭形，没有差的特别多，是勉强说的过去的，因为细胞在每个人手里养出来的不一样，状态和代数都不一样，可能到后期形态就发生改变了，但如果你这是刚买回来不久，就变样子了，就得去咨询下公司了

5 回答284 围观

问请问一下，统计使用自体血细胞分离技术的数据，比较患者术后的凝血功能，使用什么统计方法啊？统计的数据中有

sswei

3 回答520 围观

问看海绵宝宝的眼睛👀，这是什么菌？

土井挞克树

还是像霉菌，丝状霉菌的可能性大

5 回答561 围观

问如何解决合成cDNA第一链合成的引物退火不充分？

cherish1100

可以适当的改变退火温度，高或者低2度

3 回答386 围观

问肌钙蛋白免疫荧光标记中的问题？

晴空a

建议使用 pH 7.0左右的偶联液，选择能够高度特异性结合肌钙蛋白的抗体，并进行充分的荧光微球活化和荧光标记过程控制，包括反应时间、抗体和微球的比例、荧光素的浓度等。

3 回答498 围观

问请问各位大神nrf2 蛋白wb怎么跑？

豆豆是个豆

我是用12%的胶跑的，转膜、封闭、孵二抗都是两个小时，然后洗的时候不要洗那么多次，三次，每次5min就够了，不然会洗掉。nrf2本身蛋白量67，但是做WB通常是检测100KD的条带（此时nrf2可能有和其他蛋白结合），而且同一泳道nrf2通常会分裂好几条条带。

5 回答4124 围观

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