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        免疫荧光双重标记问题?

        相关实验:免疫荧光技术

        user-title

        lyang556

        免疫荧光双重标记,如果如果一抗选用小鼠的IgG1和IgG2,然后分别用来标记2种不同抗原,那么抗 小鼠IgG1的二抗有没有可能与小鼠IgG2发生结合反应?有做过的大神求助下!

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        3 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        如果非特异性程度高的话,那一般出现双重标记的可能性比较低

        user-title

        sswei

        有帮助

        选取一抗时,要求来源于两种不同的动物。二抗则是不同荧光信号标记的。每次试验均需设置以下三种对照:

        (1) 阳性对照:阳性血清+荧光标记物;

        (2) 阴性对照:阴性血清+荧光标记物;

        (3) 荧光标记物对照:PBS+荧光标记物。以提高准确性。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        在免疫荧光双重标记实验中,如果一抗选择了小鼠IgG1和IgG2,二抗选择的是与它们不同的动物(比如兔子)产生的抗体,一般情况下不会发生交叉反应,因为二抗只识别一抗中的Fc区,而不会受到抗原特异性的影响。但是,如果你使用的二抗是多克隆的抗体混合物,其中包含能够交叉反应的抗体,则可能会发生交叉反应,这需要在实验中进行验证和排除。另外,为了更好地分辨两种抗原的信号,你需要使用不同的荧光染料或者使用不同波长的激光来激发和检测两种染色信号。

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