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实验问答

27,804,996 科研人在看

问【求助】3t3成脂诱导

huarenqiang5

培养注意事项:1.培养密度一般控制在40-60%的汇合度，过高的汇合度，细胞可能会开始分化；2.注意血清类型。一般使用的是新生牛血清培养，用胎牛血清生长速度会加快，容易使细胞分化；3.传代时铺板需均匀，不然会导致分化不均匀，分化比例低。4.从添加诱导剂开始到分化结束，通常需要8天。一般第6天脂滴就出来了，剩下2天就是脂滴积聚的过程。分化效果好的话，第4天脂滴就出来了；5.3T3-L1细胞添加诱导

3 回答834 围观

问bmdm提取

loveliufudan

如果细胞在第三天才开始分化，那么它们可能还没有完全分化成巨噬细胞。此外，如果您在培养细胞时频繁地晃动培养器，可能会对细胞的形态和生长产生影响。在进行培养细胞时，需要遵循严格的培养条件和技术操作，以确保细胞的正常生长和分化。频繁的晃动培养器可能会破坏细胞的形态和连接，并可能导致细胞死亡。因此，建议在培养细胞时，尽量避免频繁晃动培养器，尤其是在细胞刚开始分化时。

3 回答930 围观

问HBMEC进行OGD/R

loveliufudan

HBMEC细胞OGD/R模型是一种常用的研究缺氧/再氧化(OGD/R)引起的细胞损伤和修复的方法。针对您的问题，缺氧和复氧的时间因实验设计和目的而异，常见的有以下几种方案：缺氧时间：一般为2-6小时，具体时间需要根据您的实验设计和研究问题确定。例如，如果您想研究缺氧对细胞代谢途径的影响，可以选择较短的缺氧时间。如果您想研究缺氧对细胞凋亡和坏死的影响，可以选择较长的缺氧时间。复氧时间：一般为2-24

4 回答1309 围观

问求助，生信分析怎么做呀？

loveliufudan

进行两个蛋白的生信分析需要根据具体情况选择不同的方法，以下是一些可能的方向和方法：蛋白质互作网络分析：可以通过蛋白质相互作用数据库（如STRING）或文献资料中已有的蛋白质互作信息，构建蛋白质相互作用网络，并分析两个蛋白在该网络中的位置和关系。基因表达谱分析：可以通过公共基因表达数据库（如GEO、TCGA等）或实验室自己的基因表达数据，筛选和比较两个蛋白相关的基因，进行差异分析和富集分析，了解其相

2 回答878 围观

问caspase1提蛋白时候，有什么特别的细节吗？，其他指标都很清楚，但是它爆出来就很淡

loveliufudan

在进行Caspase-1的蛋白提取时，有几个细节需要注意，这些细节可以帮助提高Caspase-1的检测灵敏度：细胞裂解条件的优化：不同的细胞类型和不同的实验条件可能需要不同的细胞裂解条件。一般来说，使用含有蛋白酶抑制剂的细胞裂解缓冲液可以提高Caspase-1的稳定性和活性。此外，应该注意避免过度处理细胞，以避免Caspase-1的降解和失活。样品保存和处理：样品的保存和处理可能会影响Caspas

2 回答470 围观

问求助，人脐带间充质干细胞的提取方法，酶解法好几次了都不成功

huarenqiang5

1.制备:使用生理盐水充分洗涤脐带，并剪成小段。去除动脉和静脉，撕取华通胶至少8ml。充分剪碎后平分至4瓶已加25ml完全培养基的175cm2培养瓶中。静置培养7天。第8天根据生长情况，进行换液、传代。2.换液:根据细胞生长情况与培养基颜色决定全量换液或半量换液。用去头移液管吸弃半量或全量旧培养基，更换移液管，于培养瓶的非细胞培养面缓慢加入等量新培养基。3.传代:每瓶加0.25%胰酶3ml，待细

3 回答687 围观

问单细胞测序seurat分析为什么合并样本分析后图还是五个导入样本

loveliufudan

在单细胞测序的分析中，合并多个样本可以增加数据量，提高分析的可信度和准确性。一般来说，单细胞测序实验的数据量较小，单个细胞的表达水平变化也较大，因此需要对多个样本进行合并，才能获得稳定的结果。对于您提到的情况，可能是因为在Seurat分析中，您在合并样本之前已经导入了五个样本，然后合并前两个样本，但是在后续的质控步骤中，您可能没有正确更新分析的对象，导致分析结果显示了所有五个导入的样本。您可以检查

2 回答1076 围观

问骨关节炎与卵泡刺激素多肽序列

loveliufudan

最近的研究表明，FSHβ C末端多肽片段（FSHβ-CTP）具有潜在的药理活性，可以通过与FSHR结合来刺激卵巢激素的产生，从而调节生殖系统的功能。此外，一些FSH多肽片段也被用于治疗乳腺癌等癌症。因此，未来研究中可以考虑探索FSH多肽片段在治疗人类FSHR表达阳性的骨关节炎软骨细胞方面的潜在作用。需要进一步的实验和临床研究来评估这些分子在骨关节炎治疗中的应用前景。

3 回答382 围观

问如何判断CCK8的复孔是否差异过大需要舍去，根据标准差可以吗？

loveliufudan

可以使用一些统计方法来判断是否存在离群值，比如：计算每一组数据的平均值和标准差，以及所有组数据的平均值和标准差。使用z-score方法来检测离群值，将每个数据点的值减去其对应的组平均值，然后除以该组的标准差，计算得到z-score值。如果z-score值大于3或小于-3，则可以认为该数据点是离群值。如果存在离群值，则可以使用Grubbs' test进行检测。该检验可以计算得到可能的最大离群值，然后

2 回答1372 围观

问FSH与F骨关节炎的关系

loveliufudan

据目前的研究，滑膜细胞中也存在FSHR的表达。事实上，FSHR的表达不仅局限于卵巢组织中，还可以在其他组织中找到。研究表明，FSHR在人类和动物的滑膜细胞中均有表达，并且其表达水平可能会受到关节疾病的影响。因此，如果您发现自己的软骨细胞表面有高表达的FSHR，那么在滑膜组织中也有可能存在FSHR的表达。

3 回答429 围观

问请问大家想要测定细胞中乳酸含量是测上清还是胞内的

loveliufudan

要测定细胞中的乳酸含量，需要分别测量细胞内和上清中的乳酸含量。通常来说，细胞内的乳酸含量比上清中的乳酸含量高。关于你提到的南京建成乳酸检测试剂盒测定乳酸含量的问题，如果上清吸光度很高而细胞内和空白对照吸光度差不多，可能有以下几种情况需要考虑：细胞破裂不充分：如果在细胞处理过程中，没有完全破裂细胞膜，就会导致细胞内的乳酸不能充分释放到上清中。这种情况下，上清中的乳酸含量会相对较低，而细胞内的乳酸含量

3 回答2409 围观

问构建RAW264.7泡沫细胞模型应该用哪一种氧化低密度脂蛋白？

loveliufudan

构建RAW264.7泡沫细胞模型通常会使用不同浓度的氧化低密度脂蛋白（oxLDL），而选择使用哪种氧化低密度脂蛋白则取决于实验目的和可用资源。有多种方法可用于制备氧化低密度脂蛋白，例如CuSO4法、AAPH法和MPO法等。其中，CuSO4法是最常用的方法之一，它通过在氧气存在下使用CuSO4氧化LDL制备氧化LDL。在选择氧化LDL时，应考虑其质量和活性。通常情况下，使用含有高水平氧化物的氧化LD

3 回答700 围观

问利用GEO数据库做GSEA

loveliufudan

可能是因为以下原因：样本量太小。GSEA需要大量的样本才能得到可靠的结果。如果您的样本数量太少，可能会导致结果不具有统计学显著性。基因集过于广泛或过于特定。如果您选择的基因集太广泛，可能会导致过多的基因被包含在内，从而降低了显著性。相反，如果您选择的基因集太特定，则可能会导致基因数量过少，使得分析结果不够准确。基因表达量差异太大。如果您的基因表达量差异太大，可能会导致某些基因无法被准确地分类到上调

3 回答877 围观

问请教trizol法提取外泌体RNA该如何弄。

loveliufudan

以下是Trizol法提取外泌体RNA的步骤：收集外泌体：用离心或超声波等方法收集培养基或生理液中的外泌体。建议在收集前，预先处理样品，如去除细胞残留物、碎片等。加入Trizol：向外泌体悬液中加入 Trizol 试剂，建议加入试剂体积是悬液体积的 10% 到 20%。轻轻摇晃管子使 Trizol 均匀分散。加入氯仿：加入氯仿等有机溶剂，摇晃离心管混合均匀。离心管在室温下放置5-10分钟，让混合物充

1 回答3746 围观

问平板制作

sswei

一般来说，涂布培养常用的涂布量是100ul，也就是0.1ml。平时100~200ul涂布起来比较舒服。

3 回答608 围观

问免疫荧光细胞骨架没有染上，反而染到了细胞核是什么原因？

sswei

抗体质量问题，抗体特异性差所致。

3 回答1091 围观

问倾向性评分匹配求助

loveliufudan

SPSS和R都可以用于处理和分析多分类变量。事实上，SPSS作为一种广泛使用的统计软件，也可以支持处理多分类变量。您可以使用SPSS的分类变量功能来对多分类变量进行编码和分析。SPSS还提供了各种多变量分析技术，如多元方差分析（MANOVA）、逐步回归分析、主成分分析（PCA）等等，可以用于处理多分类变量和其他变量。R作为一种开源的统计软件，也提供了广泛的支持多分类变量的函数和包。R具有更大的灵活

2 回答493 围观

问总氮检测

loveliufudan

总氮标曲中需要对标液进行稀释测定是因为标液中的氮浓度一般都很高，如果直接使用未稀释的标液测定，可能会导致测量结果超过光度计的量程，从而无法准确测定标液的吸光值。此外，如果未稀释的标液的空白吸光值很大，那么直接使用未稀释的标液测定也可能会导致误差增大，影响测量结果的准确度。

3 回答583 围观

问求助|文章相关|如何分辨时间序列研究和病例交叉研究？

loveliufudan

时间序列研究是一种纵向研究，旨在研究一个或多个变量随时间的变化趋势，通常是通过收集一系列时间点上的数据来进行分析。这种研究设计通常应用于研究时间趋势、季节性变化、政策干预效果等问题。例如，研究空气污染对呼吸系统疾病发生率的影响，可以收集多年来的每日空气污染指数和呼吸系统疾病发生率数据，然后进行时间序列分析。病例交叉研究是一种横向研究，旨在研究一个或多个因素与疾病发生的关系，通常是通过收集患者的病史

3 回答1269 围观

问职业卫生与应急救援杂志

loveliufudan

职业卫生与应急救援杂志的审稿周期一般为1-3个月。该杂志本身很好，处理稿件很专业，速度很快。你可以通过该杂志的官方网站或者邮箱联系该杂志社以获取更多信息。

4 回答689 围观

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