实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问PCR扩增10微升可以25微升无条带是为什么?

土井挞克树

上样量太大以后，会加重pcr负荷，导致失败

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问做韭菜叶片的石蜡切片在脱蜡复水过程中出现了脱离玻片是因为什么啊？

土井挞克树

脱片是因为脱水过度了，减少脱水时间。

3 回答464 围观

问基因过表达后，相关的表型结果，过表达株比空载株高，二者有统计学差异。但未到野生株水平，这个应该怎么解释呢？

loveliufudan

基因过表达可以导致表型的变化，但是基因表达水平的高低并不是唯一影响表型的因素，还可能受到其他基因、环境和遗传背景等因素的影响。因此，即使基因过表达株比空载株表现出显著的表型差异，也不一定能够达到野生型的表型水平。这种现象可以通过以下几种方式来解释：基因过表达只是表型变化的一部分：在自然界中，很少有单个基因能够完全控制某个表型的发生，表型通常受到多个基因的影响。因此，即使某个基因过表达，也不能保证该

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问从细胞中提取外泌体的实验，一般需要养多少细胞再进行提取分离比较合适

土井挞克树

一般需要养10x7左右的细胞再分离提取

3 回答758 围观

问如何准确确定菌株里有没有某个基因

balalaLy

或许摇个菌液送测序最简单快捷了，

4 回答881 围观

问做sdspage的时候上层蛋白质条带总是会消失，有没有大神能帮忙看一下会是什么原因导致

土井挞克树

我之前也经常出现锯齿，后来发现是蛋白降解了，你可以跑个电泳验证一下

3 回答282 围观

问悬浮细胞转染

土井挞克树

可能是存在样本降解出了这一个条带，或者其他杂质污染了。

3 回答380 围观

问抗体动态性研究

土井挞克树

最有效的是质谱法和免疫印迹，可以区分不同抗体的动态性差异

3 回答348 围观

问RIPA提蛋白！

土井挞克树

一般不会改变蛋白结构，但是在提取过程中理化性质改变也会引起蛋白降解

4 回答919 围观

问活化的caspase3切割完底物后自身会降解吗

土井挞克树

会被降解，但是一般建议外部添加，可以干净消耗。

4 回答509 围观

问求助！！！请问各位大神多发性骨髓瘤细胞都是怎么养的！！

龙大人驾到

多发性骨髓瘤细胞培养需要选择合适的培养基，如人多发性骨髓瘤细胞专用培养基。一般来说，15%的血清对于多发性骨髓瘤细胞的生长可能不够，建议使用20%的血清。MM1S和8226细胞株都是悬浮生长的细胞，传代时需要注意细胞密度和离心条件。

3 回答541 围观

问碧云天的茜

土井挞克树

c0148是专门检测成骨细胞的，c0138检测干细胞显色好

3 回答286 围观

问血清TG

土井挞克树

先检查模型是否造模成功，然后调整药量做三次，看结果差异

3 回答405 围观

问求助：小鼠MCAO模型

土井挞克树

1.选用柔韧度合适的线栓2.选择线栓型号要与老鼠体重相配。每个地区的老鼠有差异，所以要做预实验，根据预实验结果来选择合适型号线栓。3.插破的情况下，也可以根据插破点来找到合适型号线栓。

3 回答478 围观

问生物学转录组测序请教

土井挞克树

只能根据生鱼片的图形去找可变剪接符合大的那个转录组，如果想要确定必须要测序。

3 回答528 围观

问Transwell小室侵袭与共培养问题

土井挞克树

可以共同培养，自己收的细胞要放在上室。

3 回答1600 围观

问如何检测标本中某基因或蛋白的含量

土井挞克树

可以做rt-pcr，来检测rna的含量。然后做qpcr来定量分析rna

3 回答340 围观

问观察拟南芥的表型，其中要求计算拟南芥的萌发率，那在一天的什么时候数拟南芥的萌发数最好呢，还是一天多数几次，分早中晚

sswei

拟南芥在发芽过程中，它要求合适的温度（22-23℃）、光照、光周期、湿度。并且要求打破休眠。上述影响因素中，光照和湿度是2个必需的条件。在种子发芽的过程中，如果种子被土壤遮盖而不能见到阳光则种子不能发芽。所以，在计萌发数时宜白天为佳，每天白天固定时间数3次。

3 回答1003 围观

问感受态细胞转化时，热激时间可以引导入的DNA大小进行调整么？还是在60秒到90秒就可以

龙大人驾到

感受态细胞转化时，热冲击的时间是非常重要的，它能影响DNA片段的渗透和稳定性，从而影响到细胞转化效率。一般来说，热冲击的时间应该在60秒至90秒之间。这个时间范围内，热冲击可以促进DNA片段的进入细胞，但如果时间过久，则有可能导致DNA片段的降解和稳定性下降，从而对细胞转化效率造成不良影响。此外，DNA的大小也会影响细胞转化效率，较小的DNA片段通常比较容易进入细胞并被稳定地表达。因此，在进行感受

6 回答2796 围观

问WB实验做出来pERK比ERK高，且两者水平变化相一致，内参是齐的，是什么原因呢

土井挞克树

因为pERK的抗体结合力特别高，totalERK的结合力很低。

4 回答797 围观

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