实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问请问Slc7a5 fl/fl 与Col2a-Cre;Slc7a5fl/fl有什么区别，谢谢🙏

土井挞克树

SLC7A5fl是一种能将胺基酸运送入细胞内的细胞表面蛋白，而col2a-cre是介导表达的基因。

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问miRNA靶向mRNA的3’-UTR，可以用FISH来证明两者的靶向关系吗？

土井挞克树

可以做FISH来验证靶向关系，先验证关系再验证通路。

3 回答406 围观

问WB电泳-溴芬兰跑出3条带

土井挞克树

样本考虑有降解，重新纯化样本再跑

3 回答859 围观

问请问细胞迁移不均匀是怎么回事呢？

土井挞克树

细胞数量有点多，迁移不均匀首先考虑迁移胶不均质的问题

3 回答427 围观

问胶原蛋白提取盐析蛋白越来越少

土井挞克树

复溶时间延长一些，然后可以多次复溶离心。

2 回答1499 围观

问我想用DNMT1抑制剂DAC处理细胞观察细胞甲基化变化以及下游基因表达变化，大概用什么浓度合适？

土井挞克树

一般0.1-0.5mmol/l的浓度处理就够了

2 回答476 围观

问免疫组化图片明明肉眼可见是增强的，但是Image J分析mean值却反而下降，这是为什么呀

土井挞克树

有可能是image的灰度值没有设置正确，image的参数设置错误就会出现相反的结果

2 回答929 围观

问过氧化氢造模

sswei

首先检查所用的双氧水是否失效，因为双氧水很容易分解。如果没有失效，则可以增加双氧水处理浓度或者加一点Fe2+（Fenton反应）。

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问【求助】3t3成脂诱导

huarenqiang5

培养注意事项:1.培养密度一般控制在40-60%的汇合度，过高的汇合度，细胞可能会开始分化；2.注意血清类型。一般使用的是新生牛血清培养，用胎牛血清生长速度会加快，容易使细胞分化；3.传代时铺板需均匀，不然会导致分化不均匀，分化比例低。4.从添加诱导剂开始到分化结束，通常需要8天。一般第6天脂滴就出来了，剩下2天就是脂滴积聚的过程。分化效果好的话，第4天脂滴就出来了；5.3T3-L1细胞添加诱导

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问用PET材质的细胞小室做荧光渗漏实验

sswei

用PET材质在细胞小室建立屏障，需要另外铺基质胶

3 回答449 围观

问bmdm提取

loveliufudan

如果细胞在第三天才开始分化，那么它们可能还没有完全分化成巨噬细胞。此外，如果您在培养细胞时频繁地晃动培养器，可能会对细胞的形态和生长产生影响。在进行培养细胞时，需要遵循严格的培养条件和技术操作，以确保细胞的正常生长和分化。频繁的晃动培养器可能会破坏细胞的形态和连接，并可能导致细胞死亡。因此，建议在培养细胞时，尽量避免频繁晃动培养器，尤其是在细胞刚开始分化时。

3 回答784 围观

问HBMEC进行OGD/R

loveliufudan

HBMEC细胞OGD/R模型是一种常用的研究缺氧/再氧化(OGD/R)引起的细胞损伤和修复的方法。针对您的问题，缺氧和复氧的时间因实验设计和目的而异，常见的有以下几种方案：缺氧时间：一般为2-6小时，具体时间需要根据您的实验设计和研究问题确定。例如，如果您想研究缺氧对细胞代谢途径的影响，可以选择较短的缺氧时间。如果您想研究缺氧对细胞凋亡和坏死的影响，可以选择较长的缺氧时间。复氧时间：一般为2-24

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问求助，人脐带间充质干细胞的提取方法，酶解法好几次了都不成功

huarenqiang5

1.制备:使用生理盐水充分洗涤脐带，并剪成小段。去除动脉和静脉，撕取华通胶至少8ml。充分剪碎后平分至4瓶已加25ml完全培养基的175cm2培养瓶中。静置培养7天。第8天根据生长情况，进行换液、传代。2.换液:根据细胞生长情况与培养基颜色决定全量换液或半量换液。用去头移液管吸弃半量或全量旧培养基，更换移液管，于培养瓶的非细胞培养面缓慢加入等量新培养基。3.传代:每瓶加0.25%胰酶3ml，待细

3 回答509 围观

问想用受体拮抗剂处理细胞，如何证明受体拮抗剂使受体是去了活性?

loveliufudan

为了证明受体拮抗剂使受体失去活性，您可以使用以下方法：放射性配体结合实验（Radioligand binding assay）：该方法可用于测量细胞膜受体的结合活性，利用放射性标记的配体与受体结合，通过测量剩余的未结合的配体来确定受体活性是否被抑制。使用受体拮抗剂处理细胞，如果受体失去活性，则绑定配体的数量会减少。細胞酶連結免疫吸附分析（Cell-based ELISA）：该方法利用受体特异性抗体

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问利用GEO数据库做GSEA

loveliufudan

可能是因为以下原因：样本量太小。GSEA需要大量的样本才能得到可靠的结果。如果您的样本数量太少，可能会导致结果不具有统计学显著性。基因集过于广泛或过于特定。如果您选择的基因集太广泛，可能会导致过多的基因被包含在内，从而降低了显著性。相反，如果您选择的基因集太特定，则可能会导致基因数量过少，使得分析结果不够准确。基因表达量差异太大。如果您的基因表达量差异太大，可能会导致某些基因无法被准确地分类到上调

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问免疫荧光细胞骨架没有染上，反而染到了细胞核是什么原因？

sswei

抗体质量问题，抗体特异性差所致。

3 回答817 围观

问spss提问

sswei

均衡性主要是看一下一些重要的混杂因素是否在两组间无差异。根据资料类型，可做不同的检验。比如年龄，可以做t检验。性别，做卡方检验等。

3 回答346 围观

问职业卫生与应急救援杂志

loveliufudan

职业卫生与应急救援杂志的审稿周期一般为1-3个月。该杂志本身很好，处理稿件很专业，速度很快。你可以通过该杂志的官方网站或者邮箱联系该杂志社以获取更多信息。

4 回答497 围观

问在病毒感染细胞的过程（细胞没死前）显微镜能看到细胞的什么变化嘛？

土井挞克树

如果是实施电镜的话可以看到细胞变形，崩解的过程。

3 回答742 围观

问小鼠粪便LPS

无聊先知

首先，需要明确的是LPS是脂多糖吧？在肥胖小鼠模型中预期结果是treated要比control的粪便含LPS浓度高？影响结果的原因在于如下节点：1，模型鼠是否均一2，lps检测准确吗？定性含是定量，是否有污染，外界细菌很多。3，文献是否支持你的预期？搞清楚这些问题自然迎刃而解。

3 回答1175 围观

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