实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问求助，乳鼠怎么滴鼻造肺炎模型

loveliufudan

制备乳鼠肺炎模型可以使用多种方法，如直接气管注射病原体、经鼻滴注、气溶胶接种等。经鼻滴注是一种常见的方法，以下是一些具体的步骤和细节：麻醉：使用一定浓度的异氟醚或七氟醚麻醉乳鼠。麻醉的目的是减少乳鼠运动，以便于滴注过程。滴注：在鼻腔滴注一定量的病原体悬液，可以使用感兴趣的细菌或者病毒。恢复：将滴注后的乳鼠放回笼子中，等待其自然恢复。在滴注过程中，需要注意以下几点：滴注的体积应该是适当的，一般在20

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问E15.5小鼠

loveliufudan

E15.5的小鼠大脑皮层下的部位包括基底板层、线粒体小体、内侧外侧前束和纤维束等。基底板层是皮层下最深的一层，由胚胎期来自大脑神经前体细胞的干细胞分化而来。线粒体小体和内侧外侧前束是连接基底板层和皮层上层的中间区域。纤维束则是由大脑的不同区域之间的神经纤维构成的束状结构，负责传递神经信息。

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问小鼠给药干预，每天多少？给药周期？

loveliufudan

对于给药量和给药周期，最好根据具体实验设计和文献资料来确定。通常情况下，药物剂量应根据体重和体表面积来计算。对于小鼠，通常使用mg/kg或mg/m2的剂量单位。对于给药周期，取决于实验的目的和具体方案。通常情况下，可以根据文献资料或相关实验室的经验来确定给药周期。一般来说，给药周期为1个月或2个月是比较常见的。至于如何解决每天给药需要称重的问题，可以使用组别平均体重来计算给药量，或者在给药初期进行

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问nissl染色，海马一直裂口

loveliufudan

出现裂口、断裂的可能原因如下：组织处理过程中损伤导致。如固定不足、处理时间过长、处理过程中机械振荡等都可能导致组织细胞裂口。切片过程中操作不当，如切片厚度不均、切片时候挤压组织等。石蜡切片加热时间过长或过高，导致组织脱水过度。针对以上可能原因，可以采取以下措施避免裂口的产生：在处理组织时，注意固定充分、处理时间控制、避免机械损伤等。切片前要进行组织的均匀包埋和切片厚度的控制，切片时不要挤压组织。石

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问2型糖尿病大鼠的诱导

loveliufudan

SD大鼠在高脂喂养后体重在450g左右，早上测取随机血糖值在7.8-11.0 mmol/L范围内是正常的。血糖值的正常范围可能因为实验条件和大鼠品系的不同而有所差异，建议最好先查阅一下相应的文献或参考资料，以确保结果的准确性。同时，如果您需要更加精确的血糖测量结果，可以考虑在饲料中加入糖尿病试验饲料，或使用口服葡萄糖耐受试验等方法进行血糖测量。

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问求助结扎法小鼠牙周炎模型

loveliufudan

牙周炎模型可以采用多颗牙齿结扎的方式，但需要注意以下几点：结扎的牙齿数量不能过多，以免对小鼠的健康造成影响。一般来说，结扎一侧的两颗磨牙或者一颗门齿和一颗磨牙即可。结扎的牙齿位置应该一致，这样取组织时才能保证样本的一致性。建议在结扎前先测量牙齿周围的口腔菌群，以确保模型的稳定性和可重复性。如果担心牙周炎组织量不够，可以尝试使用其他方式构建模型，比如口腔注射牙周病原菌或高糖/高脂饮食诱导牙周炎等。对

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问求助 SD大鼠高脂诱导胰岛素抵抗

loveliufudan

SD大鼠60%高脂饲料诱导可以导致胰岛素抵抗和糖代谢异常，而OGTT测试可以用来评估机体的葡萄糖耐受性。如果在第6周的OGTT测试中发现异常，这意味着这些SD大鼠可能已经出现了胰岛素抵抗和/或糖代谢异常的迹象。但在第17周再次进行OGTT测试时，如果没有发现异常，这可能是由于以下原因：大鼠的身体已经适应了高脂饲料，改变了其代谢途径，使其在更长的时间内维持了较好的糖代谢能力。大鼠可能已经发展出代偿性

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问小鼠睾丸HE染色

loveliufudan

这种结果通常是由于组织处理过程中的某些问题所致，例如过度固定、过度脱水、切片过厚或过薄等。建议您在处理组织时仔细操作，并遵循标准化的组织处理步骤。

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问大鼠游泳实验

loveliufudan

首先，大鼠尾巴烂掉和耳朵变黑的可能原因有很多，不能确定是哪个因素造成的，需要进一步排查。关于游泳至力竭模型，水温应该在25-30℃之间，一般来说越高大鼠疲劳越快，但是也不能过低，否则容易引起低温病变等问题。如果不进行负重，可以根据大鼠的游泳能力适当调整游泳时间，一般在10-15分钟左右为宜。至于器具的清洗和使用，应该保证充分清洗干净，最好不要使用之前放有强碱或有机试剂的容器，以避免残留物对大鼠造成

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问睾丸HE染色

loveliufudan

组织破碎可能是由于样品在脱水、清洗或包埋过程中受到机械性创伤或化学物质影响造成的。以下是一些可能的问题和建议：多聚甲醛固定时间过长：固定时间过长可能导致交联度增加，使得细胞和组织变得更加脆弱易碎。建议固定时间缩短到适当的时间。乙醇梯度脱水过快：脱水过程中，乙醇的逐渐浓度变化有利于渐进性地去除水分。但是脱水时间过短可能导致组织内水分过多，脱水时间过长可能导致组织变得脆弱。建议根据组织类型和大小适当调

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问脑组织He病理

loveliufudan

正常大鼠皮质中存在神经元变性的情况比较罕见，但是在老龄化大鼠中神经元变性和神经元丢失是比较普遍的现象。这些变化可能是与年龄相关的自然退化过程的一部分，与神经元的生命周期有关。此外，胼胝体疏松也是正常的老化过程之一。胼胝体是大脑中的一个白质结构，它主要由神经纤维和胶质细胞组成。随着年龄的增长，胼胝体中的神经纤维数量可能会减少，这可能导致胼胝体的疏松和萎缩。虽然神经元变性和胼胝体疏松都是正常的老化过程

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问亚胺培南平板配制及储存问题

loveliufudan

1.自制亚胺培南LB平板在4℃下可保存3-4周左右，但是抗生素的有效性会随着时间的延长而降低，因此建议在使用前进行检测，确保抗生素的有效性。2.自制亚胺培南LB平板接种细菌后，在37℃下培养一般需要24-48小时左右才能观察到结果。过长时间的培养可能会导致抗生素的失效，使得对亚胺培南敏感的J53也能生长出菌落。通常情况下，如果细菌在24小时内没有生长，就可以认为该菌株对亚胺培南敏感。但具体时间的判

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问求助！关于肠道菌群课题的样本量计算

土井挞克树

样本至少30个，有专门计算样本量的公式。

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问裂解BL21(DE3)plSs感受态细胞细菌蛋白方法

loveliufudan

反复冻融可能会导致细菌膜破裂，释放出溶菌酶等细胞内容物，但这种方法并不可靠，同时也会破坏细胞内的其他蛋白质、DNA等分子。而且这种方法通常适用于某些特定的菌株和特定的表达质粒，不是所有的菌株和质粒都适用。如果您的菌体像果冻一样，可能是因为在冻融的过程中，细胞壁或细胞膜已经被破坏了，导致整个细胞变得脆弱，甚至发生了溶解。这时候再进行离心操作，会发现细胞碎片难以分离。如果您需要裂解BL21(DE3)p

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问谁知道这个怎么cfu计数呀

loveliufudan

以下是一些基本的CFU计数步骤：取一定量的细菌培养物，通常是通过吸液器或针头来定量取样。使用万能试剂或其他方法将细菌稀释到适当的浓度，使其易于计数（一般是1:10到1:1000的稀释比）。取适量的细菌稀释液，在无菌平板上均匀涂布，然后在37℃下培养一定时间（一般为16-24小时）。计数菌落，将菌落数乘以稀释倍数，得到原始细菌数量。注意事项：在进行CFU计数前，需要确保培养物已经均匀混合，否则会影响

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问THP-1构造炎症模型

loveliufudan

THP-1是一种单核细胞白血球系的人类细胞系，通常用于构建体外的炎症模型。构建THP-1细胞的炎症模型通常需要刺激细胞以诱导炎症反应。其中，PMA是一种受体激活剂，能够激活THP-1细胞并促进细胞分化成具有巨噬细胞样特征的细胞。因此，加入PMA可使THP-1细胞的粘附性和吞噬能力增强，增加细胞对LPS等其他炎症刺激物的敏感性。当THP-1细胞处理PMA后，可使其表达CD14和Toll样受体（TLR

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问导师放养，想问下大佬关于中药相关问题。

loveliufudan

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问阿米巴在肠道以外组织一般不形成包囊体的原因是什么

loveliufudan

这是因为在肠道以外的环境中，阿米巴原虫没有必要形成包囊体来抵御环境压力和营养不足的情况。在肠道内，阿米巴原虫通常会遇到环境压力和营养不足等不利条件。在这些情况下，阿米巴原虫会形成包囊体，以保护自己并保持生存。包囊体是一种耐久结构，可以在不良环境中存活数年，同时也是传播病原体的重要手段。然而，在肠道以外的环境中，阿米巴原虫通常可以通过吞噬细菌和其他微生物来获取充足的营养，并且不需要面临如此强烈的环境

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问有人知道end over end rotator是什么仪器吗

sswei

end over end rotator是端对端旋转器。

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问求助：小鼠粪便混合菌培养，可以用PCR检测属水平目标菌丰度吗？引物怎么设计呢？

loveliufudan

针对你的目标菌属，你可以根据已知的序列信息，设计一对特异性引物进行PCR扩增，然后使用定量PCR技术来定量目标菌丰度。在设计引物时，可以使用专业的引物设计软件进行设计，如Primer3等。在选择引物时，需要考虑引物的特异性、长度、GC含量、互补性等因素，以确保引物能够特异性地扩增目标菌属的DNA序列。如果你在查阅文献时没有找到与你目标菌属完全一致的序列信息，你可以尝试设计一对degenerate

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