双荧光素酶验证实验转染问题
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最近在做双荧光素酶验证miRNA是否与靶基因的3UTR结合，目前有个疑问，在进行转染时准备使用lipo2000，在24孔板中进行实验，在转染时需要报告载体和miRNA模拟物一起转进细胞，那么在转染报告载体时，是分别配置两个体系将报告载体和miRNA转进去，还是只配置一个载体体系，直接将报告载体与miRNA混合加入就可以了呢，如果是配置两个体系，会不会着转染试剂对细胞的伤害很大呢。
谢谢大家，有可以帮忙解答的吗
2 个回答
loveliufudan
有帮助
在进行双荧光素酶验证miRNA是否与靶基因的3UTP结合实验时，您可以选择将报告载体和miRNA模拟物分别配置两个体系进行转染，也可以将它们混合在一起加入转染试剂中。这取决于您的实验需求和转染试剂的使用说明。
如果您选择将它们分别配置两个体系进行转染，可能需要更多的转染试剂，但是可以控制每个体系中报告载体和miRNA的比例，从而减少不必要的干扰。同时，这种方法也可以避免miRNA与转染试剂或其他物质之间的相互作用，提高实验的准确性。
如果您选择将它们混合在一起加入转染试剂中，可以减少转染试剂的使用量，但需要注意混合比例的准确性，避免miRNA与转染试剂或其他物质之间的相互作用。如果转染试剂的使用说明中没有特别说明，这种方法也是可行的。
土井挞克树
有帮助
是分别配置两个体系将报告载体和miRNA转进去
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