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脂多糖连用D-氨基半乳糖造模
土井挞克树
造模时混好的溶液最后需要做ph滴定。
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问
WB条带
土井挞克树
可能是目的蛋白存在降解,所以会有多个条带
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问
请教胎牛血清空陪问题
土井挞克树
看着像是细菌污染,可以再观察看看。
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问
使用survival roc做时间依赖的ROC曲线,发现保护因素的AUC都小于0.5.
土井挞克树
你可以做个多因素回归分析,看各因素是否都有统计学意义,然后把没有意义的排除
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问
RDP软件参数怎么设置
土井挞克树
我一般是按照曝光度对各个参数进行调整
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问
糖化血红蛋白的值能否直接用干预后的均数减去干预前 得到糖化血红蛋白变化值
土井挞克树
如果是均数相减可能会增加误差,应该相减后求均数
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问
有序多分类的KM曲线有交叉,还可以纳入多因素Cox吗?
土井挞克树
有序多分类的KM曲线有交叉,也是可以纳入多因素Cox的,但是需要注意异质性
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问
糖基化工程抗体
sswei
糖基化工程抗体:具有修饰的糖分子,被设计用于帮助免疫系统攻击癌细胞。治疗性抗体对抗癌症的可能方法之一是通过结合肿瘤细胞表面的蛋白,标记这些细胞使免疫系统进行攻击。该攻击信号通过粘附于抗体尾端的糖分子(称为“糖基化”)进行部分控制。实验室研究显示改变这些糖型,科学家能够促进抗体药物作用于免疫系统,该免疫系统可能增强其攻击肿瘤的能力。
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问
细胞免疫荧光求助
balalaLy
细胞外的杂点影响不大的,可能是玻片不干净,不同视野的细胞染色深浅不同可能是不同细胞处于不同状态或代谢水平,所以一张片子要多挑几个视野
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问
请教两组小鼠取血量不一样做ELISA有问题吗?
sswei
离心取上清液需要保证上清液得到纯化,这样才能保证ELISA不出问题。
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问
氰基硼氢化钠
sswei
储存氰基硼氢化钠时,应避免过热及接触火源、水、潮湿空气、强酸或强氧化剂。氰基硼氢化钠遇强酸会立即生成氰化氢,与空气中的水分接触也会逐渐分解生成氰化物,使用时必须小心。远离酸、氧化剂。
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问
细胞间超净台坏了该如何处理?
balalaLy
可以的,超净台内喷洒酒精消毒,所有用品进去时喷酒精,最好带一次性薄膜袖套。
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问
凋亡诱导如何去除死细胞
loveliufudan
可以尝试以下方法清洗细胞:用PBS缓冲液冲洗细胞:可以使用温和的PBS缓冲液轻轻地冲洗细胞,以将死细胞从培养皿表面移除。使用细胞去除剂:可以使用一些特殊设计用于去除死细胞的细胞去除剂,例如 Trypsin-EDTA 等。使用前需先按照说明书进行操作,并注意时间不要过长以避免对存活细胞造成伤害。机械振荡:对于一些比较难以去除的死细胞,可以尝试通过培养皿的机械振荡来去除。可以将培养皿放在震荡器中振荡一
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问
求教 细胞免疫荧光染色顺序
balalaLy
我一般是先染一抗二抗,再染phalloidin,室温1h就行,最后dapi
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问
cck-8测量细胞活力时细胞密度的影响
龙大人驾到
调整CCK-8试剂与培养基的比例是有可能减少试剂与细胞结合饱和现象的,但同时需要注意CCK-8试剂的浓度不能太高,否则会导致其他问题,如在低细胞密度下会出现高背景读数等问题。因此需要在实验前进行一定的优化操作。除了CCK-8试剂外,还有其他可以用来检测细胞活力的指标,如LDH,MTT等。但每种指标都有其自身的局限性,需要根据实验需求选择适合的指标。对于您当前的实验情况,除了调整CCK-8试剂与培养
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Raw264.7 巨噬细胞培养和传代
龙大人驾到
减少极化现象可以从以下方面考虑:1. 传代时尽量避免过度吹打,以避免造成机械应力引起的异常活化和极化。2. 将培养基中的M-CSF浓度控制在适宜范围内,不过度刺激细胞。同时,在培养基中加入一些抗极化因子,如IL-4、IL-10等,有助于减少极化现象。3. 使用适宜的细胞培养条件,如适宜的pH值、温度、氧气浓度等,保证细胞在较为稳定的状态下生长。4. 在培养过程中尽量保证培养器内的通气性和清洁度,避
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构建载体最后测序乱码怎么办?
是TTT
插入片段有过测序结果吗?是挑的单克隆提的质粒吗?p出来的产物跑的DNA凝胶是单一且很亮的条带吗?有没有杂带或者拖尾呢?
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问
HUVEC细胞为什么消化不成单细胞?消化时细胞间有细丝相连?
是TTT
你消化时间太长了,这个细胞消化30-60s就行了,均匀滴加胰酶以后稍微摇匀,等半分钟左右晃动敲打,看到细胞掉下来了以后,马上终止消化。正常应该这样,消化要快一点。
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问
影响连接转化的因素
是TTT
影响转化的因素:1.感受态细胞的状态、2.加入的质粒最好在≤200ng,3.热击1-2分钟以后,需要立刻放在冰上静置2分钟,4.摇完菌以后离心需要常温,这些没做好都会影响转化效率。影响连接的因素:1.载体是否线性化完全,一般来说双酶切要优于单酶切,但也和酶切的温度与时间有关;2.线性载体和插入片段之间的比例需要计算好;3.连接酶以及缓冲液的量需严格按照说明书使用
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问
WB中变性过的蛋白上样前需再煮吗?
是TTT
一般不需要。但是如果冻存时间太久,拿出来离心有沉淀的话可以再煮几分钟。
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