奇怪的wb。
xlwk
今天发生了一件奇怪的事，两个膜的目的蛋白都和actin分子量相似，其中膜一敷完一抗后错孵了鼠二抗（本来是兔抗），结果曝光出actin(后续去除液洗膜孵育证实)，重新孵育兔抗后曝光出目的蛋白而actin 消失，膜二是曝光完目的蛋白然后去除液洗膜错孵了兔抗（actin用鼠），又出现目的，后续孵育正确二抗，出了actin，目的蛋白显示。。。我可以理解为因为一抗混有一点点别的一抗，因为是用夹子夹得，但是后续孵育正确二抗为啥错孵的蛋白会消失。。。
3 个回答
loveliufudan
有帮助
这种结果可能是由于交叉反应引起的。可能存在某种共同的表位或蛋白质结构，使得一些抗体可以结合到多个不同的分子上。在这种情况下，一些不特异的交叉反应可能会发生，导致一些意外的结果。
对于您所描述的情况，一抗可能存在少量的别的抗体，这些抗体可能与actin结合，从而导致actin的信号出现。当使用正确的二抗时，这些交叉反应可能会被抵消，因此actin的信号可能会消失，而目的蛋白的信号会显示。
需要进一步注意的是，蛋白质检测的结果往往受到多种因素的影响，包括反应条件、抗体质量、实验步骤等等。因此，在进行实验时需要严格控制实验条件，同时注意使用合适的对照组进行验证。
秋秋欣欣
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可能相距太近，影响荧光而发不出来
土井挞克树
有帮助
考虑还是抗体特异度不高，所以显示不出来
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