实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

问奇怪的wb。

loveliufudan

这种结果可能是由于交叉反应引起的。可能存在某种共同的表位或蛋白质结构，使得一些抗体可以结合到多个不同的分子上。在这种情况下，一些不特异的交叉反应可能会发生，导致一些意外的结果。对于您所描述的情况，一抗可能存在少量的别的抗体，这些抗体可能与actin结合，从而导致actin的信号出现。当使用正确的二抗时，这些交叉反应可能会被抵消，因此actin的信号可能会消失，而目的蛋白的信号会显示。需要进一步注意

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问多糖相关

loveliufudan

将醇沉出来的多糖放入烘箱烘干，需要注意以下几点：温度不宜过高：烘干温度应该控制在较低的范围内，一般不要超过50°C，最高也不要超过60°C。时间不宜过长：烘干时间不宜过长，以避免多糖分解或失去活性。

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问【求助】annexin V /PI双染法测试肿瘤细胞凋亡

秋秋欣欣

消化之前也要收集培养基中的细胞。

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问生理盐水灌注的心脏

balalaLy

需要尽快固定的，生理盐水灌注后可以直接换多聚甲醛继续灌注然后再浸泡固定。

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问求助核质分离检测RNA定位的分析方法

土井挞克树

要获得如下表格1、导出PCR结果CT值到Excel2.结果导入GraphPad画图3.新建数据，选择Grouped，3个重复4.把Excel计算好的结果数值复制过来5.选择二维分组柱状图得到结果

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问样本量计算求助

loveliufudan

要比较A、B、C三种方法对同一样本的检出率，我们需要知道每种方法在多少个样本上进行了检测，并且需要将检测结果（+或-）记录下来。然后，可以使用以下公式来计算每种方法的敏感性和特异性：敏感性= TP / (TP + FN)特异性= TN / (TN + FP)其中，TP（True Positive）是指实际上阳性的样本被检测为阳性的数量，FN（False Negative）是指实际上阳性的样本被检测

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问Label free 定量蛋白质

loveliufudan

是否有必要需要视情况而定。以下是一些可能需要考虑的因素：实验目的：如果你的实验目的需要对蛋白质进行定量分析，并且需要比较样品之间的差异，那么做4D label free可能是必要的。样本类型：对于复杂的样本，如细胞或组织样本，可能需要用4D label free来克服样品中存在的复杂性。技术能力和经验：4D label free需要高级的技术能力和经验来正确分析数据。如果您或您的实验室没有相关的技

3 回答658 围观

问WB：求问ZO-1蛋白，具体电泳转膜条件怎么设定呀？

土井挞克树

3 回答1493 围观

问MEGA遗传距离矩阵怎么看

土井挞克树

是对应的，模型选择方面p-distance的成功率比较高

2 回答3083 围观

问构建载体菌落PCR有目的条带，送测测序结果为无信号或信号极弱是什么原因？

土井挞克树

可能存在杂质污染，显示的是杂质条带。

3 回答8085 围观

问细菌基因组的两端拥有几条相同的基因，这是什么情况？

sswei

具启动子作用，具增强子作用，调控基因转录，含TATA序列等情况。

3 回答509 围观

问请教纤维素酶活测定，滤纸酶活(FPAase)

土井挞克树

考虑没有灭活完全，酶仍存在活性。

3 回答1021 围观

问IntestiCult™ 类器官生长培养基（小鼠）的成分是什么？它和小鼠ENR培养基有何不同

土井挞克树

IntestiCult™ 类器官生长培养基(小鼠)是一种确定的无血清细胞培养基,用于有效建立和长期维持小鼠肠道类器官。

2 回答1032 围观

问小鼠肠类器官培养一定要经过lgr5流式细胞分选吗，还是按操作用DPBS处理得到隐窝悬浮液？

土井挞克树

可以按操作用DPBS处理得到隐窝悬浮液后再做分选

2 回答493 围观

问我的适配体才36bp,要怎么设计引物

土井挞克树

有5'UTR和3'UTR，在这个两个区域设计引物，然后引物一定要有一部分在你的目的基因上，否则，很难判断你的扩增产物是不是你的目的基因的扩增产物

2 回答843 围观

问微生物与疾病关联的数据库

土井挞克树

研究微生物与疾病关联的数据库可以选择Peryton数据库

3 回答642 围观

问小鼠分离肠道隐窝要处理到哪种状态才能算分离完成呀，有图片可以看看吗

土井挞克树

要把肠道隐窝完整的暴露出来才算分离完成。

3 回答440 围观

问NKG2D单体型

来一起探讨

碱基配对时遵循碱基互补配对原则，A与T，C与G，但在复制或翻译过程中可能出现碱基错配，C与T，G与T，A与G，A与C就是未按照碱基互补配对原则来进行配对

2 回答342 围观

问荧光染色问题，DAPI,凋亡等讨论

loveliufudan

DAP1 是一个在细胞质中发挥作用的蛋白质，其染色结果的质量可能会受到细胞状态的影响。如果细胞密度太低或者染色时间太短，可能会导致 DAP1 染色不均匀或者染色强度不足。因此，在进行 DAP1 染色时，需要控制好细胞密度和染色时间，以获得较为准确的染色结果。TUNEL 染色是一种用于检测凋亡细胞的方法，其染色结果主要出现在胞质中。如果 TUNEL 染色出现在胞质中而没有出现在核中，可能是细胞处理过

3 回答3402 围观

问诱导骨髓间质干细胞为成骨细胞

loveliufudan

在诱导骨髓间质干细胞分化为成骨细胞的过程中，细胞漂浮可能是由于以下原因：细胞密度过高。高密度细胞培养容易导致细胞产生压力，从而导致细胞死亡和脱落。在培养细胞时应该注意控制细胞密度，避免细胞过度生长。细胞应激。细胞在不良的环境条件下会受到应激，从而导致细胞死亡和脱落。在细胞培养过程中，应该注意细胞的状态，避免给细胞造成不必要的压力和应激。细胞分化不良。如果细胞无法成功分化为成骨细胞，可能会导致细胞死

3 回答338 围观

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