实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问蛋白组学应该注意什么事项，好研究吗

loveliufudan

在进行蛋白组学研究时，需要注意以下事项：样品的质量和纯度：样品的质量和纯度对于蛋白组学研究至关重要，因为污染物或其他非目标蛋白质可能会干扰分析的准确性和灵敏度。因此，在采集、处理和保存样品时，需要严格控制污染、避免蛋白质的降解和氧化，并采用适当的方法和技术提高样品的纯度和稳定性。实验设计和样品处理：在进行蛋白组学研究时，需要仔细设计实验和样品处理流程，以确保研究结果的可靠性和重复性。比如，需要选择

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问MDCK（MDR1转染）细胞在24孔板transwell里的100倍。问题首先是细胞形态怎么全是球状呢？且是不是有细胞叠层的现象

loveliufudan

MDCK细胞在Transwell的培养条件下呈现球状形态，可能是由于以下几个原因：细胞密度过高：如果细胞密度过高，MDCK细胞可能会聚集在一起并形成球状。培养基成分：如果培养基成分不适合MDCK细胞生长，细胞形态可能会发生改变。营养不良：如果细胞没有足够的营养和生长因子，细胞形态可能会变得不规则或球状。至于细胞叠层的现象，它可能是由于细胞密度过高、培养时间过长或培养基成分不合适等原因造成的。这种叠

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问ELISA可以检测SASP

loveliufudan

ELISA可以用于检测SASP中的某些成分，例如细胞因子等。具体来说，可以使用特异性的抗体来检测特定的细胞因子等成分。然而，由于SASP是一个复杂的混合物，其中包含多种不同的蛋白质和其他生物分子，因此需要选择适当的ELISA试剂盒和抗体，并且需要进行仔细的优化和标准化，以确保ELISA的灵敏度和特异性。此外，需要注意SASP的动态变化，即SASP的成分和水平可能会随着时间和刺激条件的变化而发生改变

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问WB检测磷酸化蛋白的疑问？

loveliufudan

1.通常在检测磷酸化蛋白的电泳实验中，上样量的选择应该根据所用的样品种类和磷酸化蛋白的表达水平来确定。一般来说，上样量会在10-50 μg之间，但也可以根据需要进行优化。如果表达水平较低，可以考虑使用富集技术或增加上样量，而如果表达水平较高，则应注意避免过度载入以避免产生饱和效应。2.对于出现杂带的问题，可以尝试以下几种方法进行解决：优化抗体浓度：可以通过调整一、二抗的浓度比例，或者减少一、二抗的

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问wb煮蛋白的时候有沉淀怎么办？

loveliufudan

如果煮蛋白的时候出现沉淀，可能是因为溶解缓冲液中的成分不足以完全溶解蛋白质，或者在蛋白质溶解过程中发生了其他问题。下面是几种可能的解决方法：加强溶解缓冲液的成分：尝试加入更多的溶解缓冲液，或者加入额外的溶解剂（如尿素、甘油等）以帮助蛋白质溶解。增加煮沸时间和温度：将煮沸时间和温度增加一些时间或提高温度，以帮助蛋白质充分溶解。过滤蛋白溶液：使用0.22微米的滤膜过滤蛋白溶液，以去除杂质和沉淀。更换新

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问细胞划痕实验contral组效果更好怎么办？

loveliufudan

在这种情况下，有几个可能的解释：细胞毒性：药物浓度过高可能会导致细胞毒性，从而影响细胞的生长和划痕愈合。即使您已经将药物浓度调小，可能仍然存在细胞毒性的问题。如果您怀疑这是问题的原因，可以尝试使用不同的药物浓度或不同的药物来验证。细胞状态：即使细胞是同一批铺在六孔板上的，也可能存在细胞状态的差异。有些细胞可能更健康、更活跃，而有些细胞可能处于应激状态或缺乏营养。这些差异可能会影响细胞的反应和划痕愈

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问MDCK细胞接毒后不到半天变成这种状态

loveliufudan

下面是可能的原因和建议：毒株问题：接种的病毒毒株可能存在问题，例如病毒浓度过高或存在毒性。您可以尝试使用不同的病毒毒株或不同的浓度进行接种实验，以确定是否与毒株有关。细胞状态问题：即使操作规范，MDCK细胞在接种前可能已经存在细胞状态问题，例如缺乏营养或处于应激状态，这些问题可能会影响细胞对病毒的反应。您可以尝试使用健康的细胞并保证其正常生长，以降低细胞状态对实验结果的影响。采样管污染问题：采样管

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问求推荐临床调查类杂志

loveliufudan

《中国临床新医学》：普刊，知网收录，月刊，初审2到3周，录用2个月，见刊6个月，版面费4000元。《中华检验医学杂志》：核心期刊，知网收录，月刊，复合影响因子1.376，综合影响因子1.299，主要报道检验医学的基础和临床研究。《中华物理医学与康复杂志》：核心期刊，知网收录，月刊，复合影响因子1.226，综合影响因子1.061，主要报道物理医学和康复医学的基础和临床研究。

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问cBioPortal网站查询后得知某基因突变频率7.56%算是高的吗

loveliufudan

在cBioPortal网站上查询到的基因突变频率是否高，需要结合具体的基因和癌症类型来评估。在一些癌症类型中，7.56%的基因突变频率可能会被认为是高的，而在其他类型的癌症中则可能被认为是低的。此外，不同的研究也可能使用不同的标准来定义“高”或“低”的基因突变频率。关于您查询的具体基因和癌症类型，如果有相关的参考文献支持，可以在查询结果页面的“Publications”选项卡中查找相关的文献。您也

3 回答407 围观

问BDA溶液配制（MCAO大鼠）

loveliufudan

以下是BDA的配制方法：将BDA粉末加入到无菌的生理盐水中（或蒸馏水中）进行溶解。最好使用无菌技术操作，以避免细菌和其他微生物的污染。使用恰当的稀释浓度对BDA进行稀释。通常使用1%到10%的浓度来注射，具体浓度取决于研究的目的和注射区域。在注射之前，应将BDA混合均匀并过滤以去除任何固体颗粒。使用注射器将BDA溶液注入大鼠的目标区域。注意，注射器必须是无菌的，以避免污染。在注射完成后，应保持动物

2 回答474 围观

问qpcr ct值高

sswei

有几个可能性。1、最有可能是RNA降解严重。2、逆转可能出问题，可能是逆转试剂有问题，也可能逆转程序没设置好，也可能是逆转前RNA没有预热变性。3、有DNA污染，可能在抽提的时候有DNA混进去了。

3 回答1130 围观

问请问我的qPCR曲线怎么了啊？

sswei

主要原因为引物特异性不好、Tm值较低或模板质量不高，引物浓度太高等。

3 回答461 围观

问Euroscore2 sinoscore sts score

sswei

全组死亡率计算公式是：单位时间全组死亡个体数/单位时间全组平均种群数量×1000％。

3 回答206 围观

问请教一下，A549细胞15cm皿长满细胞密度是多少呀

qzuser2TA9

长满的话，应该到了10的7左右。最好计数一下

5 回答934 围观

问求助|细胞出现棕色片状物是否感染？

ConstantineXH

看着像培养基或者血清里的杂质，应该不是污染，可以换个液再观察观察。

6 回答460 围观

问岛津液相自动进样器进样前后，清洗时有液滴溢出，会影响样品出峰吗

sswei

液滴溢出量少，不会影响样品出峰。

3 回答465 围观

问VEGFA蛋白位置不对

sswei

蛋白本身会自组装，形成多聚体。或样本太微量了，看不出条带。实际看到的是杂带。

3 回答202 围观

问毕赤酵母分泌表达

sswei

电转过程包含长出来的其他物质和长出菌，可能会与转化后菌不一致的情况出现。

3 回答525 围观

问小鼠心脏ROS荧光

qzuser2TA9

看起来像是阳性，非特异性结合也有多，可以做个阴性对照看看，对比一下

3 回答918 围观

问请教关于OGD（糖氧剥夺）实验的一些细节

qzuser2TA9

是否仅仅进行缺氧处理，有没有进行复氧呢？

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