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        环介导等温扩增可视化pH指示剂不变色,原因是什么?体系有什么要求吗?有哪位大神可以解答一下吗?

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        爱吃喵咪的年糕

        请问有没有人做过LAMP染液是中性红,苯酚红+酚红,HNB三个染液的比对呀,我中性红和酚红类:缓冲液用的是10mM的Tris-Hcl,无Tris的两种(其余试剂组分和试剂盒(诺唯赞)一样),但是反应前后都没有出现变色,只是变透明了一些,试剂盒用HNB比对,可以出现阴阳变色,再后来HNB也不变色了,再后来就是阴阳颠倒,这是什么原因呢?

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        3 个回答

        user-title

        sswei

        有帮助

        LAMP反应前后没有出现变色,可能是由于扩增产物并不是梯度带,糊带不一定有正确的扩增产物。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        如果试剂没有变质的话,考虑是体系的ph调整不对,所以不变色

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        根据您的描述,LAMP反应前后没有出现变色,可能是由于以下原因之一:

        pH不适合:中性红和酚红染液需要在适当的pH范围内工作才能显示颜色变化。如果pH值太高或太低,染液可能无法变色。您使用的Tris-HCl缓冲液pH为多少?建议检查pH是否正确。

        反应物浓度不足:如果反应物的浓度不足,染液可能无法变色。您是否按照试剂盒说明书中的要求使用了正确的反应物浓度?

        操作不正确:在使用染液时,正确的操作非常重要。您是否按照试剂盒说明书中的步骤进行操作?

        至于HNB比对过程中出现的颜色变化,可能是由于以下原因之一:

        染料质量:HNB染料可能会随着时间的推移而失效,导致无法正确显示颜色变化。您是否使用了新鲜的HNB染料?

        反应条件不适合:如果反应条件(例如温度、时间等)不适合,可能会导致颜色变化的出现或消失。您是否按照试剂盒说明书中的要求进行了反应?

        操作不正确:在使用染液时,正确的操作非常重要。您是否按照试剂盒说明书中的步骤进行操作?

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