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实验问答

23,136,097 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问求助：Respiratory Research投稿流程

loveliufudan

Respiratory Research期刊接受LaTex格式的投稿，但是你需要按照以下步骤操作：将你的LaTex文档和图片文件压缩成一个ZIP文件，上传到投稿系统。确保你的图片文件是EPS格式的，否则可能无法显示。确保你的BIB文件中没有错误，特别是一些特殊符号，比如&，需要加\才能识别。确保你的文档符合期刊的格式要求，比如字数限制，页眉设置等。

2 回答689 围观

问AAV诱导microRNA高表达检测不到差异表达

loveliufudan

可能的原因如下：AAV转染的效率不高，导致microRNA的表达量不足以被检测到。可以尝试使用更高效的转染方法或者使用更高的病毒滴度来提高转染效率。microRNA前体的转录效率低，导致microRNA的表达量不足以被检测到。可以尝试使用更强的启动子来提高转录效率。检测microRNA的方法可能不够灵敏。可以尝试使用更灵敏的检测方法，如qRT-PCR或RNA测序等。microRNA可能被降解了，或

2 回答431 围观

问什么是ac螺旋

loveliufudan

AC螺旋，实际上是指A螺旋和C螺旋组成的结构单元。C螺旋位于EGFR的中心区域，与A螺旋相邻。这种AC螺旋结构被认为在EGFR的结构和功能中起着重要作用，例如与EGF结合和受体激活等过程中都涉及到该结构单元。需要注意的是，由于EGFR结构是一个高度动态的体系，AC螺旋结构可能不是一成不变的，可能会受到多种因素的影响而发生变化。

1 回答597 围观

问统计分析星号图注和图上标记的规范表示

loveliufudan

一般来说，科研论文需要严格遵守学术规范，确保数据的准确性和可信度。因此，在论文中描述p值时，最好遵循以下规范：根据实际显著性水平，使用适当的p值描述显著性，如p<0.05，p<0.01，p<0.001等。在图中标注与p值对应的符号数，例如表示p<0.05，*表示p<0.01，**表示p<0.001。在图注中准确描述p值的大小，不要简单地用符号来代替p值。因

3 回答21123 围观

问分离单个核细胞有比较好的Ficoll试剂吗？看的大多数都是淋巴细胞分离液,没有PBMC分离液，求助谢

Dr_劉医生

Ficoll本身就可以用来分离PBMC，Ficoll 密度梯度离心法可以用于分离外周血单个核细胞。该方法的原理是：单个核细胞的体积、形状和比重与其他细胞不同，红细胞和多核白细胞比重较大，为 1.092 左右，而淋巴细胞和单个核细胞比重为 1.075 左右。具体可以看丁香通里的这篇文章https://www.biomart.cn/experiment/430/488/715/2715661.htm

2 回答664 围观

问巢氏pcr后，跑核酸胶检测，发现marker能跑出来，而核酸没跑出来？孔里亮亮的，想问一下是什么原因，求各位老师指点谢谢！

Dr_劉医生

可能是由于以下原因之一：（1）核酸浓度过低；（2）PCR反应条件不合适；（3）引物设计不合理；（4）PCR反应体系中存在抑制物质。

3 回答1613 围观

问配制的VRBA培养基颜色偏红是为什么？

Dr_劉医生

可以减少中性红的量，中性红作为pH指示剂，用于显示pH值。

3 回答756 围观

问用来做流式的的组织消化液怎么配置呀

Dr_劉医生

流式细胞术中的组织消化液配制方法因实验目的和样本来源不同而异。以下是一种常用的配制方法：配制0.3%胶原酶Ⅳ母液，0.22um滤膜过滤后保存于4℃备用。KCl、Glucose、EDTA溶液按照一定比例溶于无菌的PBS中，调节PH到7.4。将0.3%胶原酶Ⅳ母液按照一定比例加入到②中配制好的溶液中，37℃预热备用。

3 回答1902 围观

问脑缺血再灌注的大脑中动脉阻塞阻塞模型做透射电镜切片取哪个部位最佳呢

Dr_劉医生

一般选择大脑皮质作为切片的部位。

3 回答501 围观

问琼脂培养基凝固后为什么放30℃恒温培养箱会溶解

balalaLy

有没有可能是浓度太低了，只是表面那层凝固了

5 回答1846 围观

问病毒载量、病毒滴度和病毒RNA拷贝数有什么区别和联系？

loveliufudan

病毒载量、病毒滴度和病毒RNA拷贝数是描述病毒数量和活性的不同指标。病毒载量指的是病毒在某种样本中的总量，通常以基因组或者抗原的数量为单位来表示。在分析病毒感染程度或者病毒颗粒的分布时，病毒载量是一个比较常用的指标。病毒滴度指的是病毒的活性，也就是病毒在一定条件下可以产生多少感染力的单位。常用的病毒滴度单位包括TCID50（50%组织培养传染剂量）、PFU（含有感染单元的单位）等。病毒RNA拷贝数

3 回答8953 围观

问请问在磁性活化细胞分选（MACS）试验中，剩余的未与细胞结合的磁珠如何与磁细胞分离开来？

Dr_劉医生

在MACS分选中，未与细胞结合的磁珠可以通过磁场分离。MACS分选是基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合，在外加磁场中通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在分选柱内，而无该种表面抗原的细胞由于不能与连接有磁珠的特异性单抗相结合而没有磁性，不在分选柱内停留，进而使细胞得以分离。因此，未与细胞结合的磁珠可以通过磁场分离。

3 回答638 围观

问高效液相色谱待测样品浓度确定

Dr_劉医生

在高效液相色谱中，可以通过内标法来确定待测样品和对照品的浓度是否适合检测。内标是已知浓度的化合物，它与待测样品一起进入色谱柱进行分离。在分离后，可以通过内标的峰面积与待测样品的峰面积之比来计算待测样品的浓度。另外，对照品浓度与峰面积之比等于样品中浓度与峰面积之比，由此可以计算出样品的浓度。

3 回答2530 围观

问YOCK抑制剂Y27632

loveliufudan

虽然RhoA是ROCK的上游调节因子，但是Y27632也被发现具有一定的抑制RhoA表达的作用，具体原因可能包括以下几点：Y27632对RhoA的转录和翻译过程具有一定的抑制作用，从而减少了RhoA的表达水平。Y27632还能够通过抑制细胞骨架蛋白的重组，降低RhoA的活性，从而降低RhoA信号通路的效应。此外，Y27632还能够影响一系列细胞信号通路的活性，包括PI3K/Akt、MAPK等，从而

2 回答694 围观

问96孔板中的细胞长满了，还能做药物实验吗（96孔板中细胞长得超级满的那种）

武金亮wu

最好不要，我之前就是长到90%，发现药物对其抑制作用减弱了，OD值也和之前的差距很大。虽然很麻烦还是建议重新铺板，时间把握不好的尽量稀一点。ps不知道你是做什么实验，如有错误请指出。

7 回答3064 围观

问MEGA序列对比之后，如何确定合适的保守区域设计简并引物？

Dr_劉医生

您可以利用NCBI的Entrez检索系统，查找到一条相关序列，随后利用这一序列使用BLASTP（通过蛋白查蛋白），在整个NR数据库中查找与之相似的氨基酸序列。对所有的序列进行多序列比对，将搜索到的同一基因的不同氨基酸序列进行多序列比对，所有序列的共有部分将会显示出来。

3 回答1793 围观

问时空组学与蛋白组学有什么区别

Dr_劉医生

时空组学和蛋白组学是两个不同的概念。蛋白质组学（Proteomics）是研究一种细胞乃至一种生物所表达的全部蛋白质的统称，它是基因最终真实表达的反应，因此将其作为研究对象是非常重要的。时空组学则是一个大楼的所有位置的，所有时间段的，详细施工方案。

3 回答752 围观

问compound discoverer的biocyc账号验证失败

Dr_劉医生

校园网没有购买批量授权就用不了，只能自己花钱，或者去买一个二手的账号

3 回答901 围观

问TEM图里白色的是什么？请高手指点！

努力邱邱

多肽请用醋酸双氧铀染色，白色是因为染液PH不对造成的，做新鲜染液再试试。

2 回答672 围观

问生物膜结晶紫染色清洗问题

Topmicro

固定好之后不要正对着生物膜部分冲一般都没问题

3 回答1280 围观

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