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        骨巨细胞瘤,如何能够准确操作

        相关实验:组织病理实验

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        祝福未来的自己

        实验方法和注意事项

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        2 个回答

        user-title

        sswei

        有帮助

        培养方法

        1.在无菌条件下取骨巨细胞瘤质脆软的部分,用含青霉素/链霉素的无菌1xPBS缓冲液浸洗3遍,每次10min,至颜色淡白。

        2.用灭菌后眼科小剪轻轻剪碎,加入现配的无菌II型胶原酶工作液(1mg/ml II型胶原酶+2xP/S双抗+1%FBS)重悬,移入15ml离心管中。

        3.置于37°培养箱(5%二氧化碳)内摇床,消化数小时或过夜。

        4.消化结束后,使用200目滤网过滤,1000r/min离心5min。

        5.弃上清,使用新鲜DMEM培养基(15%FBS+1xP/S双抗)重悬沉淀,将细胞接种到培养瓶中,置于37°培养箱(5%二氧化碳)。

        6.培养8h后,弃去未贴壁细胞悬液,无菌PBS洗涤后,加入新鲜培养基继续培养至传代,2-3d换液,可传20-30代。

        7.培养的肿瘤细胞经鉴定后可直接进行实验或者冻存于液氮备用。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        以下是关于骨巨细胞瘤的操作方法和注意事项:

        细胞培养和细胞株选择:骨巨细胞瘤是一种间叶细胞起源的肿瘤,可以通过从患者的肿瘤样本中分离巨细胞瘤细胞进行培养。您可以选择适合您实验需求的细胞株(例如,使用高或低侵袭性的细胞株)。同时,由于骨巨细胞瘤具有多形性和异质性,因此应使用细胞形态学和免疫组化等技术进行鉴定和确认。

        细胞培养条件:为了维持细胞的健康和稳定生长,应根据细胞株的要求选择适当的培养基和培养条件。例如,您可以使用含有10%脐带血清(FBS)的DMEM或RPMI 1640培养基,并在5%CO2下培养细胞。此外,骨巨细胞瘤细胞需要一定的黏附性,因此您应该在组织培养板或瓶子上培养细胞。

        细胞处理:您可以使用化学药物(例如,Zoledronic acid和Bisphosphonates)和蛋白质(例如,RANKL和M-CSF)等促进骨巨细胞瘤的生长和分化的因子。同时,您也可以使用抗肿瘤药物(例如,Cisplatin和Doxorubicin)等药物进行治疗和研究。

        细胞分析:您可以使用流式细胞术、细胞凋亡分析、细胞增殖和迁移实验等技术来分析骨巨细胞瘤的生长和分化。此外,您还可以使用分子生物学技术(例如,实时PCR和Western blot)来研究细胞信号通路和基因表达等方面。

        注意事项:在操作骨巨细胞瘤时,应注意细胞分离和培养的纯度,以避免其他细胞的干扰。

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