实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问培养皿里面已经出现细胞团块了，是不是已经开始影响后续实验了？

z流沙z

看细胞状态如果还好的话，应该问题不大

6 回答692 围观

问丙酰CoA活性可以测定吗？

土井挞克树

检测方法有高效液相色谱仪或者酶标仪测吸光度。

3 回答491 围观

问PCR跑完没有溶解曲线

sswei

可能由于引物没有把目的片段pcr出来。

6 回答5866 围观

问大鼠颈静脉置管插管问题咨询

sswei

大鼠颈静脉置管插管深度3cm，可能注射速度太快。

4 回答711 围观

问Savage法除多糖里的蛋白是醇沉之前除还是醇沉后呀能不能用二氯甲烷代替三氯甲烷呀

土井挞克树

醇沉之前，不可以用二氯甲烷代替三氯甲烷

3 回答1907 围观

问大鼠原代骨髓间充质干细胞培养时如何避免污染？近期提的一批细胞有两皿出现了污染。再请教大家，鉴定BMSC的经典marker有哪些？

sswei

细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底，各种溶液灭菌除菌要仔细，并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时，在无菌过滤操作中，随着滤过体积的增大，滤膜破损的可能性增加，故应选择最后过滤的液体进行检测。各种抗生素性质不同，对各种微生物的作用也不同，联合应用比单用效果好，预防性应用比污染后使用好。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性，且对细胞本身也有一定影响，因此为避免诱导抗药细菌，应定期更换培养系统中的抗生

4 回答422 围观

问细胞实验，每次都出现大量细胞漂浮原因？

sswei

漂着的细胞可能是还没贴壁的活细胞，也可能是死细胞。可以再培养一段时间看看是否贴壁细胞数有所增加或者往培养基中多加一些血清来促进贴壁。可能由消化过度引起。如果一段时间后还是没贴壁，那说明细胞生活状态比较不好或者细胞死亡了。这可能是由于细菌污染引起的，由镜检观察视野中是否有杂菌判断。如果不是很珍贵的细胞，就重新复苏一管吧。

7 回答9451 围观

问细胞刮痕实验一般用多少血清的培养基？

sswei

一般用<2%血清培养基，在适当的时间点，如0，6，12，24小时后取出细胞，在显微镜下观察并拍照。

6 回答900 围观

问请问悬浮细胞怎么做LDH检测呀?我们这没有96孔板离心机，一吸上清把细胞也吸上来了

z流沙z

可以等细胞静置后，轻拿轻放，然后轻轻吸取上清，不要吸干，这样细胞大部分都还在底部，或者是进行离心。

2 回答885 围观

问病毒转化的肿瘤细胞是什么意思？

土井挞克树

不建议用msb1，msb1和ALVJ之间几乎不存在相关关系，没有意义。

3 回答510 围观

问长片段基因的扩增如何选择引物

z流沙z

引物设计没办法避开中间序列的错配或者突变，只能设计尽量好结合、相对特异的引物序列，使用高保真pcr酶可以降低突变概率

2 回答865 围观

问要做thp-1的过表达，用脂质体转染的，但是效率非常低，有高手可以指导吗？

loveliufudan

脂质体转染的效率可能会受到许多因素的影响，以下是一些可能有助于提高转染效率的建议：细胞密度：在进行转染前，确保细胞密度适当。细胞密度过高或过低都可能会影响转染效率。一般来说，细胞密度应该在70%-80%左右。转染试剂：使用高质量的转染试剂可能会提高转染效率。可以尝试使用一些商业化的转染试剂，比如Lipofectamine 3000或者PEI。DNA浓度：确保使用的DNA浓度适当。DNA浓度过高或过

3 回答841 围观

问放了快一年的小鼠血样和肝脏标本，还能拿去做靶向代谢组学检测吗？

z流沙z

如果保存妥善可能还行，但还是建议用新鲜样品

3 回答557 围观

问生物信息学数据库大概分为几类？

来一起探讨

主要分为三大数据库，核酸数据库（NCBI,EMBL,ENA,DDBJ等等），蛋白数据库（PDB,PIR等等），专用数据库（ZINC,pubmed,KEGG等等）

6 回答1129 围观

问定量PCR没有数据，曲线也是乱糟糟，救命啊！！

来一起探讨

可以看看你的反应体系。或者是使用设计的扩增条件。或是看一下所选的荧光通道与试剂是否匹配。

6 回答311 围观

问噬菌体分离，噬菌斑浸泡SM后做不出噬菌斑是为什么

来一起探讨

SM是带抗性药物的基本培养基，若是噬菌体带有药物敏感的等位基因，则不会生长

4 回答919 围观

问PCR扩增之后，体系的微升数会变多吗？

来一起探讨

pcr扩增，高温变性——低温退火——引物PCR扩增仪延伸，体系中的引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 消耗，虽然DNA含量即增加一倍，但是体系不会变多。

4 回答525 围观

问rpm换算

sswei

在3cm的旋转半径下,每300xg的离心力的速度约为2990rpm。每分钟转数（RPM）和相对离心力（xg）之间的关系为：g=（1.118×10-5）RS2，其中g是相对离心力R是转子半径，单位为厘米，S是离心机每分钟的转速.

4 回答15125 围观

问线性剂量反应关系森林图的绘制

土井挞克树

用stata glst做出来的，后续用image生成

3 回答858 围观

问origin的去卷积作图求助

土井挞克树

你把局部的峰值放大，就可以得到峰值图了

3 回答1410 围观

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