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问
盆腔炎大鼠造模需要手术嘛?用到哪些细菌?有没有哪些注意事项。本人小白,有大神或者前辈能讲一些细节嘛,万分感谢
loveliufudan
在动物模型中,盆腔炎可以通过给大鼠注射细菌来造成。下面是造模需要注意的细节:手术:盆腔炎大鼠造模需要进行手术,手术需要在无菌条件下进行。在手术前,需要将大鼠进行禁食和水,以减少手术过程中的胃内容物和膀胱液的污染。在手术过程中需要注意保持手术器械、手术区域的无菌状态,以避免细菌污染。细菌:盆腔炎大鼠造模需要使用盆腔炎相关的细菌。可以使用已知的盆腔炎病原细菌,例如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等,也可以使用
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问
做动物实验时怎么脱毛?有什么高效彻底的方法吗?
sswei
可采用以下方法1. 剪毛法 紧贴动物皮肤,按序将被毛剪去。注意千万不能用手提起被毛剪,以免剪破皮肤。剪取时,应逆着毛发的方向剪取。 2. 拔毛法 家兔耳缘静脉注射或采血时最常用。 将家兔固定后,用拇指和食指将所需部位的被毛拔除,涂上 70%酒精消毒后,可清楚地显示血管。3. 剃毛法电动剃刀(电推子):须逆毛方向剃毛刮胡刀(刮胡刀片):先用
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问
以昆虫cDNA为模板进行PCR无法克隆目的片段
桃之zbx
有可能DNA浓度过低,有没有测过DNA浓度呀酶有没有把目的片段切碎呀PCR的温度和时间调整一下直接送公司测一代看看能不能测出来,反馈结果是什么
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问
外泌体超速离心后,离心管底部出现褐色沉淀,这是为什么?
sswei
因为外泌体样品中含有杂质的缘故。
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问
葡聚糖凝胶柱子装柱后,过几天总是会在底部出现气泡,好几次了,重新装柱子,前几天不会有,过几天就又出现
土井挞克树
考虑是环境温度变化产生的气泡,注意使用时保存温度稳定
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问
易错pcr如何才能p出亮的条带
汤姆卜丽波
主要是你要用到特异性高的引物,然后循环时间多一点
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问
为什么在细胞培养实验中,我培养的细胞分布不均匀,会出现不规则黑点,可能是什么原因导致的?
汤姆卜丽波
如果有不规则黑点,首先观察培养基有没有污染,可以空培看看,然后看是不是环境黑胶虫污染
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问
HE染色封片后能重染吗?
sswei
已经HE染色封片后的组织一般不能再进行染色,因为封片的过程会将组织固定在了载玻片上,使其不再具有活性,无法进行染色反应。
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问
请问大家,我这分的小鼠附睾上皮细胞上午还是这样,下午它就离我远去了,这是怎么回事?
汤姆卜丽波
亮点的部分成块状的感觉是感染,细胞密度也不大
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问
平板克隆实验细胞散落怎么办?
汤姆卜丽波
你可以在加大一点血清的用量,还有就是因为平板克隆周期比较长,所以注意不要经常去看它容易污染
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问
ST细胞和PK细胞传代时,怎样防止其聚堆生长?
sswei
原因:传代时细胞吹打不均匀,没有将细胞团吹散;吹打太用力造成细胞死亡,细胞死亡释放的DNA与其他细胞形成黏性的细胞团;细胞离心速度多大或者离心时间过长;细胞长的太满才进行传代操作。正确做法:消化前加入适量缓冲液对细胞进行清洗,清除死亡的细胞团和部分堆叠杂质;消化后吹打时上下左右吹打约10次左右,注意控制力度;确定细胞正确的离心条件,严格按条件执行;细胞汇合度在80%~90%即可传代。
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问
请问细胞这样是染什么菌了?一直长的很慢,我就没有换液,后来就这样了
汤姆卜丽波
霉菌,之前我的细胞也是这种,超净台,培养箱彻底清洁一遍
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问
迁移的细胞为什么会连成团?
汤姆卜丽波
可能是你一开始没有把细胞吹散所以后面会结块生长,这种其实计数是不准确的
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问
image J免疫荧光细胞计数为啥总出问题,显示阈值设置不对,为啥呀?
汤姆卜丽波
你可以自己设定选择合适阈值Image-Adjust-Auto Threshold选择Try all,点击OK后会列出所有算法设定的阈值:根据结果判断,选择Default算法即可
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问
久置培养基内出现黄色团块,加入双抗会有所改善,但以往在胎牛血清中也见过类似团块(培养基内加入血清使用) 此团块一般是什么原因引起
loveliufudan
黄色团块在培养基中出现通常是由于细菌或真菌等微生物的生长引起的。这些微生物可以污染培养基,从而在其中生长形成团块。另外,如果培养基或添加的成分质量不佳或保存不当,也可能会导致团块的形成。在使用含有胎牛血清的培养基时,团块的形成可能是由于胎牛血清中的脂质、蛋白质或其他成分在培养条件下聚集形成的。这种现象在胎牛血清中比较常见,但也可能出现在其他血清或血清替代品中。加入双抗可以抑制一部分微生物的生长,从
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问
Transwell一般多久固定比较合适啊?
sswei
Transwell一般固定的时间在24小时以内较合适。
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问
目的蛋白是否外泌出细胞外的验证
汤姆卜丽波
如果你的目的蛋白太少了其实wb很难检测到,可以用elisa试试,你也可以把细胞沉淀也试试
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问
WB检测GFP融合蛋白,条带大小不对
loveliufudan
可能是由于以下几个原因:目的蛋白融合GFP后的蛋白质折叠发生改变,导致抗体无法识别目的蛋白的特异性表达区域。这种情况下,建议尝试更换抗体,或者使用不同的抗体进行检测。目的蛋白融合GFP后的蛋白质含量较低,导致条带大小与GFP相似。这种情况下,可以尝试增大加载样品的量,或者使用更敏感的检测方法。目的蛋白融合GFP后的蛋白质降解或者聚集,导致条带大小发生改变。这种情况下,建议在提取过程中加入蛋白酶抑制
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问
HepG2无法用DMEM培养基培养
橙汁儿青柠味
每个实验室的习惯不一样,它可能已经习惯了这个培养基。如果要更换培养基,建议在复苏的时候可以尝试一下
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问
做qPCR,ct值为35,有参考意义吗?
dangaozhanghui
通常情况下是没有意义的,这种基本判定为不表达。但也要具体情况具体分析,因为有些特殊的检测,需要对照试剂盒给出的参考范围,进行判断(●°u°●)」
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