实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问请问鸟类的血液去除血浆后的血细胞能否提取DNA

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能～除红细胞血小板外～其他细胞细胞沉淀可分别提取DNA和RNA

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问细胞培养背景有不会动的黑点，是怎么回事？

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细胞营养不良，生长状态欠佳，或细胞老化都有可能在培养过程中出现小黑点。通常经过热处理的血清，沉淀物的形成会显著的增多。有些沉淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在37℃中欲培养此“微生物“，但在37℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖。

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问动物实验大鼠二度、三度烧伤创面如何造模？

loveliufudan

1.准备实验器材：需要准备实验所需的大鼠、手术器械、热源等。可以选择使用热水、金属板等作为热源，其中金属板可以提供更加精确的热控制。2.麻醉大鼠：使用适当的麻醉药物将大鼠麻醉，确保大鼠处于无痛觉状态。3.制备创面区域：根据实验需要，选择在大鼠的背部或侧面制备烧伤创面。首先将创面区域的皮毛剃除或剪短，然后用清洁剂或酒精消毒。4.准备热源：将热水或金属板加热至适当温度。根据需要制造二度或三度烧伤，可设

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问培养原代小鼠心肌细胞，胰酶消化过程需要多久呢？消化了10分钟，感觉细胞就都死了。提取的组织是不是不能用PBS代替冲洗呢？

sswei

原代小鼠心肌细胞胰酶消化过程2-3分钟即可。

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问请问大家，我这分的小鼠附睾上皮细胞上午还是这样，下午它就离我远去了，这是怎么回事？

汤姆卜丽波

亮点的部分成块状的感觉是感染，细胞密度也不大

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问平板克隆实验细胞散落怎么办？

汤姆卜丽波

你可以在加大一点血清的用量，还有就是因为平板克隆周期比较长，所以注意不要经常去看它容易污染

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问western blot跑出来的内参总是不齐，可能会是啥原因呢？

土井挞克树

可能是上样量不同不均匀，调整上样量再跑，还可能是分离胶浓度太高，可以调整分离胶浓度再跑

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问请问细胞这样是染什么菌了？一直长的很慢，我就没有换液，后来就这样了

汤姆卜丽波

霉菌，之前我的细胞也是这种，超净台，培养箱彻底清洁一遍

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问迁移的细胞为什么会连成团？

汤姆卜丽波

可能是你一开始没有把细胞吹散所以后面会结块生长，这种其实计数是不准确的

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问image J免疫荧光细胞计数为啥总出问题，显示阈值设置不对，为啥呀？

汤姆卜丽波

你可以自己设定选择合适阈值Image-Adjust-Auto Threshold选择Try all，点击OK后会列出所有算法设定的阈值：根据结果判断，选择Default算法即可

3 回答1505 围观

问久置培养基内出现黄色团块，加入双抗会有所改善，但以往在胎牛血清中也见过类似团块（培养基内加入血清使用）此团块一般是什么原因引起

loveliufudan

黄色团块在培养基中出现通常是由于细菌或真菌等微生物的生长引起的。这些微生物可以污染培养基，从而在其中生长形成团块。另外，如果培养基或添加的成分质量不佳或保存不当，也可能会导致团块的形成。在使用含有胎牛血清的培养基时，团块的形成可能是由于胎牛血清中的脂质、蛋白质或其他成分在培养条件下聚集形成的。这种现象在胎牛血清中比较常见，但也可能出现在其他血清或血清替代品中。加入双抗可以抑制一部分微生物的生长，从

3 回答1454 围观

问Transwell一般多久固定比较合适啊？

sswei

Transwell一般固定的时间在24小时以内较合适。

3 回答945 围观

问HepG2无法用DMEM培养基培养

橙汁儿青柠味

每个实验室的习惯不一样，它可能已经习惯了这个培养基。如果要更换培养基，建议在复苏的时候可以尝试一下

3 回答2526 围观

问请问规定酿酒微生物接种量为1×106，怎样确定这个菌的接种量就是1×106？

loveliufudan

要确定酿酒微生物接种量为1×10^6，可以通过以下方法：液体培养基计数法：将酵母或细菌菌株接种到液体培养基中，经过适当的培养时间后，用计数板对细胞进行计数，然后根据菌落形成的比例来计算接种量，从而得到所需的接种量。集落计数法：将菌株接种到固体培养基上，培养适当的时间后，用集落计数板对形成的菌落进行计数，并根据菌落大小和形态来确定接种量。光密度法：通过测量细胞的光密度来确定接种量，可以通过与已知浓度

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问关于pcr特异性引物

loveliufudan

不同的PCR方法，例如qPCR、long-PCR和普通PCR，通常会使用不同的引物。这是因为不同的PCR方法需要针对不同的目的进行设计，因此需要选择适合特定PCR方法的引物。特异性引物的选择也需要考虑到共生菌的特性和目标基因序列的多样性。如果您要同时检测两种不同瓢虫体内共生菌，使用相同的特异性引物可能会导致交叉反应，从而使得结果不准确。因此，最好为每个目标共生菌设计独特的引物，以确保检测的特异性。

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问做qPCR，ct值为35，有参考意义吗？

dangaozhanghui

通常情况下是没有意义的，这种基本判定为不表达。但也要具体情况具体分析，因为有些特殊的检测，需要对照试剂盒给出的参考范围，进行判断(●°u°●)」

3 回答2742 围观

问求助｜腺病毒过表达中设置NC组、WT组，两个组分别代表什么意思？

橙汁儿青柠味

NC组代表阴性对照组，WT组代表空载对照组

3 回答6885 围观

问Meta分析写作探讨

loveliufudan

关于数据提取的问题，您提到了一些常见的情况，例如一些文章只提供了O值，或者提供了多个OR值等。这些情况可能会增加数据提取的复杂性和不确定性，但是这些问题可以通过一些技巧和方法来解决。例如，如果某篇文章只提供了O值而没有OR值，您可以通过计算OR值的公式来计算OR值。如果文章提供了多个OR值，您需要确定哪个OR值最适合您的meta分析，并考虑如何进行合并。在处理这些数据时，您需要确保自己的方法是合理

2 回答505 围观

问脂质命名

土井挞克树

35:1是OH基团的位置信息，共35个碳原子，在一的位置上有基团

2 回答1234 围观

问小鼠结肠炎实验

balalaLy

固定太久对组化检测蛋白表达会有影响，但对HE观察形态不影响。

2 回答490 围观

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