【求助】氧糖剥夺/再灌注（OGD/R）

相关实验：药物致心肌坏死模型

魚鱻魚yu

2023-05-05

各位战友，本人最近在进行神经干细胞筛药，探讨治疗效果最好的药物浓度范围。主要步骤如下：

1、96孔板接种1 w/孔

2、待细胞增长至80%左右进行ogd（4 h）/r（24 h）气体条件（94.9%n2+5%co2+0.1%o2）

3、10%cck8孵育3 h测od值

但重复两次药物毒性和量效关系都不一样，药物治疗效果并不明显，且第一次a浓度治疗效果最好，第二次又变成b浓度治疗效果最好。

目前有几个问题想要请教：

1、大家用精密培养箱造模时会打开96孔板的盖子吗？开不开有影响吗

2、ogd/r会导致细胞死亡吗？如果不死是不是就不能用cck8筛药？

3、乳酸脱氢酶筛药会不会更好一点？

2 个回答

loveliufudan

2023-05-05

有帮助

有以下几点建议：

在精密培养箱进行实验时，建议打开96孔板的盖子。因为在密闭的条件下，细胞间的气体交换会受到限制，可能影响细胞生长和实验结果。但是，在操作过程中要保持无菌操作的规范，避免污染。

OGD/R（oxygen-glucose deprivation/reoxygenation）模型确实会导致一部分细胞死亡，但也可能有一部分细胞存活。CCK-8方法主要用于评估细胞存活率，因此您可以继续使用CCK-8筛选药物。然而，由于OGD/R模型的复杂性，不同时间点和条件可能导致实验结果的波动，因此实验过程中要保持操作的一致性和稳定性。

乳酸脱氢酶（LDH）释放实验是另一种常用的细胞毒性筛选方法。这种方法是通过检测培养液中乳酸脱氢酶的活性来评估细胞膜损伤程度，进而反映细胞死亡率。您可以尝试使用LDH释放实验作为补充方法，与CCK-8实验结果相对照，以更全面地评估药物的治疗效果。