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        求教细胞真菌污染处理方案

        相关实验:食用真菌的液体培养和固体栽培实验

        user-title

        melon医生

        各位老师同学好,今天发现有一皿H9C2细胞出现了明显的真菌污染(肉眼可见菌落,镜下可间菌丝,培养基颜色无明显异常),

        查了下丁香园,也请教了基础实验较丰富的师兄师姐和同学,建议丢掉细胞,酒精擦拭培养箱,并把培养架拿到超净台照紫外(已照做)。

        但是我查到真菌是耐紫外,也耐酒精和84消毒液,不耐高温(说60℃ 1小时即可),但培养箱无法调到60℃,想请教大家具体处理方案,感激不尽!

        另外,部分代理商推荐细胞房安全卫士(普诺赛),说可以消除真菌孢子、细菌病毒等,不知道大家有没有使用经验?

        附污染可能原因:

        1. 冻存的细胞本身污染,它是复苏24h后换液,48h又换液,目前是又72h了,长得慢,所以延长了换液间隔

        2.操作过程中培养液洒在了皿盖或者侧壁上

        3. 房间污染:操作完细胞开了2次中央空调,后用紫外照射房间30min以上。

        备注:同批复苏的其他种类细胞长势良好,已部分冻存,目前还有4皿,暂没发现污染现象图片描述图片描述

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        3 个回答

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        首先,建议立即丢弃污染的细胞,以免污染扩散至其他培养皿。

        对于培养箱的清洁和消毒,可以先用70%酒精擦拭培养箱内部,然后放入一个装有70%酒精的容器,关闭培养箱门,让酒精挥发,消毒30分钟左右。紧接着,打开培养箱门通风,待酒精挥发后,再用紫外灯照射30分钟。

        对于培养架,已经采取了照紫外的措施,您可以再用70%酒精擦拭一下,消毒效果会更好。

        关于培养箱无法调到60°C的问题,您可以考虑使用干燥箱(如有条件)进行高温处理。将培养架、培养皿等放入干燥箱中,设置温度为60°C,加热1小时即可。

        您提到的“细胞房安全卫士(普诺赛)”,有些实验室可能使用过并反馈效果不错。您可以根据自己实验室的条件和预算决定是否购买。但是,实验操作规范和良好的实验习惯仍然是预防污染的关键。

        关于您提到的污染可能原因:

        如果您怀疑冻存的细胞本身有污染,您可以复苏其他批次的细胞,或者从其他实验室借一些做对照实验。另外,您可以加强对冻存细胞的管理,确保冻存条件良好。

        操作过程中,确保培养液不会洒在培养皿盖或侧壁上,以免造成污染。实验操作时,尽量在超净台进行,保持操作规范。

        关于房间污染,您已经采取了紫外照射的措施。保持实验室的清洁和良好通风,定期进行环境消毒也是很有必要的。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可使用两性霉素B或者300ug/mL的氟康唑处理

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        培养箱用84消毒液擦拭然后紫外消毒就可以了。其它耗材高压灭菌,细胞能丢的尽快丢掉。

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