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        请教大神,流式细胞出现相反结果

        相关实验:流式细胞仪标本制备

        user-title

        THeee

        图片描述

        这几个流式的结果,NC是空白对照,si1-3是敲低了目标分子,但是流式结果显示,si1-3反而阳性的指标更高了

         

        这是什么原因呢,因为正常来讲,si之后,无论如何分子的表达量是降低的。

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        2 个回答

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        以下是可能导致此结果的一些原因:

        1. 技术问题:在进行流式细胞术时,可能存在实验技术方面的问题。例如,细胞处理、染色、孵育或流式仪设置等方面可能存在误差或操作问题。建议仔细检查实验操作和流程,确保每个步骤都得到正确执行。

        2. 细胞反应和补偿:敲低目标分子的siRNA可能会导致细胞产生反应或补偿机制。细胞可能通过增加目标分子的表达或激活相关信号通路来对siRNA引起的抑制做出反应。这种反应可能导致目标分子的表达量增加,与预期的降低相反。

        3. 副作用或交叉反应:siRNA敲低目标分子的同时,可能会引起其他分子的副作用或交叉反应。这些反应可能导致其他分子的表达量增加,从而影响到你测量的指标。

        4. 数据解读:在解读流式结果时,需要考虑到数据的可靠性和统计学分析。确保你有足够的重复实验和适当的对照组,以支持对结果的正确解读。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        建议重新检查是否通道测反了,或者体系内是否有蛋白杂质污染,排除上述因素后再跑一遍流式

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