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判断坏死性凋亡和凋亡
土井挞克树
坏死性凋亡不同于凋亡和其他形式的程序性细胞坏死,它不依赖于 caspase 活性,但需要 RIPK3 调控的 MLKL 磷酸化。这种磷酸化事件使 MLKL 在质膜上产生孔复合体,从而导致 DAMP 的分泌、细胞肿胀和膜破裂,可以通过检测MLKL磷酸化程度检测坏死性凋亡
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问
小鼠人源细胞成瘤
土井挞克树
4t1可以用免疫抑制,先用her2转到4t1再做成瘤实验
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问
蛋白质序列,红色字体是什么意思?谢谢
sswei
红色字体意思是剩余重叠切片位点
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问
请问水迷宫老鼠找不到平台,计120秒,怎么统计?请教,急~~
土井挞克树
这种120s的老鼠组不做重复测量的方差分析,做生存分析统计,如果120s以上的特别少也可以按丢失处理
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问
脱脂乳培养基
huarenqiang5
有可能是脱脂乳浓度过低导致的。
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问
要做荷瘤鼠,请问打细胞前最多传多少代??
huarenqiang5
你这传11代一般来说没有什么影响。
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问
pcr 可以检测自噬基因吗
huarenqiang5
检测自噬基因可以用pcr来进行检测。
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问
PEG-6000浓缩病毒
huarenqiang5
PEG-6000+NaCl浓缩病毒时建议使用高压。
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问
AAV病毒用于细胞实验需要注意哪些问题?
sswei
AAV病毒用于细胞实验关键注意事项1. 启动子的选择。是选择广泛性启动子还是特异性启动子。相比于血清型的组织特异性,特异性启动子可实现细胞的特异性,因此对特异性要求较高的研究,可以选择某种细胞特异性表达的启动子。2. 血清型的选择。AAV的血清型主要由AAV衣壳蛋白的结构所决定,不同的衣壳蛋白结构识别不同的细胞表面受体,因此血清型的选择会影响AAV的感染效率、组织亲和性、和开始表达的时间。3. 病
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问
为何有时病毒在体实验表达效率不理想?
sswei
可能的原因为目的细胞不易感,属于难感染细胞,建议适当加大病毒量再尝试。
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问
HE染色,如何区分血管的内膜,中膜和外膜?
dxy_mqg1dtg8
内膜通常呈现出淡紫至深紫色,由一行形态规则、大小均匀的细胞构成,基底膜呈现为深蓝色条纹。中膜通常呈现出淡红至淡紫色,其中平滑肌细胞表现为长条状或梭形,胶原纤维和弹性纤维呈现为深蓝色。在HE染色下,外膜通常呈现出淡红至淡粉色,其中结缔组织和弹性纤维呈现为深蓝色。
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问
SDS-PAGE蛋白电泳实验,设置同样的电压,但是不同时间做,电流相差很大,有时不出带,为什么会出现这种情况?如何消除?
FrEShAIFE
可能和你电泳液的新旧程度有关。内槽放新配置电泳液,外槽放旧液。而且不出条带的话,也有可能是转膜的问题,转膜的时候也要关注电流电压的大小。
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问
wb sds和其他还原剂会使蛋白质4级结构破坏吗
dxy_mqg1dtg8
SDS可以破坏蛋白质的二级、三级和四级结构,转化为线性的多肽链,但对于一些特殊的蛋白质,由于其特殊的结构,SDS处理可能不能完全将其变性成线性的多肽链。此时,这些蛋白质会以其原有的结构形式迁移,而不是以其分子量大小进行排序。因此,对于这些蛋白质,WB SDS-PAGE的分离效果可能会受到影响。
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问
细胞实验,腺苷A1拮抗剂DPCPX浓度怎么摸
dxy_mqg1dtg8
以下是一些常用的方法和建议:1. 文献调研:在开始实验前,可以先进行文献调研,了解该药物的常用浓度范围和对细胞的影响。这可以作为确定初始浓度的参考。2. 初始浓度选择:在实验中,可以先选取一个初始浓度进行处理,通常可以选择文献中常用的浓度或者进行一定的试验摸索。需要注意的是,初始浓度不宜过高,以免药物对细胞产生过大的毒性影响。3. 浓度梯度处理:在确定初始浓度后,可以进行一系列浓度梯度处理,通常选
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问
细胞内抗原的检测-间接免疫荧光法信号微弱的解决方法?
loveliufudan
如果您在细胞内抗原的间接免疫荧光法中遇到微弱的信号,以下是一些可能的解决方法: 1. 抗体优化:选择更高亲和力和特异性的抗体。您可以尝试不同的抗体,包括来自不同供应商或克隆株的抗体。进行一些实验,优化抗体的浓度和孵育时间。 2. 改进固定和渗透化:确保细胞固定和渗透化的步骤正确进行。不同类型的细胞可能需要不同的固定和渗透化条件。优化这些步骤,以确保抗体可以充分进入细胞内。 3. 增加孵育时间:延长
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问
pcr提取完的基因总突变,用了高保真酶也没用,有时候转化进大肠杆菌测序得到的基因序列彻底比对不上。
是TTT
可能是其他基因也共用这个引物序列,你可以用测序结果匹配一下是不是其他相似基因的序列
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问
大肠杆菌重组质粒,三四五六七分别为重组质粒发小为7000bp左右,其中三四五六七皆有12000bp以上的条带大概是什么?求解?
是TTT
这么大的片段考虑环状质粒的可能性大,可能有两种情况:一是酶切效率太低,酶切不完全导致的。二是连接酶的问题,使线性质粒发生了自连
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问
胶体金ph的测定,会堵塞ph计,请问怎么解决
dxy_mqg1dtg8
可以在测定前使用0.22微米的滤膜过滤一下除去大颗粒。
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问
核酸提取试剂盒(磁珠法),一不小心放在-20度了,本来应该放在4度的,会影响检测结果吗?
是TTT
慢慢复温就行,可以拿出来放在4℃融解
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问
实验设计需要将大肠杆菌基因组通过机械破碎(超声破碎)获得破碎的基因小片段,该如何设计
是TTT
1.大肠杆菌扩增:取30ml LB液接种大肠杆菌,37℃ 220rpm摇至OD600在0.6左右,4℃离心取菌体沉淀2.超声破碎:沉淀用4℃预冷的PBS洗涤两次以后,冰上超声破碎菌体沉淀3.提取菌体DNA:按试剂盒说明书操作4.DNA凝胶电泳:分出DNA不同的片段,在紫外灯下将需要基因片段的位置切割下来5.DNA凝胶回收纯化:按试剂盒说明书操作
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