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问
打开一个2.5L的微需氧产气袋配套2.5L的培养盒进行培养,产气袋用几天需要更换新的,三天?五天?一个产气袋能维持多久?
huarenqiang5
一个产气袋一般可以使用4-5天
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问
有用过微需氧产气袋的吗?
dxyc42u
微需氧氧气袋根据充气量不同使用时间也不同
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问
dapi染核,胞质也有什么原因
王堇文
因为染料进入死细胞。其实染的就是细胞核。细胞死后膜通透性增加,dapi穿过膜进入细胞,将细胞核染色,显微镜调好的话,还是能看见细胞的胞质部分。
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问
shRNA和siRNA的敲减效率问题?
是TTT
这是合理的,siRNA进入细胞后直接结合mRNA上互补序列,从而阻碍基因表达,而shRNA需要切割为siRNA才能发挥同样的作用
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问
中国循证心血管医学杂志咨询
sswei
二选一就可以了,多次投反而不好。
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问
求解答,加入IPTG诱导后,细菌增长十分缓慢怎么回事
huarenqiang5
考虑是你加的IPTG浓度过高所导致的。
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问
求助,FBS灭活了十个小时还能用吗!
huarenqiang5
灭活10小时了不能用了,用的话会导致结果存在很大误差。
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问
是污染吗?
相守RGXS
看样子像是污染,建议重新培养。
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问
肺泡灌洗液
huarenqiang5
取肺泡灌洗液后的肺组织能够用于肺组织匀浆检测羟脯氨酸的含量及WB实验。没有什么影响。
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问
tau一直洗不出来是怎么回事啊
huarenqiang5
考虑可能是抗体的特异性低导致的。建议用另外的抗体试试。
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问
指标选择
huarenqiang5
可以取固定当天的1和2的数字。
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问
wb实验
magicmask
杂志社要求比较严,尽量不要调整
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问
AAV注射小鼠,多少病毒量才够呢?
huarenqiang5
根据注射部位的不同而剂量及血清型也不相同:1.肝脏:注射部位常选择门静脉、外周静脉和尾静脉。注射病毒滴度一般选择 8×10^10-2×10^12(GC/kg)(人、灵长类);1×10^11 GC/只鼠,稀释成 50-100 μl 进行尾静脉注射。2.心脏和动脉:常用血清型有:AAV1、AAV6、AAV8 和 AAV9 。常见的注射部位为冠状动脉、主动脉、心肌和尾静脉。注射病毒滴度为 1.9×10^
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问
AAV可以通过哪些方法注射到动物体内进行感染?
sswei
AAV动物实验注射方式可分为系统性注射和原位注射两大类。系统性注射中AAV常见的注射方式有尾静脉注射、眶后静脉窦注射、腹腔注射、肌肉注射、面静脉注射、皮内注射等。原位注射也就是局部注射,根据实验需要在不同的部位进行注射,更加适合局部组织的研究。常见的注射方式有脑立体定位注射(神经)、玻璃体注射(眼睛)、心肌注射(心脏)、肝内注射丶肝门静脉注射等,局部注射的优点在于可实现靶组织的特异性感染,且所需的
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问
感染悬浮细胞或半悬浮细胞时,没有平角离心机怎么办?
王堇文
准备干净的10ml 15ml离心管,转移进离心管进行离心就好
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问
细胞转染效率低,鱼类细胞转染效率更低,怎么解决?
是TTT
转染效率与质粒质量相关:质粒需要无肉毒素,否则影响细胞生长。转染时细胞状态要好,密度处于50%左右为佳。转染时,需要用无血清培基稀释质粒和转染试剂,以防血清影响转染效率
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问
Sds-page凝胶电泳底部防漏密封装置的制作方法
是TTT
密封防漏可以使用甘油,在玻璃板底部涂抹一圈还可以用塑封膜封住玻璃板底部
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问
SHSY-5Y细胞如何减少聚团?
是TTT
调整消化时间:细胞一旦在显微镜下消化成圆球状 立即终止消化,切勿过度现有细胞立即消化下来,重新混匀细胞,在镜下观察到细胞均匀单个分散为止调整传代比例,如果细胞仍旧成团,那么增加传代比例
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问
将血浆冷冻干燥,制成粉剂需要什么实验条件才能实现?大概的实验条件范围?温度、时间等
是TTT
血浆进行预冻。血浆置于-80℃冰箱或液氮中,使之冰冻结实,时间越长冻干效果越好。预冻的原因是样品在固态(结冰状态)下才能冻干。使用真空冷冻干燥机进行冻干。按照一般冷冻干燥程序设置干燥步骤,温度需要在-40℃或者更低,时间需要一至两天。
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问
衣原体培养需要注意事项
是TTT
因为衣原体多缺乏主动穿入组织细胞能力,所以分离培养衣原体需要:接种有衣原体材料的细胞培养管需离心沉淀以促使衣原体穿入细胞或者在细胞培养管中加入适量的二乙氨基葡聚糖(DEAE-dextran),提高衣原体吸细胞的能力,使它易穿入细胞进行繁殖。衣原体分离培养需要在二级以上实验室操作。
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