实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问（不同浓度R皂苷、oxLDL 、细胞凋亡）～如果用DMSO溶解的话，是不是应该有一组DMSO对照？

loveliufudan

是的，就像以下这样分组：A组：只有细胞的对照组，即仅添加培养基或适当的控制液体，没有添加R皂苷或DMSO。B组：溶酶对照组，将DMSO加入细胞培养基中，但不添加R皂苷。C组：oxLDL组，使用液体（非溶液形式）的oxLDL处理细胞。D组：不同浓度的R皂苷处理组，使用DMSO溶解R皂苷后，将其加入细胞培养基中。对于浓度的稀释，具体的实验设计应该根据您的研究目的和实验要求来确定。您可以选择一系列不同浓

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问WB 无用甲醛活化PVDF膜怎么办

balalaLy

活化pvdf膜用甲醇，看转完膜之后marker有没有转过去，marker很浅的话就不用往下做了

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问购买的DMSO浓度过高，用什么稀释？（细胞实验和动物实验有区别吗）另外，动物实验（xiaoshu )使用的DMSO的浓度一般是？

LXKathy

细胞实验，我们用培养基稀释。动物实验可能直接是PBS或者生理盐水稀释。动物实验使用的DMSO浓度也没有固定值吧，得看啥动物，体重等等。你可以先做个预实验，看看耐受性

3 回答878 围观

问怎么样能使人间充质干细胞生长加快？

sswei

α‑雪松烯和异雪松酮可以有效促进人骨髓间充质干细胞的增殖,且不会影响其多向分化能力。

3 回答303 围观

问用pet32a载体表达的蛋白如何用肠激酶处理？

idiotOC0P

最近正好在做这个，我用的酶说明书是这样的体系

3 回答1664 围观

问GraphPadprism计算IC50后，从哪里可以看到标准偏差。或者抗肿瘤活性做完Ic50了。那个文献里面的±标准偏差是怎么算。

土井挞克树

1、打开GraphPadPrism5．0软件，点击column．2、然后点击create3、在title输入组别，在Y下面输入实验数据4、点击左侧graphs底下的data15、点击analyze6、选择columnstastics点击OK，弹出如下界面这个界面就有标准偏差了

3 回答10543 围观

问DNA斑点杂交加底物溶液为什么30min内甚至7小时都无斑点？是静止孵育吗

土井挞克树

可能是阻断封闭不足，建议将经过杂交和严格清洗后的膜用马来酸缓冲液漂洗1~5min；将膜在l00ul阻断液中孵育30min。

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问很多中药单体用于细胞实验的时候不都是用DMSO溶解，配母液。为啥有部分人说DMSO注射老鼠腹腔就有毒？会死。谢谢，急～

loveliufudan

在动物实验中，如果高浓度的DMSO直接注射到动物的腹腔，可能导致毒性反应，包括器官损伤、炎症反应和死亡。这是因为直接注射高浓度的DMSO可能对动物体内的生理过程产生不利影响。在细胞实验中使用DMSO溶解化合物时，一般会进行适当的稀释，以确保添加到细胞中的DMSO浓度在可接受范围内，通常是在0.1%至1%之间。这个浓度范围被认为是相对安全的，并且对大多数细胞类型没有显著的毒性作用。

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问pcr不起峰是什么原因

loveliufudan

PCR不出现特定的放大产物峰可能由以下原因引起： 1. 引物问题：引物是PCR反应中的关键组成部分。如果引物设计不当，可能会导致PCR不起峰或产物低效。检查引物序列是否正确，长度是否合适，是否存在互补、自身二聚等问题。 2. DNA模板问题：DNA模板可能存在质量问题，如降解、含有PCR抑制物质或浓度过低。检查DNA提取过程、保存条件和质量，确保模板DNA的质量良好且浓度适宜。 3. PCR条件问

3 回答1443 围观

问这个数据统计，第二个柱状图为啥分为两截？上面那个小一点的橘黄色啥意思？

feixue7758527w

这个就是所谓的打断柱状体，是因为这个柱子太高了，为了美观、直观，所以打断降低，看着好看一点。

3 回答234 围观

问为什么MCF-7贴壁细胞，在25cm㎡培养瓶中，显微镜下观察有的地方能看清，有的地方看不清呢？而且长得很慢。

LXKathy

我感觉是不是培养皿折射率的问题？或者培养瓶放平了吗？

3 回答441 围观

问姐妹们求救🆘 细胞迁移实验新手小白在线请教我们想做巨噬细胞给药预处理在诱导炎症在哪个步骤后划痕呢还是把处理后的细胞重悬

dxy_mqg1dtg8

在诱导炎症的实验中，通常在将巨噬细胞处理后，再进行划痕或其他诱导炎症的操作，以观察药物或预处理的效果。因此，在诱导炎症之前，应该先将巨噬细胞进行预处理，然后将处理后的细胞重悬，进行后续的实验操作。处理后的细胞可以在适当的时间点进行划痕或其他诱导炎症的实验操作，观察预处理的效果。

3 回答464 围观

问cov434细胞支原体感染的图片

dxyc42u

这是细胞支原体污染的一般图片。

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问为什么我用再障患者骨髓血提的原代细胞长势很差？

dxy_mqg1dtg8

在再障患者的骨髓中，正常造血细胞的数量会明显减少，而癌细胞的数量则会增加。因此，再障患者的骨髓中的原代细胞生长受到了癌细胞的影响，其生长势可能会受到抑制，从而导致生长势较差。此外，再障患者的骨髓环境可能也发生了改变，造成细胞生长环境的不适宜，也可能会影响原代细胞的生长势。如果您在进行实验中发现再障患者骨髓血提的原代细胞长势很差，可以尝试以下措施来改善细胞生长情况：1. 改变培养基组成，尝试不同的培

4 回答269 围观

问蛋白质提取方法优化（硫酸铵沉淀法，胃蛋白酶沉淀法）

dxyc42u

实验室的话一般采用蛋白酶沉淀法这样得到的蛋白质更纯，硫酸铵一般用于大规模提取蛋白

3 回答1281 围观

问贴壁，有木有哪位知道是什么细胞？我从心脏取血分离的PBMC的方式加的1640培养基和刀豆蛋白20ng/ml刺激的。

loveliufudan

可能是单核细胞在刀豆蛋白的刺激下分化成了巨噬细胞。

3 回答328 围观

问关于碱性琼脂糖凝胶电泳

sswei

碱性琼脂糖凝胶电泳能够使DNA保持单链状态，根据其分子大小在碱性琼脂糖凝胶中泳动。

3 回答1698 围观

问请问一下大家是如何将荧光强度的变化

dxyc42u

机器上选择自动分析结果会有的，你好好找下

2 回答351 围观

问国产荧光微球标记抗体稳定性下降

dxy_mqg1dtg8

荧光微球标记稳定性下降可能有以下几个原因：1. 微球质量差：国产微球的质量可能不如进口微球，导致微球的表面粗糙度不一，比表面积不同，固相效果差，导致标记的蛋白易于脱落。2. 微球与蛋白的比例不合适：微球与蛋白的比例不合适可能会导致蛋白在微球表面的分布不均匀，部分蛋白可能会溶解或脱落，导致标记的稳定性降低。3. 固相方法不当：固相方法可能不够完美，导致蛋白没有均匀地附着在微球表面上，或者蛋白分布不均

1 回答947 围观

问如何提高病毒对细胞的感染效率？

huarenqiang5

1.建议提前一天将细胞种植在24孔板中，以感染时细胞融合度在50%左右为宜。2.适当减少感染时的细胞培养基量可以增加感染效率，但也可能增加细胞毒性。如出现细胞毒性可增加培养基量或更换培养基。

3 回答910 围观

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