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问
细胞实验如MTT.WB.pcr 实验如何设置复孔?测几次?同一天测吗?组织中的染色实验,重复有没好建议
sswei
96孔板的实验,比如MTT,luciferase reporter等实验室,单次至少3个复孔,需要至少3次独立重复实验(肯定不是一天做的)。WB实验,收样的时候可以不用做复孔,分装蛋白的时候可以分几份跑胶,也可以就跑一次。但是结果至少重复3次(三批的样本)保证重现性。PCR实验,收样的时候不需要复孔,但是p的时候至少设置3个复孔,且至少3次独立重复实验,也就是说等收三批以上的RNA样本。
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问
一般细胞冻存冻存液只用胎牛血清可以么
sswei
传统细胞冻存液是向培养基中加入保护剂,一般是10%二甲基亚砜(DMSO)和10%-90%的牛血清。
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问
怎样在显微镜下判断贴壁细胞生长状态的好坏
sswei
把培养瓶放入显微镜下观察,培养液中无杂质(可能是细胞死亡破裂)、细胞无悬浮或微量悬浮、细胞饱满透明.视野中贴壁细胞贴壁均匀.观察到这些就说明细胞生长很好了
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问
坐标郑州,跪求跪求食管癌TE13细胞!!!我这有KYSE30、KYSE70、Eca109、KYSE150、TE7可以换!球球了!
土井挞克树
我们实验室有,可以有偿提供TE13细胞
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问
请问一下,使用DMSO溶解的药物,在对培养的细胞进行处理时,选择怎样的阴性对照?
dxyc42u
追加两组阴性对照,细胞的这组+DMSO,还有细胞组什么也不加。
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问
求助各位看看这是贴壁的猪肠上皮细胞吗
dxyc42u
是猪上皮细胞,图中圆形的是还没贴壁的
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问
(不同浓度R皂苷 、oxLDL 、细胞凋亡)~如果用DMSO溶解的话,是不是应该有一组DMSO对照?
loveliufudan
是的,就像以下这样分组:A组:只有细胞的对照组,即仅添加培养基或适当的控制液体,没有添加R皂苷或DMSO。B组:溶酶对照组,将DMSO加入细胞培养基中,但不添加R皂苷。C组:oxLDL组,使用液体(非溶液形式)的oxLDL处理细胞。D组:不同浓度的R皂苷处理组,使用DMSO溶解R皂苷后,将其加入细胞培养基中。对于浓度的稀释,具体的实验设计应该根据您的研究目的和实验要求来确定。您可以选择一系列不同浓
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问
5-氟尿嘧啶的正常使用剂量是多少,应该如何搜索。谢谢大家。
dxyc42u
单药静脉注射剂量一般为按体重一日10~20mg/kg,连用5~10日,每疗程5~7克(甚至10克)。若为静脉滴注,通常按体表面积一日300~500mg/m2,连用3~5天,每次静脉滴注时间不得少于6~8小时;静脉滴注时可用输液泵连续给药维持24小时。
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问
图中所示的双层膜包裹的结构是自噬小体吗?
土井挞克树
是的,自噬小体是由双层膜将一小部分细胞质包围而成,其中被消化的物质是细胞质内含有的各种组成成分,如线粒体、内质网的碎片
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问
做ELISA 能不能用96孔细胞培养板?终止液加多加少影不影响最后读数?
dxyc42u
96孔板有点小,后续实验难度大
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问
嘌呤霉素用紫外线照射后还可能用吗
dxyc42u
可以先做预实验看看还有效果吗,紫外线容易使其化学结构改变
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问
鳞翅目昆虫抗氧化酶家族相关基因怎样筛选?
dxyc42u
首先你要分析已有的两个基因的同源性,并到Genebank等数据库中进行比对,确定两个基因是否具有保守结构域,如果有,你可以根据其保守结构域设计简并引物,到你的目的基因组中扩增新的基因片段。或者以两个已有基因的保守结构域为探针,采用杂交的方法(前提是你要有构建好的基因组文库)钓取含有同样保守结构域相关的基因。如果二者不具有保守结构域或者同源性不高,那么你的实验设计就不可行了。
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问
大鼠和小鼠的腹腔神经节解剖定位,如果一步步开腹寻找
dxyc42u
打开小鼠腹腔后在脊柱旁边寻找神经节
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问
引物上写novel_174-RT是什么意思呀?
dxyc42u
表明这个引物是用于特意性逆转录的
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问
cov434细胞支原体感染的图片
dxyc42u
这是细胞支原体污染的一般图片。
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问
1.如何去除杂交膜气泡? 2.杂交液中鲑鱼精的作用? 3.探针浓度有什么讲究? 若杂交液含探针十几微升,每个探针都要十几微吗
土井挞克树
1.杂交膜气泡如果已经产生,一般选用震荡的方式去除。2.杂交液中鲑鱼精可以起到封闭样品中非特异性片段的作用
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问
蛋白质提取方法优化(硫酸铵沉淀法,胃蛋白酶沉淀法)
dxyc42u
实验室的话一般采用蛋白酶沉淀法这样得到的蛋白质更纯,硫酸铵一般用于大规模提取蛋白
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问
贴壁,有木有哪位知道是什么细胞? 我从心脏取血分离的PBMC的方式加的1640培养基和刀豆蛋白20ng/ml刺激的。
loveliufudan
可能是单核细胞在刀豆蛋白的刺激下分化成了巨噬细胞。
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问
请问一下大家是如何将荧光强度的变化
dxyc42u
机器上选择自动分析结果会有的,你好好找下
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问
如何提高病毒对细胞的感染效率?
huarenqiang5
1.建议提前一天将细胞种植在24孔板中,以感染时细胞融合度在50%左右为宜。2.适当减少感染时的细胞培养基量可以增加感染效率,但也可能增加细胞毒性。如出现细胞毒性可增加培养基量或更换培养基。
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