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        刚刚接触这个,体外转录时,为什么需要还需要反向DNA oligo,将其退火后为双链转录模板,转录什么

        相关实验:体外转录技术

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        ser孤心匠endipit

        设计Cas12a的crRNA

        wx-share
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        3 个回答

        user-title

        是TTT

        有帮助

        反转录时,反向DNA oligo和样品中的RNA互补序列结合,延伸时是一段一段延伸的,需要一段一段连接起来,效率低,延伸以后会形成另一条互补DNA链,即形成了DNA双链模板,它需要退火使其解链才能进行后续PCR扩增

        user-title

        dxy_mqg1dtg8

        有帮助

        在体外转录实验中,反向DNA oligo的主要作用是用作DNA模板。由于反向DNA oligo是单链的,因此需要通过退火的方式将其转变为双链DNA模板。这样可以在转录反应中提供一个可靠的DNA模板,以便RNA聚合酶与其结合,从而合成RNA分子。反向DNA oligo可以编码各种类型的RNA,例如mRNA,siRNA,miRNA等。在转录反应中,RNA聚合酶会根据DNA模板序列合成RNA分子,这些RNA分子可以用于各种下游应用,如原位杂交、Northern blotting和RNA测序等。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        反向DNAoligo可以对有互补重叠区的Oligo进行延伸连接获得小DNA片段,然后小DNA片段以重叠PCR的方式进行逐步连接获得目的DNA片段,以其作为模板,进一步PCR扩增可以大量获得目的片段

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