实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问实验求助|IFN-γ诱导肿瘤细胞PD-L1表达

loveliufudan

如果您的目标是研究药物处理对PD-L1表达的影响，您可以在药物处理期间不再加入IFN-v，以观察药物对PD-L1表达的直接效应。然而，如果您希望模拟特定的生理条件或研究IFN-v与药物处理的相互作用，您可能需要在药物处理期间继续加入IFN-v。

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问怎么理解适应性免疫的特点：耐受性

loveliufudan

适应性免疫的”耐受性”指的是免疫系统对于它自身正常组织的容忍能力。适应性免疫系统在识别和攻击外来抗原的同时，也需要保持对自身组织的不攻击，以防止自身免疫疾病的发生。适应性免疫的耐受性是通过多种机制来实现的。这些机制包括： 1. 免疫耐受的建立：在胚胎发育和早期生命阶段，免疫系统会受到调节，以识别和容忍自身组织。这个过程中的异常可能导致免疫系统攻击自身组织，引发自身免疫疾病。 2. 免疫耐受的维持：

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问求助，效价测定

sswei

全血应保存于4±2℃内，否则易凝固变性失活，影响效价结果。

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问细胞培养过程中出现黑胶虫污染怎么解决

loveliufudan

细胞培养过程中出现黑胶虫污染是一种常见的问题，但可以采取一些措施来解决这个问题： 1. 隔离受污染的细胞：首先，将受污染的细胞与其他未受污染的细胞隔离开来，以防止进一步传播。 2. 清除污染源：检查培养皿、培养瓶、培养基和培养室等，找出可能引起污染的源头。对受污染的培养皿或瓶子进行处理或清洗。 3. 更换培养基：将细胞转移到新的培养基中，确保培养基不被污染源所影响。 4. 清洁培养设备：对培养皿、

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问使用硫酸铵进行盐析，无沉淀析出

loveliufudan

胶原蛋白的提取和析出可能受多种因素影响，以下是一些可能导致你没有得到期望沉淀的原因： 1. 样品源问题：可能是你的初始材料中胶原蛋白的含量较低，或者在提取过程中胶原蛋白已经被破坏或降解。 2. 盐析条件：硫酸铵的浓度对蛋白质的沉淀有很大影响。如果硫酸铵的浓度过高或过低，可能会影响胶原蛋白的析出。在这种情况下，可能需要调整硫酸铵的浓度。 3. pH和温度：胶原蛋白在一定的pH和温度范围内稳定。如果条

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问血浆蛋白在此指什么而言？

loveliufudan

1. 在此背景下，血浆蛋白主要指参与炎症反应的各种蛋白质。这些蛋白质可能包括但不限于补体蛋白（一种参与免疫反应的蛋白质），凝血蛋白（如纤维蛋白），以及各种炎性因子和细胞因子（这些蛋白质在细胞之间进行信号传递，调控炎症和免疫反应）。2. 说到“血浆蛋白被激活”，这主要是指血浆中的某些蛋白质需要被激活才能执行其在炎症反应中的功能。例如，补体系统就由一系列在初始状态下是非活性的血浆蛋白组成。当发生感染或

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问自噬流判断

loveliufudan

LC3-II/1和p62的下调以及AMPK和beclin1的上调提示细胞可能正在经历自噬的激活和执行自噬过程。在自噬过程中，LC3-I会转化为LC3-II，而p62是一种与自噬相关的蛋白质，负责将被自噬降解的蛋白质和细胞器与自噬体结合。因此，LC3-II/1的下调和p62的下调暗示着自噬活动的增加，可能导致了细胞内废弃物的降解和清除。同时，AMPK（AMP-activated protein ki

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问请教肿瘤细胞成球实验出现黄色球体是什么

loveliufudan

黄色球体的出现可能是由于肿瘤细胞内部脂质的积累，脂质积累可以是由于细胞内脂质代谢异常或脂质包裹的细胞内组分。

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问细胞复苏肿瘤细胞复苏后为什么里面有小黑点杂质

loveliufudan

肿瘤细胞复苏后出现小黑点杂质的原因可能有多种可能性，其中一些常见的解释包括： 1. 细胞碎片：在细胞复苏过程中，一些细胞可能会经历凋亡或破裂，产生碎片。这些碎片可能在细胞复苏后的培养物中存在，呈现为小黑点杂质。 2. 细胞内含物：某些细胞内含物，如细胞器的残余部分、内部膜片段或其他细胞成分的残余，可能在细胞复苏后仍然存在，并形成小黑点杂质。 3. 培养物污染：在细胞复苏和培养的过程中，可能会发生细

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问转染vs拯救病毒是什么意思？具体如何操作？

土井挞克树

一种方法是构建病毒的感染性克隆，并以此为模板合成病毒的RNA，通过转染合适的宿主细胞来拯救病毒。另一种方法是通过将病毒的基因组cDNA克隆到质粒载体，并转染易感细胞获得拯救病毒

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问sf9细胞进行杆状病毒（杆粒）转染，需要注意哪些？

loveliufudan

在使用SF9细胞进行杆状病毒（Baculovirus）转染时，以下是一些需要注意的关键点： 1. 细胞培养条件：确保SF9细胞在转染前处于健康、活跃和适当的生长状态。细胞培养基的配方和培养条件应符合SF9细胞的要求，如适当的培养温度（通常为27-28°C）和培养时间。 2. 转染载体和病毒：选择适当的转染载体（如质粒DNA）和杆状病毒背景，以实现所需的蛋白表达。确保转染载体包含目标基因的正确构建，

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问家人们，用台盼蓝测细胞密度的时候机器显示死细胞98%，活细胞只有2%，明明可以贴壁生长，到底哪一步出问题了呢？

loveliufudan

是不是检测方法有问题，如果使用不正确或不适合的染色方法，可能会导致误判。

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问sf9昆虫细胞对数生长期时的细胞密度怎样才能知道？sf9刚复苏培养F1代细胞悬浮的细胞是死亡的细胞还是部分悬浮细胞？

土井挞克树

sf9刚复苏培养f1代细胞是部分悬浮细胞，并不是全部死亡

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问THP-1细胞诱导成M0细胞再诱导成M2细胞，如何进行消化呢？

loveliufudan

对于THP-1细胞，酶消化可能不是最适合的方法。您可以尝试使用细胞刮取的方法，使用细胞刮片或细胞刮棒轻轻刮取细胞以实现细胞的离解。

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问请问各位大神，抑制剂梯度处理细胞时候DMSO对照组应该怎么设置呢？

loveliufudan

DMSO对照组的设置通常是将DMSO单独作为一个组进行处理，以评估DMSO本身对实验结果的影响。这样可以比较其他药物组和DMSO对照组之间的差异。在药物梯度处理细胞时，DMSO对照组可以选择与最高浓度的药物处理组体积相同的DMSO体积。这样可以保持处理组和对照组在处理液体积上的一致性，从而更好地比较它们之间的效果差异。需要注意的是，高浓度的药物相对于低浓度的药物可能更容易析出，但在实验设计中，我们

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问能不能用DMSO配置不同浓度的药物注射到小鼠腹腔？

balalaLy

以高剂量40mg/kg/day为例，假设小鼠体重20g,那么每只小鼠每天的给药量是0.8mg,药物最大溶解度30mg/ml，为了方便计算，你可以配置成20mg/ml的工作液，那么每只动物每天的给药量是0.8mg除以20mg/ml约等于40ul,即取40ul的工作液。同理，中剂量取20ul,低剂量取10ul工作液，但是又要确保所有组别的给药的体积要一致，所以，高剂量组是取40ul工作液+60ul生理

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问刚刚接触这个，体外转录时，为什么需要还需要反向DNA oligo,将其退火后为双链转录模板，转录什么

dxy_mqg1dtg8

在体外转录实验中，反向DNA oligo的主要作用是用作DNA模板。由于反向DNA oligo是单链的，因此需要通过退火的方式将其转变为双链DNA模板。这样可以在转录反应中提供一个可靠的DNA模板，以便RNA聚合酶与其结合，从而合成RNA分子。反向DNA oligo可以编码各种类型的RNA，例如mRNA，siRNA，miRNA等。在转录反应中，RNA聚合酶会根据DNA模板序列合成RNA分子，这些R

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问动物实验分正常对照，模型，和低中高剂量药物组。

balalaLy

所有组加的pbs体积都应该一致，只是药物组的药物剂量按照低中高的剂量，但体积都要保持相等。

5 回答1329 围观

问胶体金试纸条，为什么金标抗体和T线不同文献差别那么大，多抗好还是单抗好，一种单抗好还是两种单抗好

loveliufudan

以下是一些考虑因素： 1. 多克隆抗体：由于其可以识别抗原的多个不同表位，多克隆抗体可以提供更强的信号和更高的灵敏度。然而，它们可能会引入更多的非特异性反应。 2. 单克隆抗体：单克隆抗体只识别抗原的一个表位，所以它们的特异性通常更高。但是，如果这个表位在抗原的自然变异中发生了变化，那么这个单克隆抗体可能就无法识别变异后的抗原。 3. 使用两种单克隆抗体：使用两种单克隆抗体可以增加检测的特异性，因

3 回答656 围观

问8-异戊烯基大豆苷元基因号？

saiao20230601

CAS编号：135384-00-8英文名：8-Prenyldaidzein分子式：C20H18O4

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