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问
悬浮细胞总是在孵抗体和洗的时候被冲掉,悬浮细胞做免疫荧光怎么固定;
土井挞克树
悬浮细胞固定:细胞长好后一定固定好,非常影响后面拍片,4% 多聚甲醛、甲醇、丙酮均是可选用的固定液,固定时间在 10-15 分钟即可。记得之前用PBS清洗一次;另外可以使用PDL处理过的玻片,效果还行,很少脱片。
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问
荧光淬灭太快(几秒钟就消失了还没来得及拍就全黑了)可能是什么原因呢?该怎么改进呢?
土井挞克树
可加防荧光淬灭剂,或者你速度快点以及在激光照的时候再拍照,不拍的时候移开玻片
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问
当其中一个荧光信号很弱时,应该如何调整参数而不导致实验结果出现假阳性?
balalaLy
可以先拍实验组,然后再用同样的参数拍阴性对照组
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问
铺细胞后24小时内 会漂浮较多细胞 这部分上清需要收集么 (不是凋亡产生的漂浮)
balalaLy
如果是没有做任何处理的情况下出现这种情况,可能就是细胞不行,可能是存在污染,或者是细胞消化时间太长
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问
cck8没有差异,流式检测凋亡后细胞早期凋亡率很高,什么原因?
balalaLy
这种结果算正常的,cck8能做出来的差异是属于晚期凋亡,早凋用流式可以检测出来,用cck8检测不出来。可以延长cck8的时间。
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问
胰酶没法预热吧?
balalaLy
建议分装使用,使用前可以37°加热
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问
单标样品的制备方法?不同实验目的或者目标细胞,单标的制备是否有差异?
sswei
不同实验目的,单标制备有一点差异。
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问
各位老师好,正常组细胞坏死占10%-20%可能是什么原因,同样操作的用药组细胞坏死约6%,正常组坏死都偏高
sswei
可能的原因有正常组细胞冻存或复苏过程中损伤;培养液种有毒代谢产物堆积等。
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问
各位老师好,请问看药物处理后看细胞的凋亡率是看早凋,晚凋还是总凋亡率?早调和晚凋有什么区别呢
土井挞克树
凋亡率计算是需要看早凋和晚凋的比值,早凋和晚凋的区别是主要是为了区分出细胞是正常凋亡和非正常凋亡
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问
培养含有kana和amp抗性DH5a有什么区别吗? 这两种菌摇浑浊的时间不一样
balalaLy
没有什么区别,就是要分别加对应的抗生素,浑浊时间主要跟挑菌的数量以及细菌活性有关。时间长短没有什么影响的
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问
求助,鸡白痢沙门氏菌在ss琼脂培养基上的菌落形态,以及为什么会使ss培养基由红色变为黄色?
sswei
由于细胞代谢产酸,培养了细胞后的培养基会从红变黄。
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问
求助,效价测定
sswei
全血应保存于4±2℃内,否则易凝固变性失活,影响效价结果。
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问
血浆蛋白在此指什么而言?
loveliufudan
1. 在此背景下,血浆蛋白主要指参与炎症反应的各种蛋白质。这些蛋白质可能包括但不限于补体蛋白(一种参与免疫反应的蛋白质),凝血蛋白(如纤维蛋白),以及各种炎性因子和细胞因子(这些蛋白质在细胞之间进行信号传递,调控炎症和免疫反应)。2. 说到“血浆蛋白被激活”,这主要是指血浆中的某些蛋白质需要被激活才能执行其在炎症反应中的功能。例如,补体系统就由一系列在初始状态下是非活性的血浆蛋白组成。当发生感染或
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问
能不能用DMSO配置不同浓度的药物注射到小鼠腹腔?
balalaLy
以高剂量40mg/kg/day为例,假设小鼠体重20g,那么每只小鼠每天的给药量是0.8mg,药物最大溶解度30mg/ml,为了方便计算,你可以配置成20mg/ml的工作液,那么每只动物每天的给药量是0.8mg除以20mg/ml约等于40ul,即取40ul的工作液。同理,中剂量取20ul,低剂量取10ul工作液,但是又要确保所有组别的给药的体积要一致,所以,高剂量组是取40ul工作液+60ul生理
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问
刚刚接触这个,体外转录时,为什么需要还需要反向DNA oligo,将其退火后为双链转录模板,转录什么
dxy_mqg1dtg8
在体外转录实验中,反向DNA oligo的主要作用是用作DNA模板。由于反向DNA oligo是单链的,因此需要通过退火的方式将其转变为双链DNA模板。这样可以在转录反应中提供一个可靠的DNA模板,以便RNA聚合酶与其结合,从而合成RNA分子。反向DNA oligo可以编码各种类型的RNA,例如mRNA,siRNA,miRNA等。在转录反应中,RNA聚合酶会根据DNA模板序列合成RNA分子,这些R
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问
DSS蛋白多寡聚体实验
是TTT
准备蛋白样品:用反应缓冲液稀释蛋白样品。准备交联剂:用DMSO溶解配制DSS溶液。在蛋白样品中加入DSS交联剂:交联剂终浓度为0.25~5mM。反应溶液室温孵育0.5-1小时。淬灭反应:加入20~50 mMTris终止交联反应,室温静置15分钟。洗涤样品,进行WB实验。
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问
蛋白条带上有黑色斑点,请问是什么原因
loveliufudan
出现黑色斑点可能有多种原因。以下是一些可能的原因和解决方法: 1. 抗体反应:可能是一抗或二抗与非特异蛋白结合,或者抗体自身发生了过度聚集。解决方法可以尝试降低抗体浓度,或者缩短孵育时间。3天的一抗孵育时间可能过长,通常过夜孵育就足够了。 2. 封闭液:如果封闭液未能完全覆盖滤膜,或者封闭液中的牛奶粉未能完全溶解,都可能引起斑点。应确保封闭液的制备正确,使用新鲜的封闭液,且封闭时液体充分覆盖滤膜。
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问
胶体金试纸条,为什么金标抗体和T线不同文献差别那么大,多抗好还是单抗好,一种单抗好还是两种单抗好
loveliufudan
以下是一些考虑因素: 1. 多克隆抗体:由于其可以识别抗原的多个不同表位,多克隆抗体可以提供更强的信号和更高的灵敏度。然而,它们可能会引入更多的非特异性反应。 2. 单克隆抗体:单克隆抗体只识别抗原的一个表位,所以它们的特异性通常更高。但是,如果这个表位在抗原的自然变异中发生了变化,那么这个单克隆抗体可能就无法识别变异后的抗原。 3. 使用两种单克隆抗体:使用两种单克隆抗体可以增加检测的特异性,因
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问
胶体金试纸条的金标抗体包被和T线抗体包被,为什么很多文献使用的是两种不同单抗,如果只筛选出了一种单抗
土井挞克树
因为两种抗体识别的抗原不同,为了保证筛选的有效性一般都是两种抗体
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问
8-异戊烯基大豆苷元基因号?
saiao20230601
CAS编号:135384-00-8英文名:8-Prenyldaidzein分子式:C20H18O4
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