293t活细胞成像 hoechst染核最适浓度与时间是多少?染核后细胞贴壁不牢换液漂浮怎么办?

最合适浓度为 10 ug/ml ，时间建议在5 分钟。

hoechst一般推荐工作浓度为2~5μg/ml，用于固定细胞或组织的细胞核染色。

---Hoechst的说明书中提示活细胞的染色浓度在0.2 - 5 µg/mL，时间在20 - 30 minutes。固定后的细胞的染色浓度可以降低在0.2 - 2 µg/mL，时间 1 - 15 minutes。一般hoechst很好染色，可以先从低浓度试起。
---关于漂浮的原因很多。常见的情况有，细胞培养液中的血清等营养物质耗竭，会造成细胞状态不好。如果细胞本身贴壁不牢，可以考虑用多聚赖氨酸等粘附剂进行器皿处理。另外，细胞如果经过染料染色，会对细胞状态有一些影响，建议尝试改善细胞培养环境，或者用粘附剂处理的器皿。