实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问加细胞悬液是直接加到100μl培养基里还是细胞悬液体积＋培养基一共100μl？

huarenqiang5

加细胞悬液一般情况下都是直接加到100微升培养基里面。

3 回答248 围观

问如何准确进行细胞计数？比如获取准确数量的少量细胞。

huarenqiang5

在计数板上用显微镜自己数出来就可以获取准确数量的少量细胞。

3 回答326 围观

问细胞免疫荧光多色共染定位（靶蛋白有3个不包括dapi），推荐哪几种颜色

sswei

目前IF双标一般优先选择红色和绿色；如果是三标，则第三种颜色选择蓝色。

3 回答1862 围观

问多颜色共同免疫荧光，最多选几个颜色，选哪些颜色的串色发生少？免疫荧光，或者激光共聚焦哪个好？

feixue7758527w

不知道最多选几个颜色，我所知道的实验大多就是两个染色的，最多也就是三个颜色，再多就不知道了。

3 回答585 围观

问组织成像时40倍物镜模糊，调整焦距不能解决，细胞40倍物镜就很清楚，什么原因？同一张片子，20倍物镜可以清晰，10倍物镜就茫茫一

feixue7758527w

我觉得还是你的片子切的太厚了，放大倍数越大，要求组织切片越薄，否则就是看不清的。

3 回答1449 围观

问老师好，请问加药24h后漂浮的死亡细胞较多，收集样本时是否需要同时收集上清液和贴壁细胞，还是只收集仍贴壁的细胞就行？

dxyc42u

只收集贴壁细胞，漂浮的细胞很可能是加药前生长状态不好的细胞

3 回答421 围观

问组织样品可以做这个凋亡实验吗？还是只能用细胞样品？

sswei

对各类组织样品的组织切片也可以用来做凋亡实验，但是比较复杂。

3 回答122 围观

问老师，请问最高药物浓度组坏死比例高，凋亡比例反而少，这个是合理的嘛？是因为该药物引起的细胞死亡不是以凋亡为主要死亡方式吗？

dxyc42u

合理，药物浓度太高的话导致的细胞死亡不是程序性的细胞凋亡

3 回答520 围观

问慢病毒感染构建的稳转株对照细胞出现很大比例凋亡细胞但是培养过程中细胞状态很好这种现象可能的原因是什么

dxyc42u

很可能是凋亡检测出了问题，排查下

3 回答258 围观

问wb中分离胶用水封液后胶没有往下缩，而且不像果冻是的，像胶鞋底那种硬，是为什么？

dxyc42u

很可能配制时候各个成分搞错了。

3 回答530 围观

问厌氧梭菌涂板计数是为什么呀？

huarenqiang5

不可以用血细胞稀释计数，需要从新复苏培养24－48小时后进行计数。

3 回答371 围观

问核蛋白提取时有浆蛋白污染怎么办

sswei

用 0.5 ml 预冷 PBS 重悬，10000 rpm，离心 3-5 分钟清洗沉淀可以减少胞浆蛋白污染

2 回答883 围观

问求助求助

huarenqiang5

测出来的荧光值几百-几万，你这几万在正常范围之内是可以的。

2 回答538 围观

问这个造模组的肠道有出现组织病变吗？

烧伤科常医生

看提供的片子，没看到明显的组织病变

3 回答404 围观

问BV2细胞

dxyc42u

看图中有部分细胞已经极化了：。

3 回答777 围观

问流式分选仪分选并收集带有绿色荧光标记的细胞

dxyc42u

以下是需要注意的地方（1）如何提高分选速度：振荡频率、鞘液压力、喷嘴大小、上样速度-振荡频率越高，分选速度越快；-振荡频率越高，鞘液压力也随之增加；-若要形成稳定液滴，最佳振荡频率：f=V/（4.5d）；-鞘液压力和喷嘴大小一定时，振荡频率相对固定。-上样速度过快，得率会降低，故最佳上样速度=1/undefinedf（2）如何提高分选纯度：-精确设定液滴延迟时间（Drop Delay）：指细胞通过激光检测区到液

3 回答464 围观

问放射处理克隆形成的一些问题

烧伤科常医生

设计两个组，一组不经过放射处理，另外一组经过放射处理观察，形成克隆的时间，就能知道是否克隆时间形成延长了

3 回答401 围观

问室内饲养蜘蛛如何人工制作洞穴

烧伤科常医生

一组挖好洞的，一组不挖洞的，观察蜘蛛是自愿钻到现成的洞里，还是自行挖洞

2 回答751 围观

问先冻干在进行脱色脱脂还是先脱色脱脂再冻干

烧伤科常医生

你所表述的第二个步骤程序是正确的顺序

3 回答450 围观

问样品前处理中脱色脱脂需要什么试剂及仪器

烧伤科常医生

CBE-5/10L亚临界萃取实验装备，引入plc电脑控制技术，物料萃取设备改为快开结构，用程序自动控制料容比，萃取时间，温度，压力次数等参数，使操作更简便，得到的数据更准确。

3 回答539 围观

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