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实验问答

23,095,524 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问WB居然只出现标签条带

loveliufudan

首先，标签掉落是一个可能的原因。如果标签没有正确地与目的蛋白质结合，或者在转膜过程中丢失，那么您可能无法观察到您期望的目的条带。您可以尝试检查转膜条件是否正确，例如转膜时间和电流密度。另外，如果目的蛋白质表达水平较低，那么在凝胶中可能只能观察到较弱的条带。您可以尝试增加样品的负载量，或者尝试优化电泳和转膜条件以增强目的条带的信号。此外，实验中的其他因素，例如抗体的质量和稀释倍数，以及蛋白质的纯度和

3 回答917 围观

问imvic试验大肠埃希氏菌的结果是啥？

loveliufudan

IMViC分为以下四个试验： 1. Indole试验（I）：用于检测菌株是否能够产生色氨酸酶，将菌株培养在含有色氨酸的培养基中，添加Kovac’s试剂。正反应的菌株会产生红色的Indole复合物。 2. Methyl Red试验（M）：用于检测菌株是否能够产生酸性代谢产物。将菌株培养在MR-VP培养基中，添加Methyl Red试剂。正反应的菌株会在酸性条件下产生红色的染色。 3. Voges-P

4 回答2086 围观

问为什么胸腺嘧啶的最大紫外吸光度小于尿嘧啶

loveliufudan

尿嘧啶在紫外光谱中的吸收峰位较高，这是因为它的结构中包含了一个较为共轭的氮氧双键。这种共轭结构使得尿嘧啶对紫外光的吸收更为强烈。相比之下，胸腺嘧啶缺乏尿嘧啶中的氮氧双键，因此在紫外光谱中的吸收能力较低。胸腺嘧啶的最大紫外吸光度相对较小。这种差异可能与两种碱基的化学结构和电子共轭性有关，进而影响它们对特定波长的光的吸收能力。

3 回答661 围观

问怎么做呼吸道烧伤的动物模型？

huarenqiang5

步骤吸入性损伤动物模型-蒸汽吸入性损伤动物模型实验分为基本过程分为可按照犬（或羊、猪）家兔等区分：1、犬（或羊、猪）蒸汽吸入性损伤模型：静脉注射 1％戊巴比妥钠（30 mg/kg）麻醉，仰卧固定于解剖台上。经口插入气管导管至环状软骨下约 2 cm，然后经导管插入铁-康铜热电偶于气管内固定位置（导管内口下 0.5 cm），连续记录气管内温度。静脉缓慢注射 0.05％司可林（氯化琥珀胆碱），直到自

3 回答514 围观

问RAW264.7诱导破骨细胞

loveliufudan

首先，对于未染色之前没有观察到典型的破骨细胞，可能是因为破骨细胞需要更长的时间来分化和形成。您在第6天进行TRAP染色，但有时需要更长的时间才能观察到明显的破骨细胞形成。您可以尝试延长培养时间，观察是否会出现破骨细胞的特征。关于染色后出现很多小细胞呈红色的情况，这可能有几种可能的解释。首先，这些小红色细胞可能是RAW264.7细胞的前体或早期破骨细胞，它们正在分化并准备形成成熟的破骨细胞。这可以解

3 回答2787 围观

问WB整膜一抗怎么敷

loveliufudan

通常分为两个步骤。以下是一般的步骤： 1. 样品处理和电泳：首先，您将蛋白样品经过电泳分离，并转移到膜上。这可以通过SDS-PAGE等方法完成。在转膜之前，您可以在凝胶中加入分子量标记物以便于确定目标蛋白的位置。 2. 阻断：转膜完成后，您需要对膜进行阻断（blocking），以防止非特异性结合和减少背景信号。常用的阻断剂包括牛血清蛋白（BSA）、脱脂乳清蛋白（skim milk）等。选择合适的阻

3 回答3385 围观

问求问这个Wb是什么问题

loveliufudan

可能是由于以下原因之一： 1. 高背景信号：M型条带可能是由于非特异性结合引起的背景信号增强。这可能是由于阻断步骤不充分、一抗或二抗的过度浓度、阻断缓冲液或洗涤缓冲液中存在污染物等原因。您可以尝试优化阻断条件、减少一抗和二抗的浓度、更换阻断和洗涤缓冲液，以减少背景信号。 2. 交叉反应：M型条带可能是由于目的抗体与非特异性蛋白结合引起的。这可能是由于目的抗体与其他蛋白共有的表位结构相互作用。您可以

3 回答533 围观

问请问拿到了蛋白质TMT测序结果，如何挑选我想做的目的蛋白

loveliufudan

1. 数据分析和筛选：仔细分析TMT测序的结果，包括蛋白质的定量和鉴定信息。通常，测序结果会提供蛋白质的相对表达水平、统计学显著性和鉴定质量等信息。根据您的研究问题和兴趣，筛选出与您关注的信号通路、生物过程或疾病相关的蛋白质。 2. 生物学功能和相关文献：对所选的蛋白质进行生物学功能注释和相关文献调研。了解这些蛋白质的功能、亚细胞定位、相互作用伙伴以及已知的生物学意义，以确保选择的目的蛋白与您的

3 回答514 围观

问WB转膜为什么一张膜有蛋白，另一张没有呢

loveliufudan

可能有以下几个原因： 1. 转膜条件不均匀：转膜时，电流密度、时间和电场的均匀分布都非常重要。如果转膜条件不均匀，可能导致蛋白在膜上的分布不均匀。这可能是由于不同区域之间的电阻差异，或电泳槽中的电流不均匀分布等原因。您可以尝试优化转膜条件，确保电流均匀分布，并且蛋白能够均匀地转移到膜上。 2. 样品加载量不均匀：如果您在转膜之前加载的样品在不同区域上有差异，那么膜上的蛋白分布也会不均匀。确保在进行

3 回答1023 围观

问wb转膜

loveliufudan

以下是一些可能的解释： 1. 技术操作：转膜是一项技术要求较高的实验步骤，操作的细节和技巧对结果影响很大。如果在转膜时对两张膜的处理方法、时间或压力有所差异，可能导致膜标记的质量差异。 2. 膜性质：不同的膜材料可能具有不同的性质，如亲疏水性、表面张力等。这些因素可能会导致某些标记更容易在膜上固定，而其他标记则可能难以固定或容易扩散。 3. 标记物的稳定性：不同的标记物可能在转膜过程中表现出不同的

3 回答708 围观

问求助！敲基因鼠跑WB的问题

loveliufudan

可能存在基因表达水平非常低的情况，无法通过常规的基因鉴定和PCR技术检测到。但是，在免疫印迹（Western Blot）实验中，可以通过放大和检测蛋白质水平来检测到这个基因的存在。

3 回答423 围观

问精子细胞上流式需要过筛嘛？急

烧伤科常医生

我的经验是，精子细胞上流式需要过筛

3 回答429 围观

问诱导多能干细胞

loveliufudan

第一代iPS细胞的培养通常是在铺饲养层之前进行的。铺饲养层的目的是为了提供一个适宜的细胞附着表面，帮助iPS细胞在培养皿中附着并生长。当铺饲养层形成后，初代iPS细胞可以被转移到上面进行进一步的培养和维持。

3 回答331 围观

问过表达慢病毒感染悬浮细胞不表达

loveliufudan

这种情况下，可以尝试以下方法来改善在悬浮细胞中的慢病毒感染效率和表达： 1. 提高感染效率：悬浮细胞通常比贴壁细胞更难感染。您可以尝试以下方法来提高感染效率： • 优化感染条件：包括感染剂的浓度、感染时间和感染温度等参数。您可以尝试不同的组合来寻找最佳条件。 • 使用增效剂：某些化合物或蛋白质可以增强病毒感染效率，例如聚乙烯醇（Polybrene）或微粒（Protamine sulfate）。您可

3 回答739 围观

问三箱社交实验请教

loveliufudan

建议不要超过5只，虽然标准中没有指定可以加入三室测试的小鼠的最大数量，但已经开发出了一种名为"SocioBox"的社交认知测试的变体，其中一只小鼠必须在5只新熟悉的动物中识别出一个陌生的小鼠。这项测试的目标是测量社交认知，而不是三室测试关注的社交偏好。

3 回答745 围观

问动物心率变异性检测

烧伤科常医生

还是找公司租借或者是找公司代测比较划算，没必要单独购买设备

3 回答580 围观

问做了一年WB，gpx4趋势做不出来，甚至是反的，求大神指点

loveliufudan

以下是可能导致此问题的一些原因和建议： 1. 抗体选择：确保您使用的GPX4抗体质量良好，并且已经进行了充分的验证。验证抗体的特异性和灵敏性非常重要，可以通过使用已知GPX4表达的阳性对照样本来验证抗体的有效性。 2. 样本制备：正确的样本制备对于WB实验至关重要。确保样本处理和蛋白质提取过程正确无误。使用相同的样本制备方法和条件来比较不同条件下的GPX4表达。 3. 蛋白负荷量：确认您加载的蛋白

3 回答2014 围观

问大鼠腹腔神经节寻找，求教

烧伤科常医生

腹腔神经节定位：腹腔注射麻醉动物，剖开腹腔翻开大网膜，暴露出腹主动脉与肠系膜上静脉在其交叉处附近找出灰白色结节状腹腔神经节

3 回答581 围观

问丙酮脱色脱脂后为什么还要用95%的酒精脱脂呢？再后面回流的目的是什么呀？

loveliufudan

丙酮和95%酒精的使用是为了脱色脱脂和去除脂质物质，而回流则是为了进一步的洗涤和去除残留物。这些步骤的目的是为了获得纯净的样品，以便进行后续的多糖和蛋白质提取。

3 回答1438 围观

问我想请教一下有关基因芯片的问题，我们实验室有个做小麦穗部性状的660K芯片，我能将数据用来进行矮杆基因定位么

烧伤科常医生

你说的这个数据可以用作矮杆基因定位

3 回答401 围观

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