实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问GVHD小鼠模型总是不成功，老鼠三天内死完，给的7.5 Gy，脾细胞给的2的7次方，骨髓细胞给的1的7次方，求大神指教

loveliufudan

建立GVHD（移植物抗宿主病）小鼠模型是一个复杂的过程，而且结果可能受多种因素的影响。以下是一些建议，希望对你有帮助： 1. 放射治疗剂量选择：放射治疗剂量的选择对于成功建立GVHD小鼠模型非常重要。你提到给予了7.5Gy的放射剂量，这可能对小鼠造成较大的损伤，导致严重的并发症和死亡。建议尝试较低的放射剂量，并根据小鼠的反应进行调整。 2. 细胞移植量：脾细胞和骨髓细胞的移植量也需要仔细优化。如果

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问血小板瑞氏染色可以不用全血而采用离心过后的血清么？

烧伤科常医生

不可以选用离心后的血清，因为血清里没有血小板

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问最近在做3t3-l1细胞的转染，但是发现荧光要么不均匀，要么就是很弱，请问怎么提高转染效率呢？

huarenqiang5

1．选择合适的转染试剂2．保持最佳的细胞状态3．选择高效的转染方法4．确保所构建载体的质量。

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问培养小鼠小肠类器官所用的培养基有具体的配比方案吗？

loveliufudan

基础培养基成分： 1. DMEM/F12培养基：将Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM)和Ham’s F12培养基以1:1的比例混合。添加剂成分： 1. 胰岛素（Insulin）：5-10 μg/mL 2. 转铁蛋白（Transferrin）：5-10 μg/mL 3. 肾上腺素（Epinephrine）：1-10 μM 4. 氯化钠（NaCl）：120

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问胰腺癌细胞培养问题求助？

huarenqiang5

可能是培养基浓度问题，建议提高浓度试试看。

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问细胞实验问题求助？？

huarenqiang5

可能是pi染色时间太长出现的假阳性，建议减小pi浓度或减少pi染色时间。

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问衍生化实验中氯仿可以用别的试剂代替吗

loveliufudan

一种常用的替代品是二氯甲烷（methylene chloride），它在许多提取方法中被用作氯仿的替代品。二氯甲烷在化学性质和溶解度上与氯仿相似，但是需要注意它的使用安全性和环境影响。除了二氯甲烷，其他有机溶剂，如乙醚、甲苯等，也可作为氯仿的替代品。在选择替代试剂时，要注意它们的溶解性、挥发性、毒性和与待分析化合物的相容性。

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问quantity one

loveliufudan

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问求助安装r studio时候的问题

loveliufudan

可能是由于以下原因导致的： 1. R会话启动时间过长：可能是由于启动脚本中的操作较慢或网络驱动器访问较慢导致的。建议等待一段时间，看看是否会话最终启动。有时，可能需要较长时间来加载必要的包和配置。 2. RStudio与R之间的通信问题：可能是由于防火墙限制或反病毒软件导致RStudio无法通过本地网络端口与R建立连接。可以尝试以下操作： • 如果你自定义了R会话的创建，比如创建了一个R配置文件（

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问review proposal发完多久能收到主编回复？

loveliufudan

再等半个月左右，如果还是没有回复，你可以尝试再次给编辑发一封邮件，询问你的review proposal的状态，表达你的诚意和兴趣，同时也提醒编辑注意到你的邮件。

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问总蛋白可不可以作为实验组？为什么

烧伤科常医生

当然可以作为实验组，看你怎么分组，怎么选择对照组，怎么去设计这个实验

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问DH5α通过摇菌的方式扩增会变成普通的大肠杆菌吗？

mistll8

摇菌方式扩增有可能分化出大肠杆菌

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问细胞毒性试验，药物浓度选择

mistll8

IC50是80uM的话选40 80 120浓度确实存在细胞毒性的可能

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问细胞普鲁士蓝染色

烧伤科常医生

我的经验是，需要固定的步骤，效果更好

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问石蜡切片甲苯胺蓝染色

loveliufudan

以下是一些可能的解释和解决方法： 1. 过度染色：如果组织在甲苯胺蓝染色过程中染色时间过长或浓度过高，可能导致染色剂在组织中过度沉淀，形成大范围的黑色斑点。解决方法是减少染色时间或者染色剂的浓度。 2. 染色剂污染：染色剂可能被外部污染物所污染，导致斑点出现。检查甲苯胺蓝染色液是否受到外部污染，可以尝试更换新鲜的染色液。 3. 组织处理不当：如果组织在前处理过程中存在问题，如过度固定、脱水不彻底或

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问体外受精移液针

烧伤科常医生

我建议使用25微升的微量注射器

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问神经痛病例模型小鼠痛域范围

loveliufudan

神经痛模型中痛觉阈值的不稳定性是常见的情况，可能受到多种因素的影响。以下是一些可能需要注意的测痛事项： 1. 小鼠个体差异：小鼠个体之间可能存在天然的差异，包括基础痛觉阈值的差异。这种个体差异可能导致在同一实验条件下观察到的痛觉阈值有所不同。确保使用足够的样本量来获得可靠的统计数据，并使用适当的统计方法对数据进行分析。 2. 试验环境和操作者：确保在相同的试验环境中进行测试，并由同一操作者进行测量

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问蛋白进行提取优化实验

loveliufudan

料液比在蛋白质提取实验中是一个关键参数，用于确定样品和提取缓冲液的比例。不同实验条件和样品特性可能导致料液比的差异，这可能解释了为什么两篇文献中的料液比存在差异。茶叶中硒蛋白的提取优化实验中采用了水提、盐提、醇提和碱提四种方法，料液比为1:20。这种高料液比可能是为了确保茶叶中的硒蛋白能够充分释放和溶解到提取缓冲液中，从而提高提取效率。而鲟鱼肝脏中铁蛋白的提取优化实验中采用了直接加入缓冲液进行匀浆

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问丙酮脱色脱脂后如何去除残留的丙酮？

loveliufudan

在动物组织样品脱色脱脂后，如果你使用了丙酮进行脱脂处理，建议在提取蛋白质之前彻底除去丙酮残留，以避免对后续的蛋白提取和分析产生干扰。以下是一些常见的方法来去除丙酮残留： 1. 蒸发干燥：将含有丙酮残留的样品进行蒸发干燥，通常在常温下放置样品，让丙酮自然挥发。这个过程可能需要一段时间，取决于样品的体积和丙酮的浓度。确保在通风良好的条件下操作。 2. 氮气吹干：使用氮气或气体吹嘴将样品中的丙酮吹干。将

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问样品脱色脱脂中95%酒精的作用及回流的目的

sswei

丙酮溶于乙醇中，所以可用95%酒精。

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