loveliufudan
在细胞凋亡检测中,保留细胞的完整性非常重要,以便准确测量细胞凋亡的标志物。直接使用胰酶消化细胞会导致细胞的形态和结构破坏,可能影响凋亡信号的检测。
相反,常见的细胞凋亡检测方法包括使用特定的染料(如荧光染料)或抗体来标记凋亡标志物,如DNA断裂和磷脂外翻。这些方法通常在细胞处于附着状态下进行,而不需要胰酶解离。
土井挞克树
可以用胰酶消化,直接划下来可能会破坏细胞,造成细胞破裂
sswei
不是不能用胰酶消化是不能用含有EDTA的胰酶消化,因为annexinV是Ca依赖的蛋白,所以不能加入EDTA, 防止EDTA螯合了Ca离子从而影响annexinV,进而影响结果。所以你可以用不含EDTA的胰酶,放入温箱内进行消化,时间可以长一点,随时观察细胞情况,避免消化过度。建议用细胞刮子把细胞刮下来,然后用枪吹匀,比消化还简单,而且也避免了胰酶带来的损伤,机械的损伤还是很小的因为细胞大多呈大片大片地被刮下来。
尚瑨医生
由于在细胞培养中,胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。胰酶作用时间过长、作用次数过多,都容易破坏细胞表面结构
用细胞刮也可以对贴壁细胞进行物理脱壁。使用时侧拿培养器皿,用无菌细胞刮沿一个方向转动挂,集于底部,直至刮完每一个角落即可。
另外,需要注意的是,在做细胞凋亡检测时,不适合用含有EDTA的胰酶,可以使用物理方法对细胞进行脱壁处理。Annexin V常用于细胞凋亡检测,是一种钙离子依赖的蛋白,EDTA会螯合钙离子从而影响Annexin V,进而影响结果,因此需选用不含EDTA的胰酶。
凌晨三点Dxy
检测细胞凋亡时的细胞可以用胰酶消化,也可以直接刮下来,但是二者对细胞凋亡的检测结果会有所不同。
胰酶属于异种蛋白酶,可以将细胞膜上和培养皿结合的蛋白质降解,对细胞也有伤害,所以直接刮下来取样对细胞凋亡的检测结果更准确。
balalaLy
可以用胰酶消化,也可以刮,消化时间不能太长,刮下来要尽量将细胞吹散但不能使劲吹
dxyc42u
检测细胞凋亡可以用胰酶消化的:。
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