用cdna一直克隆得不到目的条带怎么办呀

1，将前期扩的产物稀释后做模板，再PCR。

2, 更换引物，将引物设计位于ATG之前，也就是去扩增mRNA片段，然后以它为模板稀释后扩增CDS区

3, 更换Taq酶，普酶换高保真，高保真换普酶等。

如果在克隆中一直无法得到目标条带，可能有几个原因导致：

1. 低表达水平：如果目标基因的表达水平非常低，可能导致在cDNA克隆中很难获得足够的目标序列。在这种情况下，可以尝试增加反应的RNA数量、增加逆转录反应的循环数或使用增强型逆转录酶。

2. PCR条件优化：检查PCR反应条件是否正确设置，包括引物浓度、扩增温度和循环数。可能需要进行一系列的优化实验，尝试不同的条件，以获得所需的目标条带。

3. 引物设计问题：确保使用的引物与目标基因序列匹配，并具有适当的特异性。重新设计引物，确保其在目标基因上有良好的特异性，避免与其他相关基因发生非特异性扩增。

4. 高度变异的基因：某些基因具有高度变异的序列，这可能导致引物与目标基因不完全匹配，导致扩增失败。在这种情况下，可能需要重新考虑目标基因的克隆策略，例如使用其他方法如基因组测序或荧光原位杂交等。

5. 考虑其他克隆方法：如果持续遇到困难，可以考虑其他的克隆方法，如聚合酶链反应（PCR）克隆、限制性片段长度多态性（RFLP）分析、基因组测序等。

1、将你前期扩的63°的产物稀释后做模板，再PCR。

2、更换引物，将引物设计位于ATG之前，也就是去扩增mRNA片段，然后以它为模板稀释后扩增CDS区。

3、更换Taq酶，普酶换高保真，高保真换普酶等。