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实验问答

31,447,215 科研人在看

问有没有推荐的SYTO green I 和PI 的牌子呢

dxyc42u

我用过索莱宝的，效果还不错价格也实惠

3 回答788 围观

问请问下各位老师，wb结果一边粗一边浅可能是哪些原因呢

loveliufudan

可能由以下原因引起： 1. 不均匀的负载：在进行蛋白负载时，如果样品在凝胶上分布不均匀，可能导致一侧的蛋白负载较高，而另一侧较低。这会导致一侧的蛋白条带更粗更浓，而另一侧则较为淡薄。 2. 不均匀的电泳条件：在进行电泳过程中，如果电流分布不均匀或电场强度不稳定，也可能导致一侧的蛋白条带较为粗暗，而另一侧较为模糊或浅。 3. 不均匀的转移：在进行半湿式转移或湿式转移时，如果蛋白质的转移效率不均匀，可

3 回答2753 围观

问原核表达，加不加IPTG都能表达

loveliufudan

在您进行原核表达时，有一些可能的原因导致您无论是否添加IPTG都能观察到目标蛋白条带的出现： 1. 自发性诱导：有些表达载体或宿主菌株在特定条件下可以自发表达目标蛋白，而不需要外源性诱导剂如IPTG。这可能是导致您观察到目标蛋白条带的原因之一。这种自发性表达可能是由于一些突变或其他因素导致的。 2. 泄漏表达：宿主菌中的T7 RNA聚合酶可能存在泄漏表达的现象，即在未添加IPTG的情况下，T7 R

1 回答6992 围观

问请问摇菌后pcr基因鉴定，出现的条带比目的条带短，并且不止一次是怎么回事？

loveliufudan

可能有几个原因： 1. 引物设计问题：检查所使用的引物序列是否正确，并确保引物序列与目标基因序列匹配。如果引物序列存在错误或与目标序列不匹配，可能会导致扩增产物大小不符合预期。 2. PCR条件优化：优化PCR反应条件，包括温度梯度、延伸时间和循环数等，可以尝试不同的温度梯度或延伸时间来优化PCR反应，以获得更准确的扩增产物大小。 3. DNA模板质量和浓度：确保所使用的DNA模板质量良好，并且在

3 回答4248 围观

问BJ细胞测给药24h后cck8时细胞活力时，吸光值低（0.15-0.4）之间，要延长给药时间，还是加大接种量比较好

龙大人驾到

如果BJ细胞在给药24小时后CCK-8检测的吸光值较低（0.15-0.4），说明细胞活力下降，可能是由于药物的细胞毒性导致的。此时，为了提高细胞活力，可以尝试以下措施：1. 延长给药时间。如果给药时间较短，可以考虑延长给药时间，以便细胞有更多的时间来适应药物，或者药物的作用可以更充分地发挥。2. 减少药物浓度。如果药物浓度过高，可以考虑降低药物浓度，以减轻细胞对药物的负担，从而提高细胞的生存率和活

4 回答709 围观

问组织和细胞跑WB匀浆后需要加裂解液～为什么组织做ELISA 做匀浆即可？匀浆能提取蛋白吗

loveliufudan

对于细胞和组织的蛋白提取，常用的方法是使用裂解液。裂解液中含有蛋白酶抑制剂和蛋白分解酶，可以破坏细胞和组织的结构，释放出蛋白质。对于细胞，裂解液的使用可以有效破坏细胞膜和细胞器，并释放细胞内的蛋白质。裂解液中的蛋白酶抑制剂可以防止蛋白质的降解，保持其完整性。而对于组织，裂解液同样可以破坏组织结构，释放细胞内的蛋白质。组织的匀浆操作主要是将组织打碎，增加表面积，以便裂解液更好地与组织接触，促进蛋白质

3 回答2793 围观

问各位专家们，hepg2细胞划痕状态能帮忙看下对不对吗

loveliufudan

目测细胞随着时间的生长规律很正常，可以继续进行后面的实验。

3 回答1044 围观

问求大佬们分享一份THP1诱导巨噬细胞极化CD86和CD206流式双染protocol！

loveliufudan

以下是一份常用的THP-1细胞诱导巨噬细胞极化并进行CD86和CD206的流式双染的实验方案：材料： • THP-1细胞（人单核细胞白血病细胞系） • RPMI 1640培养基（含10% FBS和1% 抗生素/抗真菌剂） • Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) • 无血清RPMI 1640培养基 • 流式细胞仪染色缓冲液（例如PBS或FACS缓冲液） • 非

1 回答2320 围观

问细胞污染

静心观照

看一下培养基有没有杂质，贴壁细胞有没有大量漂浮，细胞形态有没有变化。如果都没有的话，可能是培养皿底部的杂质。

5 回答643 围观

问溶血活性检测————阳性对照求助

loveliufudan

在溶血活性实验中，阳性对照常常使用皂苷类物质，如saponin、digitonin或triton X-100等。具体选择哪种皂苷和剂量取决于您的实验设计和所研究的细胞或红细胞类型。以下是一些一般常用的阳性对照皂苷及其剂量的参考值： 1. Saponin：一般的使用浓度为0.1%-1%。具体剂量的选择应根据实验需要和所用细胞类型进行优化。 2. Digitonin：一般的使用浓度为10-100 μg

1 回答2198 围观

问请问小鼠纵隔淋巴结在哪儿

龙大人驾到

小鼠的纵隔淋巴结位于胸腔中，沿着气管和主动脉分布。取纵隔淋巴结需要进行手术操作，以下是一般的操作步骤：1. 消毒工具和手术区域。将小鼠放在手术台上，用70%乙醇或其他适当的消毒剂消毒手术器械和手术区域。2. 切开胸腔。用手术剪刀和缝合针切开小鼠的胸腔，揭开胸骨和肋骨，使纵隔淋巴结暴露出来。3. 取出纵隔淋巴结。用医用镊子或者细胞刮片等工具，轻轻取出纵隔淋巴结。在取出淋巴结时要注意不要损伤淋巴结和周

3 回答4480 围观

问请问此大鼠肺脏HE病理情况

sswei

脂肪在HE染色下溶解，形成空泡。

4 回答2121 围观

问染色片子上有一层棕色东西是什么

dxyc42u

考虑出现了非特异性染色，一般是孵育时间过长了

3 回答690 围观

问小鼠原代滋养层细胞提取

sswei

磁选法：利用磁珠与特定抗体的结合来实现对目标细胞的选择性分离，较为快速和简便，但需要针对磁珠和抗体进行选择和优化。差速离心分离法：将组织通过差速离心，可以分离出不同密度的细胞，能够获得特定组织的细胞，但相较于其它方法分离效率较低。

4 回答1380 围观

问您好，我想请教下用于WGA染色的小鼠心脏切片厚度多大呢

loveliufudan

对于小鼠心脏切片的厚度，常见的建议是使用4-10微米的厚度。选择适当的切片厚度是根据实验需求和研究目的来确定的。较薄的切片可以提供更高的分辨率，适用于细胞级别的观察和分析。然而，较厚的切片可以提供更多的组织结构信息和三维视角。

3 回答1172 围观

问骨髓原代巨噬细胞提出来MCSF刺激7天后上机，流式显示大部分表达m2标志物

loveliufudan

这可能是由于以下原因之一： 1. 细胞异质性：骨髓原代巨噬细胞是一个异质的细胞群体，可能包含不同亚群的巨噬细胞。即使使用相同的刺激条件，不同亚群的细胞可能会以不同的方式响应，导致M2标志物的表达。 2. 刺激剂浓度和时间：MCSF刺激的浓度和持续时间可能会影响细胞分化和功能。可能需要对刺激剂的浓度和时间进行优化，以获得期望的巨噬细胞亚型。 3. 细胞状态：骨髓原代巨噬细胞的刺激过程中，其他因素如细

1 回答634 围观

问结合传递

loveliufudan

要成功进行结合传递实验，有几个关键因素需要考虑： 1. 适当的转染试剂：选择适合你的细胞类型和实验目的的转染试剂。不同的细胞类型和试剂之间可能存在差异，因此需要进行优化和测试。 2. 合适的转染条件：优化转染条件，包括转染试剂和外源DNA或RNA的浓度、转染时间以及细胞密度等因素。这些条件的优化可能需要进行多次尝试和调整。 3. 目标细胞类型的适应性：不同细胞类型对结合传递的适应性有所差异。确保选

1 回答653 围观

问想咨询一下WHONET里面的数据问题

loveliufudan

在WHONET中，“数量”和”总得数量”是用来描述微生物菌株对抗生素的敏感性或耐药性的指标。以下是对这两个术语的解释： 1. 数量（Quantity）：数量表示在一定条件下，对某种抗生素的最小抑菌浓度（Minimum Inhibitory Concentration，MIC）。MIC是指能够抑制微生物生长的最低药物浓度。在WHONET中，数量通常以浓度单位（例如mg/L）表示。 2. 总得数量（T

1 回答927 围观

问膜片钳记录不出来电流有些什么原因呢

loveliufudan

以下是几个可能的原因： 1. pH值校准问题：pH值的校准对于膜片钳实验非常重要。如果pH值未正确校准或达到所需的水平（例如7.4），可能会影响膜片的性质和膜蛋白的功能，从而导致无法记录到电流信号。确保正确校准pH值并使用合适的缓冲液是非常重要的。 2. 膜片质量和清洁度：膜片的质量和清洁度对于成功记录电流信号至关重要。确保膜片没有破损、没有杂质以及正确的封接是非常重要的。 3. 蛋白质的状态和稳

1 回答986 围观

问PCR扩增，长度符合预期，但是测序回来的序列经对比后，不符合要求。

loveliufudan

出现目的片段与预期不符的情况可能有以下几个可能原因： 1. 污染或混合：在连接载体和转化涂板的过程中，可能存在外源性DNA的污染或混合，导致测序结果显示的不是您所期望的目的片段。这可能是由于工作台、试剂、PCR管或其他实验室环境中存在其他DNA片段的污染所致。为了避免这种情况，建议在实验室操作中严格控制污染，注意无菌操作，并避免试剂和操作工具的交叉污染。 2. 扩增过程中的错误：在PCR扩增目的片

4 回答1339 围观

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