实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

问请问这是什么污染？冻存液里发现的

土井挞克树

看着像是真菌污染，建议把培养基消毒灭菌

3 回答326 围观

问pcr仪前面的循环用一个tm和后面的循环用另一个tm值这个叫什么呀？怎么设置呢这个

土井挞克树

一个是退火tm，一个是延伸tm，可以在pcr中进行设置。

3 回答624 围观

问不同样本间/组间数据统计方法差异比较有相应的指南吗？投稿后被审稿人质疑统计方法的使用

loveliufudan

是的，有一些指南和准则可以帮助研究人员在不同样本间或组间比较数据时选择适当的统计方法。以下是一些常见的指南： 1. “统计分析的准则”（Guidelines for Statistical Analysis）：这是根据实验设计和数据类型制定的一般性统计分析准则。各个学科领域和学术期刊可能会有自己的统计准则，因此建议查阅您所研究领域的相关期刊或学会的指南。 2. “BIOSTAT小册子”（BIOST

3 回答537 围观

问初次写综述，对于综述里面的绘图有什么比较好的建议吗？让人眼前一亮的那种

loveliufudan

以下是一些建议可以帮助您创建引人注目的绘图： 1. 选择适当的图表类型：根据您要传达的信息和数据类型选择合适的图表类型。常见的图表类型包括柱状图、折线图、散点图、饼图、箱线图等。确保图表类型能够清晰地呈现数据并符合绘图目的。 2. 简洁明了的设计：保持图表简洁明了，避免过度装饰和复杂性。使用清晰的标签和标题，确保图表的主要信息一目了然。适当调整图表的比例和比例尺，使得数据的变化易于观察和比较。 3

3 回答837 围观

问原代心肌细胞培养传代

loveliufudan

通常情况下，从新生24小时内的SD乳鼠心脏分离的原代心肌细胞是可以进行传代的。然而，传代的成功率和细胞的健康状态可能会随着每一代的增加而下降。原代心肌细胞的传代次数是有限的，通常在3到5代左右。这是因为原代细胞在体外培养的过程中会逐渐失去其特殊性质和功能，并且细胞增殖能力也会逐渐下降。此外，原代细胞在传代过程中还会面临染色体不稳定性和细胞老化等问题。为了最大限度地延长原代心肌细胞的传代次数，可以采

4 回答1574 围观

问实验设计不行是不是就需要从头来

loveliufudan

当你意识到自己的代谢组学研究中分组较少时，有几个步骤可以帮助你应对这种情况： 1. 重新分析现有数据：仔细检查你已经收集的数据，看看是否有可能根据不同的特征重新组合样本，以形成更多的分组。例如，你可以根据样本的临床特征、治疗方法、疾病进展等重新分类样本。这样做可能会为你提供一些新的分组选项。 2. 扩大样本收集：如果可能的话，考虑扩大你的样本收集。这可以帮助你增加分组数量并获得更多有代表性的样本。

3 回答333 围观

问论文投稿时怎么选择合适的期刊？

loveliufudan

选择合适的期刊进行投稿是非常重要的，尤其在专业领域较小且期刊数目有限的情况下。以下是一些策略可以帮助您选择合适的期刊： 1. 研究领域和目标读者群：考虑您的研究领域和目标读者群，寻找与您的研究主题相关的期刊。这样可以确保您的研究能够被专业人士广泛阅读和引用。 2. 影响因子和指标：了解期刊的影响因子、引用指标以及在相关领域的知名度。这些指标可以帮助您评估期刊的学术声誉和影响力。 3. 类型和出版政

4 回答424 围观

问论文写作时从何处下手比较好？

huarenqiang5

1、确认论文主题和目标，明确论文要点：首先，弄清楚论文的主题和目标，以及论文要写的要点，这样可以使写作更有针对性和方向性。2、做好文献调研：找一些相关论文，然后仔细阅读和整理，给自己提供更多的思路和支持。3、列出论文大纲：在写作之前，列出一个简单的大纲，把论文的主要内容和分论点列出来，以此来组织论文结构。4、集中注意力：最好选一个安静的地方，减少干扰，避免分散注意力，集中精力写作。5、尝试写出好的

4 回答178 围观

问论文写作时实验方法部分要写到何种程度？

静心观照

这要看杂志的具体要求，有的杂志要求精炼，那就把主要的过程写一下，一些细节可以忽略；但有的杂志会抠细节，具体每一步每一份试剂的用量都要体现。最好是看你所投杂志的要求，进行针对性的修改

4 回答281 围观

问审稿人说细菌鉴定需要用1541R/27F引物？

huarenqiang5

这个你就必须按照审稿人的要求做才能通过审核。建议用1541R/27F引物进行细胞鉴定。

3 回答2657 围观

问栅藻判别死活 SYBR green I和PI共同染色可以么

huarenqiang5

可以，栅藻可以判别死活SYBR gree I和PI共同染色。

4 回答985 围观

问ChIP IP时需要定量吗？

huarenqiang5

是的，ChIP IP时需要进行定量。

4 回答313 围观

问小动物活体成像问题，求解答

dxy_mqg1dtg8

活体成像结果可能与解剖结果存在差异，这是由于以下原因：1. 活体成像技术的亮度值受到多种因素影响，如光线强度、背景噪声、器材故障等，可能会导致误差。2. 活体成像技术对不同类型的组织有不同的灵敏度，某些病灶可能会呈现出较高的亮度值，但在解剖时，由于组织结构的缘故，可能并不会显示出明显的大小差异。3. 活体成像技术可能无法准确区分某些组织类型，例如肝脏、胰腺、胆囊等在影像上可能会呈现相似的亮度值，而

4 回答908 围观

问这提取的rna还能用吗，最下面条带是啥呀，为啥那么亮?第二张图为什么marker条带越大越不亮?

dxy_mqg1dtg8

RNA从上到下三条带应该为28S，18S，5S，5S这么亮很可能是RNA降解了。

4 回答1076 围观

问原代干细胞的提取比如dpsc其它类型也可

土井挞克树

酶消化法一般提取率相对高一些，但是弊端是对实验条件要求较高，容易造成细胞破裂

3 回答238 围观

问构建的稳定细胞系被污染了，有啥补救措施吗？谢谢啦

loveliufudan

以下是一些建议来补救这种情况： 1. 检查实验室环境：仔细检查实验室环境，包括培养室、材料和试剂的存储区域，以确定是否存在潜在的污染源。确保实验室环境的清洁和无菌状态。 2. 检查操作流程：回顾你的实验操作流程，特别是与细胞处理相关的步骤。确认是否有可能存在污染的操作，如培养皿、培养液、工具等。确保在操作中严格遵守无菌操作规范。 3. 更换细胞培养物：考虑更换新的细胞培养物，包括培养基、补充物和抗

4 回答477 围观

问关于流式细胞术补偿调节问题

静心观照

1、需要设置单染管，但通常是对照组设置单染管。2、可以使用PBS稀释细胞悬液；也可以接种的时候适当增加细胞接种密度，上机的时候使用低速跑。3、未染色的管是双阴管，两种染料都不染，此管主要用来圈门，确定大部分细胞的位置；通常也是对照组设双阴管。4、FSC-SSC，调节的原则是上下左右都不压线，如果细胞比较小，可以选择不同的模式，适当放大信号，细胞分群就会比较明显了。6、个人使用过Biolegend这

3 回答1402 围观

问EvansBlue是一种非膜透性染料，只有细胞膜受损的时候才能透过膜进入细胞

静心观照

伊文斯兰，常用于检测细胞膜的完整性和细胞是否存活。活细胞因有外排功能而无法被伊文斯兰染成蓝色，而死细胞会被染成淡蓝色。因此可以通过此方法在显微镜下区分死细胞与活细胞，但无法区分死亡与坏死。

3 回答790 围观

问求助——实验设计是否合理

静心观照

其实，再设一个模型+抑制剂组，会更好。药物组与它相比无差异，说明药物与抑制剂作用相当。

5 回答1645 围观

问需要在大肠杆菌中构建融合蛋白表达系统，并将目的蛋白分泌至培养基中，应该如何设计基因表达线路？

dxy_mqg1dtg8

在大肠杆菌中构建融合蛋白表达系统可以采用以下基本步骤：1. 选择适当的载体。载体需要包括启动子、转录终止子、选择标记等元件。常用的载体有pET、pBAD、pGEX等。2. 将目的蛋白基因与载体连接。可以使用PCR扩增目的蛋白基因，然后将其与载体连接。连接方法可以采用限制性内切酶切割、Ligase连接等方法。3. 构建融合蛋白。可以将目的蛋白基因与表达载体中的某个蛋白基因连接，从而构建融合蛋白。4.

3 回答1052 围观

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