实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问原代干细胞的提取比如dpsc其它类型也可

土井挞克树

酶消化法一般提取率相对高一些，但是弊端是对实验条件要求较高，容易造成细胞破裂

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问构建的稳定细胞系被污染了，有啥补救措施吗？谢谢啦

loveliufudan

以下是一些建议来补救这种情况： 1. 检查实验室环境：仔细检查实验室环境，包括培养室、材料和试剂的存储区域，以确定是否存在潜在的污染源。确保实验室环境的清洁和无菌状态。 2. 检查操作流程：回顾你的实验操作流程，特别是与细胞处理相关的步骤。确认是否有可能存在污染的操作，如培养皿、培养液、工具等。确保在操作中严格遵守无菌操作规范。 3. 更换细胞培养物：考虑更换新的细胞培养物，包括培养基、补充物和抗

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问用Epiquik试剂盒提取组蛋白，分装好之后-80保存，第二天跑胶，有时候能跑出条带有时候没有，在同一块胶上有时候也是这个情况

土井挞克树

比较细可能是上样量不同的原因，调整上样量会改善

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问H9C2心肌细胞培养问题

土井挞克树

现在的细胞密度过小，建议增大密度，目前看来不需要重新培养，可以再观察看看

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问为什么分离培养骨髓间充质干细胞第一代细胞不生长，长的很稀很慢，怎么提取能加大密度，去除杂细胞呢？

loveliufudan

有几个可能的原因以及相应的解决方法： 1. 初始细胞密度不足：确保在分离BM-MSCs时使用足够数量的起始骨髓细胞。增加初始细胞密度有助于提高细胞生长速率。可以尝试使用更多的骨髓细胞或使用较小的培养表面积来增加细胞密度。 2. 细胞营养物质不足：提供足够的培养基和营养物质对细胞的生长非常重要。确保培养基配方正确，包含适当的营养物质，如培养基、血清、生长因子等。 3. 培养条件不适宜：BM-MSCs

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问pcr扩增产物出现杂带怎么办？

土井挞克树

引物设计不合理　　引物是PCR扩增反应中的重要组成部分，引物的选择和设计对PCR扩增的特异性和准确性有很大的影响。如果引物的设计不合理，可能会导致扩增产物出现杂带。例如，引物长度过短、引物的序列重复、引物的序列含有多个GC或AT碱基等都可能导致PCR扩增产物出现杂带。　　解决方法：重新设计引物，确保引物的长度适当、序列不重复、GC含量和AT含量适中，并使用专业的引物设计软件进行设计。　　模板DNA

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问投稿时该如何选择刊物呢，价格都是多少呢

土井挞克树

首先要看你的文章主体方向，paper和review选取的杂志肯定有所差异，另外要看创新度和完整度，创新度好的可以考虑sci或者北大核心之类的高刊，价格一般几千元不等

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问梅雨季节，怎么防止支原体污染？

loveliufudan

以下是一些防止支原体污染的常用方法： 1. 严格的无菌操作：在实验室中进行严格的无菌操作，包括使用无菌技术和消毒实验台、操作器具和培养皿。确保培养物和培养液都不受外界环境的污染。 2. 经常更换培养基：定期更换培养基可以减少细菌和支原体的增殖。培养基中添加适量的抗生素，如青霉素和链霉素，可以预防细菌和支原体的污染。 3. 定期检测和筛查：使用特定的检测方法，如聚合酶链式反应（PCR）或荧光染色等，

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问您好，想请问为什么有时候曝光出的蛋白条带会出现缺孔呢？

土井挞克树

可能是曝光的时间过短或者曝光强度过大，建议调整

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问关于流式细胞术补偿调节问题

静心观照

1、需要设置单染管，但通常是对照组设置单染管。2、可以使用PBS稀释细胞悬液；也可以接种的时候适当增加细胞接种密度，上机的时候使用低速跑。3、未染色的管是双阴管，两种染料都不染，此管主要用来圈门，确定大部分细胞的位置；通常也是对照组设双阴管。4、FSC-SSC，调节的原则是上下左右都不压线，如果细胞比较小，可以选择不同的模式，适当放大信号，细胞分群就会比较明显了。6、个人使用过Biolegend这

3 回答1376 围观

问细胞染色二抗染30分钟能染出来吗？

土井挞克树

一般来说二抗30-40min就可以染出来了

4 回答581 围观

问MTT测试细胞增值抑制率

土井挞克树

药物浓度是可以的，可以考虑调整一下细胞密度。降低一下细胞密度

4 回答586 围观

问请问在文章的写作后，用chatGTP修改后能直接投稿用吗？

feixue7758527w

最好不要直接投稿的，还是自己再看一下，在润色一下，中文期刊也要再查一下重复率再说。

3 回答416 围观

问血液中蛋白质组学如何确定要提取膜蛋白或线粒体蛋白呢？

dxyc42u

用血清比较好一些，血清提的蛋白更加纯一些

3 回答391 围观

问请问有购买PAD4抑制剂的嘛？除了MCE公司之外，可以推荐一些其他卖抑制剂的公司？

dxyc42u

可以去MedBio这个公司官网看看。

4 回答394 围观

问启动子区polyC结构少一个C

dxyc42u

很有可能影响启动子的活性，可以预实验检测下

4 回答374 围观

问大鼠鞘内注射利多卡因后双下肢不发生瘫痪，但是给其他药物时有明显的刺激症状，是什么原因呢？

dxyc42u

很可能是利多卡西给的太少了，建议加大剂量

4 回答585 围观

问有使用UCP2抑制剂genipin的朋友吗？

dxyc42u

genipin使用浓度会不会太高了，如果浓度没问题，可能是genipin本身问题，可以换个牌子的试一试

3 回答271 围观

问有偿求CD23 cre的工具鼠！做B细胞分化的，已购赛业基因鼠，没有找到CD23 cre的工具鼠资源，求支援

土井挞克树

我们实验室有cd23 cre的工具鼠，可以提供

3 回答531 围观

问求问大佬NLRP3相关通路的wb步骤

麻黄连翘赤小豆

NLRP3和Caspase 两个条带显示蛋白有降解，其他蛋白还好，蛋白降解一个是冻融次数多，还有就是保存时间过长，新鲜组织的蛋白一般降解不多，可以重新做后两个蛋白。前面三个蛋白如果不稳定还是看是不是上样时样品不均一，没有摇匀等问题

3 回答3510 围观

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