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实验问答

24,016,205 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问菌落pcr出现很多杂带是什么问题呀呜呜呜

飞跃迷雾1

可能有非特异性扩增，引物特异性差，提高退火温度试试？也可能是电泳胶的问题或者引物设计不合理需要重新设计引物。

3 回答2335 围观

问酶标板加错了怎么办？洗了重加，还是再买一块。

飞跃迷雾1

可以清洗后再用。酶标板的清洗可用酶标板洗板机进行，酶标板洗板机用于清洗酶标板检测后的一些残留物质，洗干净后还可以使用。

3 回答546 围观

问想跑一下EMT的相关蛋白求指教

loveliufudan

在验证细胞迁移和侵袭能力的变化时，可以考虑以下一些与EMT（上皮间质转化）相关的蛋白和相应的抗体： 1. E-钙黏蛋白（E-cadherin）：EMT过程中，E-cadherin的表达下调，其丧失与细胞迁移和侵袭能力的增强相关。 2. N-钙黏蛋白（N-cadherin）：EMT过程中，N-cadherin的表达上调，其增加与细胞迁移和侵袭能力的增强相关。 3. Vimentin：Vimentin

3 回答4835 围观

问ELISA里配几个酶标板？如加错了或者要做预实验酶标板会不会不够？单独有售卖酶标板的吗？因为酶标板包被抗体（夹心）能否通

麻黄连翘赤小豆

最好不要加错，酶标板不够再买一块Elisa的板子重新加样，因为Elisa本来稳定性也比较差

3 回答490 围观

问原代嗅鞘细胞培养时，有无药物可抑制嗅成纤维细胞的生长？

loveliufudan

在原代嗅鞘细胞（OECs）培养过程中，有一些药物可以用来抑制嗅成纤维细胞的生长。这些药物包括：他汀类药物（Statins）：他汀类药物是一类用于降低胆固醇的药物。它们也具有神经保护作用，并且一些研究显示它们可以抑制嗅成纤维细胞的生长。FGF-2：FGF-2是一种参与嗅成纤维细胞生长和分化的生长因子。阻断FGF-2的作用可以抑制嗅成纤维细胞的生长。Noggin：Noggin是一种蛋白质，可以抑制FG

3 回答306 围观

问测水中COD用什么方法测最合适呢

土井挞克树

分光光度法　　COD检测分光光度法是以经典标准方法为基础，重铬酸钾氧化有机物，六价铬生成三价铬，通过六价铬或三价铬的吸光度值与水样COD值建立的关系，来测定水样COD值。采用上述原理，国外最主要代表方法是美国EPA.Method0410.4《自动手动比色法》、美国材料与试验协会ASTM:D1252-2000《水的化学需氧量的测定方法B-密封消解分光光度法》和国际标准IS《水质化学需氧量（COD）的

4 回答582 围观

问荧光成像显微镜判别栅藻、小球藻的死亡用什么染料更合适

土井挞克树

可以用SYBR greenI来进行染色

3 回答1342 围观

问用cdna一直克隆得不到目的条带怎么办呀

sswei

1，将前期扩的产物稀释后做模板，再PCR。2, 更换引物，将引物设计位于ATG之前，也就是去扩增mRNA片段，然后以它为模板稀释后扩增CDS区3, 更换Taq酶，普酶换高保真，高保真换普酶等。

3 回答2960 围观

问测定植物中过氧化氢，提取过氧化氢时加浓氨水有什么作用，下列公式具体是什么意思？

huarenqiang5

提取过氧化氢时加入浓氨水是一种催化反应，在这一过程中，水中的氧气能够被氨水反应得到极其稳定的过氧化氢。氨水过氧化氢反应的基本反应方程式为:2NH3+H2022NH40H+02。这一反应可以被简化成两个步骤:第一步为NH3与H2O2反应形成NH4OH，这一步可能会产生温和的热量:第二步为NH4OH反应产生02，期间可能会产生大量的热量。反应过程中没有任何副产物产生，也没有任何

3 回答1714 围观

问wb图片处理用什么软件？

loveliufudan

以下是一些常用的软件选择： 1. ImageJ/FIJI：这是一个免费开源的图像处理和分析软件，广泛用于科学研究领域。它具有许多功能，包括图像增强、对比度调整、标注和量化分析等，非常适合WB图像的处理和整理。 2. GIMP：这是另一个免费的图像编辑软件，类似于Photoshop，具有许多高级图像处理功能。GIMP提供了图层、选择工具、滤镜等功能，可以用于对WB图像进行编辑和调整。 3. Adob

3 回答1244 围观

问TUNEL荧光检测试剂盒冰冻切片染色

huarenqiang5

主要有以下几点弊端:1)不容易做连续切片和较薄的切片。2)组织块在冻结过程中产生的冰晶影响细胞的形态结构及抗原物质的定位。组织结构不如石蜡切片好，切片较厚、不易得到很好的连续切片，且操作时容易破碎(易破碎的样品在冰冻前可用10％明胶或2％琼脂糖包埋)。由于组织内的水份起到包埋剂的作用，在组织冰冻的过程中，一旦冰晶的核心形成，它们就逐渐膨胀，并破坏所有围绕它们的细胞器。当冰冻的组织切片贴到玻片上时，

3 回答905 围观

问求一张在一个六孔板里细胞密度大概是2×10的6次方的图片

sswei

铺板密度要根据细胞类型决定，比如一般293T,6孔板要铺板4×105，如果是HELA,细胞比较大，就要铺大概1.6×105左右。如果你是要做质粒转染，铺板密度也和你要用的转染试剂有关，LIPO就要求细胞密度在转然的时候达到70％－90％以上，钙转就只要50％即可。

3 回答1672 围观

问求助各位大佬

飞跃迷雾1

会不会跟温度有关系呢，建议是现用现配，DMSO在4度有析出是正常的，可以用DMSO配成母液，－20度保存，需要用了常温解冻，再加培养基稀释，现配现用。

3 回答414 围观

问跑电泳出现这种情况是啥原因呀就是

麻黄连翘赤小豆

抗体特异性较差，洗膜时间太短了，建议延长

3 回答259 围观

问这张GEPIA的图F值是什么意思呀？有意义吗？

sswei

从图中结果显示F值为2.48，将这一数值与显著性水平的F进行比较，大于显著性的F值，那么P则小于该显著性的概率，F>F（0.05），那么P<0.05，说明处理间差异显著。

3 回答902 围观

问脂多糖诱导人气道上皮细胞模型？

huarenqiang5

建议用25μg·mL^(-1) LPS诱导细胞24h。

3 回答344 围观

问细胞膜仿生纳米粒子制备

huarenqiang5

可以使用溶胞法提取:这是一种简单、有效的细胞膜获得方法，其原理是使用溶胞酶溶解细胞，使细胞膜脱离细胞，从而获得细胞膜。溶胞法可以有效获得低粘度细胞膜，其结构和性质可以很好地控制，也可以有效保存细胞膜的复杂结构和性质，是一种理想的细胞膜获得方法。

3 回答710 围观

问ELISA检测法进行筛选时，阴性对照孔

sswei

Elisa法筛选时，阴性对照孔显色值较高，常常是因体系里未融合浆细胞分泌抗体干扰检测结果。

3 回答1015 围观

问外泌体wb鉴定CD63和TSG101条带反白是啥原因？救救孩子

sswei

原因:中心部位高浓度HRP把底物消耗过快,中间部位底物消耗结束之后就不发光了。解决办法:降低蛋白量,降低一抗和二抗的浓度。

4 回答985 围观

问求助，巨噬细胞体外免疫抑制模型怎么建立？

Bad child

师兄，请问最终找到方法了吗？因为我想做免疫抑制方向的，在纠结用巨噬还是T

3 回答733 围观

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