实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问吉凯基因慢病毒转染之前细胞铺板用的完培是无双抗的吗

喝不醉的可乐

吉凯基因慢病毒转染前，细胞铺板时通常是使用含有完全培养基（完培），但是不含有抗生素（即无双抗）的培养基。这是为了避免抗生素对病毒感染效率的干扰。抗生素可能抑制慢病毒的转染效率，因此转染前建议使用无抗生素的培养基，确保细胞生长状态良好。不过，转染完成后恢复正常培养时，可以重新加入双抗来防止细菌污染。

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问wb实验中，不同组织间上样量一致，跑出来的内参条带不均一，是什么原因，应该如何解决？

dxy_z33f7k07

有做BCA测蛋白浓度吗？如果测了蛋白浓度，且保证上样浓度一致的话，想问一下你都是哪几个组织？用的是哪个内参？因为不同组织内参的表达量确实会出现不太一致的情况，最好使用那种不同组织间表达比较稳定的内参。另外就可能是BCA测的不是特别准确诶

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问细胞贴壁性变差的原因

此用户已注销

①胰蛋白酶消化过度：胰酶处理时间过长，可能导致细胞膜蛋白受损，影响细胞贴壁调整消化时间：缩短胰蛋白酶消化时间或降低其浓度，以减少细胞膜蛋白受损。②微生物污染：支原体感染或其他微生物污染会导致细胞功能紊乱，影响贴壁能力。分离培养物，检测支原体。如果发现支原体污染，应丢弃培养物。③培养基pH值过碱：培养基pH值过高，可能导致细胞不适应，影响贴壁使用无菌醋酸溶液调整 pH值或充入无菌 CO2以维持适宜的

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问脂溶性药物小鼠尾静脉给药应该怎么溶解呀？

Sydwl

用dmso溶解了以后，再用pbs或者dd水稀释注射

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问请问大家做treg流式都用什么牌子的试剂盒？

Sydwl

为什么要试剂盒，直接买流式抗体不就行了，你这也不需要固定破膜

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问有没有比较好合成并且可以注射到静脉或心肌内的生物材料啊

dxy_z33f7k07

是要包裹什么东西然后静脉注射吗？一般纳米载体用的比较多吧，像LNP这种都可以包裹后静脉注射

1 回答189 围观

问mRNA-LNP怎么转染细胞？

dxy_z33f7k07

一般LNP包裹以后都是上活体实验了，试试不用LNP包裹直接转染细胞呢？

1 回答499 围观

问肽钙螯合实验，肽钙比2:1，pH7，60度下反应1h，加9倍无水乙醇，静置2h，然后4k转离心得到的螯合物很少，为啥，怎么解决？

dxy_sbyagsy6

同学你好，请问你解决了吗，我也是醇沉完全没有东西，我用的40mg肽，肽钙2：1，反应1h，醇沉根本没有沉淀，咋整啊

1 回答164 围观

问纯肽与钙螯合，加入9倍乙醇但没有螯合物的沉淀，如何能得到肽钙螯合物的沉淀呢？

dxy_sbyagsy6

同学你好，请问你解决了吗，我也遇到这个问题了，求求了🙏

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问为什么连接之后转大肠杆菌之后做菌落pcr老是没有目的条带，引物验证了都没有问题，克隆这一步都是能克隆到目的片段的

dxy_mrjrk0g0

你好同学，麻烦问一下你现在的问题解决了吗？

7 回答3284 围观

问求助！大鼠肺泡灌洗液

烧伤科常医生

建议负80摄氏度保存，更好一些

6 回答1464 围观

问Western Blot 一抗孵育4℃过夜，有时间范围吗？时间长度的上限或下限

dxy_mqg1dtg8

Western Blot 一抗孵育的时间应该根据实验需要和一抗的性质来确定，通常需要进行优化。一般来说，一抗孵育的时间范围可以在1小时至过夜之间。如果您需要进行快速检测，可以选择较短的一抗孵育时间；如果您需要检测较弱的蛋白质信号，则可以选择较长的一抗孵育时间。在孵育过程中，可以不断检测蛋白质信号的强度，以确定一抗孵育的最佳时间。需要注意的是，过长的一抗孵育时间可能会导致非特异性结合，从而影响检测结

9 回答23651 围观

问endnote快速筛选review的方法咨询

besttky

你的问题解决了吗，我是初学者，也遇到同样的问题，版本是mac 21，上述2个回答都没有用。

3 回答2723 围观

问肿瘤细胞膜提取。

土井挞克树

可以参考中科院的纳米材料辅助肿瘤细胞膜的提取方式。

5 回答3042 围观

问薄层色谱分析壳寡糖，重复不出来怎么办呀？

sswei

薄层色谱分析重员不出耒主要是展开剂有无变化，还有就是板子，再其次考虑温湿度，所以需要针对上述情况改进。

5 回答601 围观

问双抗分装问题，小白错误

dxy_082oaia6

正式验证不建议继续使用。但如果是方法开发一般来说浓度影响不大，可以做个实验看试剂有没有被污染，没有污染我觉得用用问题不大，主要看你是什么性质的实验。

4 回答737 围观

问一般一抗和二抗是用什么稀释的呀？

申东熙老伯

用TBST稀释，如果是用牛奶封闭的，也可以直接用牛奶稀释，因为封闭用牛奶也是用TBST配的。

6 回答15161 围观

问miRNA靶位点预测，如何精准定位？

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动物中的mi RNA靶位点预测，如何精准定位？

2 回答467 围观

问有小鼠肝kuffer细胞分离的详细步骤么？之前按照一篇硕士毕业论文的操作，一只老鼠只能分300w左右

dxy_y6ygzew3

请问博主优化后的具体步骤油吗？能取到多少细胞呢？

4 回答5584 围观

问转膜夹受力不均匀怎么办？

dxy_gdng8xm6

朋友，请问你解决这个问题了吗？

5 回答1984 围观

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