原来可以表达的蛋白现在诱导表达不出来了，请问有没有同学遇到相似的问题，最后怎么解决的？感谢！

请问你解决了吗？我最近也遇到了一模一样的问题？

我也出现了这种情况，之前做的时候条带非常明显，现在不行了

楼主解决了吗，我也遇到了相同的问题

试试保存甘油菌时加入葡萄糖，取甘油菌培养时也加葡萄糖，转接之后不要加糖。我之前也遇到过类似的问题，这样做就稳定表达了

楼主解决了么，最近做实验遇到了相同的问题

质粒保存没问题的话就重复做几次感受态吧，反正我会在转化之后做菌p去check有没有导入，另外最好诱导做一下浓度或者时间的梯度试一下

请问题主解决了么，我也遇到了一模一样的问题，半个月前诱导出来了，但是最近，诱导时间和诱导温度一模一样，操作也一样，都诱导不出来

请问题主解决了这个问题了吗？我也遇到同样的问题

考虑可能是如温度过高或过低、培养时间太短或太长，或者诱导剂的浓度不够或质粒发生污染导致。

两方面原因：

1.表达条件不优

蛋白质的诱导表达通常需要适宜的温度、培养时间、诱导剂浓度等条件,这些条件可能会因不同蛋白而不同。如温度过高或过低、培养时间太短或太长,或者诱导剂的浓度不够,都可能导致蛋白质无法被充分表达,从而无法诱导出来。

2.质粒或表达宿主株问题

质粒或表达宿主株问题也可能导致蛋白质不容易诱导出来。比如,质粒本身可能受到污染或损伤,导致表达蛋白的缺陷;表达宿主株则可能存在蛋白降解酶、异物毒性等问题,导致蛋白质无法得到稳定的表达。

注意处理因素作用的时间，温度等是否与之前一致，也要注意诱导剂是否已经失活