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        科研小白,请教各位前辈指教:PBMC培养48h后流式检测T细胞凋亡发现细胞凋亡的很多。

        相关实验:流式细胞仪检测细胞凋亡实验

        user-title

        GUAJE

        1.EDTA抗凝管采血5ml,密度梯度离心后取的白膜层,1500rpm,5min 清洗两次。细胞记数后约undefined10^5/孔(24孔板),培养基配置:RPMI1640 10%胎牛血清,双抗 。

        2.PBMC分离后显微镜下看,有很多血小板,背景看着很脏乱。但是培养基澄清。请问这是正常的吗?

        3.请问PBMC培养是不是需要加T细胞活化试剂。这是T细胞凋亡的原因吗?我看部分文献加,部分不加。

        附上图片,希望能有好心人指教一下。

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        3 个回答

        user-title

        dxy_mxfl1wp9

        有帮助

        博主,请问现在有找到什么好方法分PBMC里面的T细胞吗,我最近做的实验图和你的好像,很多死细胞,背景特别不干净,T细胞也很少

        user-title

        汤姆卜丽波

        有帮助

        血小板太多了不正常,会干扰正常T细胞生长,加分离液再离心吧

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        血小板没有分离出去造成背景板混乱,可以尝试多次离心,分离彻底一些。

        user-title

        GUAJEuser-title

        谢谢前辈。今天去检测流式,细胞又凋亡率高达70%,这实验真的没法做了。😹图片描述图片描述

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