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科研学霸天团，48小时有问必答

问斑马鱼胚胎发育时空图谱有助于我们理解哪些胚胎发育过程中的模式形成及相关分子机理？

sswei

时空组相对应时间点的胚胎，进行单细胞测序，并利用SPOTlight整合scRNA-seq和Stereo-seq数据，绘制了斑马鱼胚胎的空间发育轨迹。最后，通过计算空间中不同时间点中配体-受体对的相对距离，发现在胚胎发育中具有潜在互作关系的配体-受体对，并确认了其在发育中具有的潜在调控功能。在10 μm的分辨率下，对不同时间点的斑马鱼胚胎进行了空间区域的划分，区分出不同组织边界。同时通过进一步的细化

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问GES-1细胞常见的损伤方式有哪些，可以用醋酸损伤不

天一湖医者

直接损伤，化学损伤等，可以用醋酸损伤。

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问请问如何检测未知浓度的样品？需要注意什么

sswei

1、先配置一个标准样品（B1#）（一般需要检测哪几种离子，就配哪几种离子的混合标准样品），其浓度可为仪器做线性指标时的最大浓度。（如我只需要仪器检测NO3―、SO42―两种离子，做线性时最大浓度对应为20ppm、20ppm，那么（B1#）为NO3―、SO42―两种离子的混合样）　　2、进（B1#），谱图采集完毕后手动停止，修改文件名，保存。按标准样品谱图处理方法对其进行处理（通过调节手动处理按

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问原代细胞首次传代问题

Luckybabygirl

看来这个细胞也是很娇贵的，在胰酶消化的过程中，你可以试试轻微吹打，不能单凭它自己消化，那样消化时间过长，对细胞是有损伤的。

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问如何进行T淋巴细胞体外培养法？

sswei

T淋巴细胞体外培养法T淋巴细胞转化试验（T细胞增殖试验）实验步骤1. 小鼠脾细胞悬液的制备取一个灭菌的平皿，加入5 ml Hank's液。颈椎脱臼法处死小鼠，取脾脏，放入平皿中，在钢网上研磨并过筛，制成细胞悬液。取出100 μl用于计数。将其余细胞悬液移入一离心管中，离心1500 rpm，7 min，（或1000 rpm，10 min）弃去上清，用RPMI1640 培养液稀释，制成2.5×10

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问MHCC-97h细胞越养，就越小，都缩起来了；还有HLE细胞养起来有什么技巧，经常吹不散

huarenqiang5

养HLE细胞技巧与方法: 传代密度 :细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养传代比例 :首次传代建议1：2传代传代方法: 1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2.加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM

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问两药联合等辐射分析

z流沙z

用spss或者graphpad等软件都可以统计和绘图

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问ROS探针染色

sswei

1.可能是传代次数多造成的2.血清：可能是原因3.胰酶消化过度：可能消化过度对细胞造成比较大的损伤，导致传代状态不佳4.细胞长的太密

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问Annexin-V/PI 双染测H9C2心肌细胞系凋亡拍荧光图

土井挞克树

正确的顺序是先滴结合液然后滴甘油然后爬片。

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问求教大肠埃希菌的生化鉴定判

sswei

I M Vi C试验主要用于快速鉴定大肠埃希菌 + + - -。在确保所使用的各种方法都没有错误的情况下，如果仍无法使试验菌生长，则应该采用薄膜过滤法进行检查。理由是该方法能够最大程度地去除产品的抑菌作用。

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问用什么实验方法明确烧伤创面皮肤愈合质量？

土井挞克树

可以试用划痕法在单层培养细胞间制作划痕以产生愈伤区域，然后监控该伤口周围细胞的向划痕迁移的现象，即伤口愈合。改变细胞迁移和/或生长的因素可以增加或降低伤口愈合率。

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问stata做回归曲线图线条做出来是直线，怎么可以做成文章里的这种曲线图？

loveliufudan

首先，回归曲线图可以用命令twoway function来绘制，但是这种方法可能无法绘制出你期望的曲线。如果你想要更精细的曲线，可以使用多项式回归或样条回归。下面是使用Stata中的命令来进行样条回归和绘制回归曲线图的步骤：运行样条回归命令。例如，使用mkspline命令可以对自变量进行样条回归：mkspline dose, generate(spline) cubic nknots(3)其中，d

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问求助人毛囊外/内毛根鞘细胞提取

loveliufudan

毛囊外/内毛根鞘细胞的提取方法如下：毛囊的收集首先需要收集到毛囊，可以通过人体自身取毛囊的方法，也可以通过手术切除毛囊。切除毛囊需要手术医生进行，需要注意消毒和操作规范。毛囊的分离将毛囊放入含有0.25%胰酶的PBS缓冲液中，在37°C孵育1小时，之后使用针头和显微镜等工具分离毛囊外/内毛根鞘细胞。细胞的培养将分离出的细胞进行培养，可以使用DMEM/F12等含有适宜营养成分的培养基，加入适当浓度的

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问CCK8测细胞增殖铺板后多久的加入CCK8试剂呢？

z流沙z

首先需要摸索合适的细胞密度，铺板后次日可以加cck8

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问原代细胞长成这样是什么

dxyc42u

继续观察几天，24小时太短不能说明问题

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问求助有无养H295R细胞的大佬

z流沙z

小圆点可能是细胞碎片，可以pbs多洗两遍，消化离心后可去除。细胞培养主要注意细胞密度和控制消化时间

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问胶原酶分种属区别吗

sswei

胶原酶分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝细胞专用胶原酶，要根据所要分离消化的组织类型选择胶原酶类型。并不分种属区別。胶原酶Ⅰ用于上皮、肺，脂肪和肾上腺组织细胞的分离。用于消化组织中连接部分使其成为单个细胞，用于哺乳动细胞的分离。

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问切片子出现的问题

sswei

存在切片物料硬度太高；切片物料的粘汁将刀刃粘住；用力不均匀等情况。

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问有老师同学给大鼠尾动脉置管吗？求分享经验

dxyc42u

使用最细那种针穿刺比较好弄一些

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问小鼠B淋巴瘤模型

章鱼丸子呀

请问您构建的是外周还是中枢呀？现在构建成功了吗？谢谢！

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