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科研学霸天团，48小时有问必答

问想问一下线粒体、内质网、溶酶体这三个细胞器在正常细胞中的细胞器粘度是多少啊，病变的细胞中粘度为多少？

周末也要努力呀

正常细胞代谢过程中的细胞粘度是一个动态的参数，不仅受细胞器的存在和状态影响，还受到细胞的环境和调节的影响。因此，很难给出线粒体、内质网和溶酶体在正常细胞中的粘度具体数值。线粒体、内质网和溶酶体都属于细胞的重要细胞器，它们的结构和功能对细胞的正常代谢至关重要。细胞粘度主要由细胞质中的黏性物质（如细胞器、细胞骨架、细胞器膜等）影响，而这些物质的浓度和特性会因不同细胞类型、发育阶段和环境条件而有所变化。

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问有同学和老师在c2c12细胞上诱导弓形虫速殖子形成包囊吗？求大神指导步骤。

周末也要努力呀

培养C2C12细胞：首先，将C2C12细胞在合适的培养基中培养至适当的生长状态。确保细胞的健康状态和适当的细胞密度。弓形虫感染：将经过培养并达到适当密度的C2C12细胞与具有速殖子能力的弓形虫（例如T. gondii RH株）接种。接种时，将弓形虫接种在C2C12细胞培养基中，细胞和弓形虫的比例根据实验需求设置。感染后培养：将感染的细胞在37摄氏度的培养箱中继续培养。弓形虫将在细胞内生长和繁殖，并

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问求助大神：大家有用过促进细胞有丝分裂的试剂吗？

huarenqiang5

是的，这些生长因子可以促进细胞分裂。

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问测定脂肪细胞中的甘油三酯应该怎么测?我看还需要测蛋白浓度校正，那么一个孔的细胞如何测了甘油三酯，又测蛋白浓度呢？

小小翻车鱼

测定脂肪细胞中的甘油三酯可以使用一种称为甘油三酯试剂盒的化学试剂盒。这种试剂盒通常基于酶促反应，可以测量样品中甘油三酯的含量。对于蛋白浓度校正，可以在同一样品中测量蛋白质的含量。常见的方法是使用BCA或Bradford等蛋白质测定试剂盒，根据试剂盒的说明进行操作。然后，将甘油三酯的浓度与蛋白质的浓度进行校正，以得到准确的甘油三酯含量。对于一个孔的细胞样品，您可以使用以下步骤来同时测量甘油三酯和蛋白

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问细胞传代第二天贴壁正常生长，第三天全飘起来了，可能是什么原因呀

Keven轩

血清添加浓度或量不足，或者是有细胞污染

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问怎样肉眼估计培养皿中细胞密度百分比？

qtt0208

看视野中细胞与空白的占比，细胞占满一般视野就是50%，这个是大概值，如果要准确值还是建议消化下来混匀后用细胞计数板或者细胞计数仪

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问PD0325901 使用浓度

huarenqiang5

PD0325901浓度非常低时(10 nM)也明显抑制携带BRAF突变的PTC细胞生长，且同样浓度时只稍微提高携带RET/PTC1重排的PTC细胞生长。

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问我的细胞养不了几天就会出现黄色的团块这是什么污染呢？

feixue7758527w

这个很有可能是离心后没有清理干净细胞杂质或者死细胞的，或者细胞状态不好，换一种培养基看看吧

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问细胞铺板选择什么培养基？我看有些师姐用不同的培养基，不太明白，如何区别完培，基培，无抗完培等培养基呢？

静心观照

DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12等都是应用非常广泛的基础细胞培养基。1.RPMI-1640 Medium：广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。2.Mini

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问流式分选是否可以用多克隆抗体？

balalaLy

首选单克隆抗体，具有特异性，结果更准确，次选多克隆抗体

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问请问各位这是什么原因呢？转膜后样品孔道也有maker，是加样的时候飘样了吗？

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1、loading buffer的甘油太少，时间放置过长，浓度不对2、电泳液放置时间过长，浓度太高3、胶没配好或者把梳子用力不均匀，上样孔有凝胶

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问培养细胞用的玻璃瓶去干热高温灭菌是锡箔纸还是铝箔纸？

粥辰辰辰辰

用铝箔纸，铝箔有对水汽、空气、紫外线和细菌等的屏蔽性能，因此玻璃血清瓶以铝箔纸包覆瓶盖轻轻缠绕就行，高温高压的时候盖上没事

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问C2C12细胞培养增殖和分化培养基都用的马血清吗

sswei

C2C12细胞增殖培养基：高糖DMEM+10％FBS+1％PSC2C12细胞分化培养基：高糖DMEM+2％马血清+1％PS

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问96孔板细胞培养

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通常，会在96孔板的每个孔上，加入100微升的细胞悬浮液。把它从左边加到洞底。加入一半板材后，与未加入的细胞悬浮液混合，然后继续加入剩余的一半板材。盖上盖子后，用左手轻轻握住木板的左边，然后用右手轻拍木板的右边缘。注意力集中在力量上(通常敲击它三次)。太多或太多次会导致细胞堆积。顺时针转动盘子(逆时针方向不好) ，将剩下的三面逐一拍打，静置5分钟左右，然后放入37度的培养箱中。

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问新手求助，小鼠骨髓细胞分选pDC

sswei

磁珠分选的细胞活力会更好，并且因为磁珠分选的工具可以很好的放进无菌台中，所以也不用太担心细胞分选后的染菌问题

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问【求助】微生物平板使用问题

sswei

从冰箱内取出哥伦比亚血琼脂培养基,并使其温度在接种前接近室温.

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问原代肠道上皮细胞培养

sswei

最重要的是注意污染，肠道本身细菌比较多，必须保持无菌操作,以避免细胞被细菌、真菌等微生物污染。

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问【求助】EAE模型的MOG多肽真的溶于PBS吗？

sswei

多肽（Peptide）是由氨基酸分子组成的短链寡聚肽或多肽，具有生物活性。多肽溶解度通常受多种条件的影响，包括温度、pH、离子强度等因素，这些条件能够影响其胶束形成、电荷特性和亲疏水性等性质。由此可见，多肽在水中是否溶解，以及在PBS缓冲液中是否溶解，需要考虑其自身化学特性和溶剂条件。一般来说，PBS缓冲液的离子强度和pH值都很接近生理条件，且溶液中含有磷酸盐离子，有助于维持生物大分子的结构和功能

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问细胞无缘由死亡

秋秋欣欣

可能是细胞损伤或者老化比较严重

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问HT-29，在t25培养瓶里中间长地不好，四周还行，是什么原因呢(눈_눈)，求求救救我

sswei

如果是底面积较大的孔或培养皿,建议在接种完细胞之后,直接用吸管进行每个孔多个点吸——吹的办法,让其均匀后,小心轻放置培养箱静置一段时间.

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