有同学和老师在c2c12细胞上诱导弓形虫速殖子形成包囊吗？求大神指导步骤。

培养C2C12细胞：首先，将C2C12细胞在合适的培养基中培养至适当的生长状态。确保细胞的健康状态和适当的细胞密度。

弓形虫感染：将经过培养并达到适当密度的C2C12细胞与具有速殖子能力的弓形虫（例如T. gondii RH株）接种。接种时，将弓形虫接种在C2C12细胞培养基中，细胞和弓形虫的比例根据实验需求设置。

感染后培养：将感染的细胞在37摄氏度的培养箱中继续培养。弓形虫将在细胞内生长和繁殖，并形成小囊泡（速殖子）。

包囊冲击：在适当的时间点，可以使用冲击法来诱导速殖子形成包囊。冲击法通常涉及将培养基中的细胞进行机械刮擦、冷冻-解冻或用化学物质（如乙醛）处理。这种处理会刺激弓形虫形成成熟的包囊。

包囊观察：使用显微镜观察C2C12细胞中包囊的形成情况。成熟的包囊通常是圆形或椭圆形，包裹着速殖子。

可以通过注射在体外用TAg致敏过的来自于DC细胞的外质体，在细胞内诱导了弓形虫属特异性Th1分子免疫应答并形成包囊

c2c12细胞常规传代培养。接种虫体前24h进行细胞计数，取3ml悬液传入25ml培养瓶，每瓶内细胞密度约为1.90x105/ml。

（一）弓形虫接种并调定 pH 值：弓形虫常规传代，并收集速殖子，将虫体按105、104、103数量级分别接种于准备的载体细胞。37C孵育6h后，更换为调定了 pH 值的培养基（用0.5NpH8.0).

（二）补充 c2c12细胞接种后逐日观察，依培养瓶内c2c12细胞被虫体破坏情况补充 c2c12 细胞。补充细胞6h后，将培养瓶内液体倾出，接原组别加入pH8.0、pH7.0或pH6.5的新培养基维持培养。

（三）包囊的维持：倒置显微镜下至少在3个视野见到每个视野内有1个以上包囊时，为包囊初现时间。换液时，收集培养瓶中液体，1500rpm离心10min，沉淀移回原瓶，加入同一 pH 值的培养液，根据瓶内 c2c12 细胞量决定补充或不补充细胞。37℃温箱孵育，记录维持天数。