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        细胞铺板选择什么培养基?我看有些师姐用不同的培养基,不太明白,如何区别完培,基培,无抗完培等培养基呢?

        相关实验:🔥 细胞铺板技术

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        dxy_jb3p0q9r


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        3 个回答

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        静心观照

        有帮助

        DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12等都是应用非常广泛的基础细胞培养基。

        1.RPMI-1640 Medium:广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养,是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。

        2.Minimum Essential Medium(MEM):也称最低必需培养基,它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。成分简单,可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。MEM-Alpha一般用于培养一些难培养细胞类型,而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养。

        3.DMEM-高糖(标准型):是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差,但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养,也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。

        4.DMEM-低糖(标准型):是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养。低糖适于依赖性贴壁细胞培养,特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。

        5.DMEM/F12:DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。F12培养基成分复杂,含有多种微量元素,和DMEM以1:1结合,称为DMEM/F12培养基(DME/F12medium),作为开发无血清配方的基础,以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。为了增强该培养基的缓冲能力,改良之一是在DMEM/F12(1:1)中加入15mM HEPES缓冲液。

        最初的 DMEM 中,葡萄糖浓度为 1 g/L,现在称其为低糖型 DMEM,适合培养多数哺乳动物细胞;

        高糖型 DMEM 中的葡萄糖浓度为 4.5 g/L,适合生长速度快,附着性较差的肿瘤细胞;

        使用无糖培养基的主要目的是,通过控制细胞的能量来源,研究细胞的代谢过程或葡萄糖利用效率。









        user-title

        sswei

        有帮助

        细胞板子不需要提前用培养基润洗,直接从边上滴入混有细胞的培养基

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        huarenqiang5

        有帮助

        如何正确选择细胞培养板呢?




        1、孔的数量


        根据不同的实验背景以及筛选通量去确认培养板的孔数,例如 WB、流式检测相关,需要较多的细胞样本量,最终的检测通量较低,一般会选择 6 孔板、24 孔板;而实验通量较高,最终的检测手段可以实现自动化,多数可以选择 96 孔板或者 384 孔板,例如:CTG 实验、CCK8 实验等。


        2、孔的形状


        一般贴壁细胞的培养,进行成像或分光光度的测定首选平底的培养板;而悬浮细胞的培养,为防止细胞的附着,需要使用 U 底的培养板。


        3、孔板颜色


        发光检测—白色微孔板;以便最大限度提高信号的反射率。荧光检测—黑色微孔板;以吸收激发信号,可以防止相邻孔之间的信号串扰。顶部读数—底部不透明的微孔板。显微镜或底部读数—底部透明的微孔板。


        4、表面处理技术


        贴壁细胞需要使用TC表面,微孔板底部经过特殊技术处理更为亲水,有助于细胞贴壁,推荐赛默飞NUNC Nunclon Delta系列相关培养板;而悬浮细胞需要非TC处理表面;对于3D细胞和类器官的培养,需要使用Nunclon Sphera超低吸附表面,支持多种细胞生成球体,且已证实在类器官培养方面效果显著。

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