实验问答22,704,788 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问细胞污染时都会有哪些现象

bamboopiggy

长的速度变慢，细胞出枝叉，液体容易变黄，液体中有小点点，液体中有絮状物

4 回答802 围观

问细胞培养过程中，细胞周围包括细胞上有很多小黑点，怎么办?

Eason老歌迷

看到有小黑点，可以这样做:先要用肉眼去观察培养基是不是混浊。然后在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是不是能游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。培养原代细胞中出现小黑点，可能是原代组织中的杂质，多次传代可以消除。

3 回答575 围观

问HEK293细胞或CHO-K1细胞在摇瓶培养

Eason老歌迷

第一，换液时动作要轻。第二，293细胞在低代时容易贴壁，生长良好，在传到几十代以后，易聚集成团，且贴壁不牢，用PBS冲洗时即可能脱落，即使消化后也不容易吹打成单细胞悬液。第三，刚复苏的293贴壁很慢，复苏接种后24小时内,应尽量减少观察细胞次数或不作观察,以免因晃动而影响细胞贴壁。复苏后48小时左右观察贴壁情况并进行首次更换培养基比较合适。

4 回答639 围观

问DF1细胞张速过快，怎么办？

dxy_dfcqaej4

1.降低细胞密度2.培养基血清降一下

3 回答370 围观

问提小鼠原代肺成纤维细胞三个月一直是长着长着细胞就死了

Eason老歌迷

你可以试试以下方法：1. 配制0.25%的胰酶，-20度冻存，用时取出，37度水浴温浴。然后将其pH值调至7.0左右，因为胰酶在碱性环境中，消化作用最强。2. 取出细胞把原液倒出，用D-Hanks洗2/3次以去除残留的血清等抑制胰酶消化的因素，加2-3ml经预热的0.25%的胰酶。轻轻晃动瓶子，使瓶中细胞都能接触倒胰酶。倒置显微镜下观察，如果见到细胞变圆，间隙增大（时间约为2分钟）时，倒掉胰酶，用

4 回答367 围观

问想问下各位大佬：M-CSF诱导小鼠骨髓来源的BMDM，诱导完成后，种板的细胞培养基中还需要给予M-CSF嘛？

bamboopiggy

这个不是加不加MCSF的问题，而是BMDM不可传代，不可用胰酶消化，建议直接铺板，进行诱导，诱导后直接进行实验，不易过长时间培养，会恢复原来的圆形形态。

3 回答4297 围观

问猪肺原代肺巨噬细胞生长速度比较慢，贴壁效果不好怎么办

Eason老歌迷

细胞生长速度慢的解决办法:增加起始培养细胞浓度；换入新鲜配制培养液；补加生长因子；血清需要保存在5℃到20℃，培养液需在2-8℃避光保存；含血清培养液在2-8℃保存，并在2周内用完；要轻轻吹打消化细胞；分离培养物，检测支原体；比较新培养液与原培养液成分，让细胞逐渐适应新培养液。细胞不贴壁:细胞的传代最重要的是胰酶处理时间：消化不够细胞本身就是成团的；若胰酶处理太久，容易造成细胞膜蛋白损伤，使细胞贴

5 回答645 围观

问[求助]肠神经元原代培养

天一湖医者

可以参考下这个文献https://xueshu.baidu.com/usercenter/paper/show?paperid=738210c5983acc2c5f8741f441763fcc

4 回答1891 围观

问Tunel凋亡和双染测凋亡有什么本质差别吗?

Eason老歌迷

双染法特异性高，简单易行。tunel灵敏度高，但是成本高。最好是配合着用

4 回答630 围观

问iPS细胞在复苏培养的过程中容易遇到的问题有哪些？

天一湖医者

培养细胞不贴壁？悬浮细胞成簇？原代细胞培养物污染？培养细胞死亡等问题。

3 回答746 围观

问请问肿瘤悬浮细胞，最近开始变形长伪足，换了培养基跟血清，我怀疑gibco血清是假的，有所好转，培养基血清会导致细胞这样么？为什么

Eason老歌迷

换了培养基和血清，有所好转，那说明还是和这两个因素有关……

3 回答539 围观

问最近好几次Western blot出来的结果不满意，怎么办呢？

丁冉1234

有可能是曝光液时间久了失效或是条带上沾了太多的曝光液

8 回答657 围观

问MTT测药物对细胞的毒性，测的OD值必须在0-0.7范围内吗？

未来9

一般合适的OD值是在0.1-0.7之间，一般大于1可能就不会不准了

4 回答2177 围观

问收集鳟鱼胚胎提取物时，经过胚胎融化、过滤、离心厚，收集到的上清液，怎样稀释到理想蛋白质浓度？

我也是锦鲤ye

测量蛋白质浓度，用 LDF 将提取物稀释至理想的浓度。

3 回答407 围观

问PANC-1细胞为什么看上去长不满

半糖奇朵

可以调整下培养基血清的配比，或者查一下权威文献中该细胞系的培养方法

4 回答356 围观

问检测细胞凋亡时，PI染色法的染色剂制备过程是什么，与AO染色法相比有什么优点？

bamboopiggy

这两个方法都可以，看你们实验室有那种就用那种呗，一般用PI的多，是因为PI只能染死细胞，正常细胞不能着色吖啶橙(Acridine Orange，AO)为一种荧光染料，该染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使核DNA和RNA染色。其激发波长为488nm，吸收波长为515nm。它与细胞中DNA和RNA 结合量存在差别,复合物可发出不同颜色的荧光，红色荧光为AO-DNA(F>600nm),绿色荧光为A

3 回答1132 围观

问我想请问一下怎么找到我做的抗体有几种亚型呢？

BelleK1EH

1.建议从研究相关文献资料中寻找抗体亚型相关资料2.也可以去相关厂家网站寻找

6 回答594 围观

问人来源正常肝实质细胞

bamboopiggy

Hepatocytes are freshly isolated and cryopreserved on the same day. All cryoplateable hepatocyte characterization information can be found by viewing the characterization tables at www.bioreclamationi

3 回答2137 围观

问求助，如何判断细胞的对数生长期

天一湖医者

判断细胞是否处于对数生长期的方法：1. 细胞汇合度达到70%-80%时基本上是出于对数期，在显微镜下一观察就可以。 2. 做生长曲线一作图。3. 细胞计数，养上几个孔的细胞，每隔1-2天消化一个孔的细胞下来用台盼蓝染色血球计数板计数。4. 如果是简单的判断一下，要搞清楚细胞生长的不同时期，刚开始细胞生长一般是悬浮的，后来贴壁生长，直到生长到长满瓶底80%时间都是对数期。细胞的对数生长期：对数

4 回答12365 围观

问细胞提取rna跑胶条带太暗，还有弥散条带怎么办

Eason老歌迷

扩增杂带?解决办法:退火温度提高，延伸时间缩短，混合样品时放冰上，尽量别对着样品说话，以免污染样品。

5 回答2004 围观

关于丁香通

公司信息

个人用户

企业机构

无忧采购轻松科研

提问

扫一扫

实验小助手

扫码领资料

反馈

TOP

打开小程序